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一、名词解释

1． SDS 电泳（SDS-PAGE ）

【答案】SDS 电泳（SDS-PAGE ）是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小，在恒定pH （碱性） 缓冲系统中分离的方法，主要用于测定蛋白质亚基分子质量。

2． Molecular Bescons

【答案】分子信标。分子信标是指一种具有自身配对区的DNA 寡核苷酸分子探针，利用荧光标记探针的碱基配对原理，通过观察探针荧光显示或淬灭的现象，确定目的基因的分子标记。

3． 突变

【答案】突变是指由自身或环境因素导致的DNA —级机构的改变，主要包括碱基的增添、缺失或改变等，染色体结构的畸变也会导致DNA 的突变。

4． 拓扑异构酶（topoisomerase ）

【答案】拓扑异构酶是指能在闭环DNA 分子中改变两条链的环绕次数的酶，其作用机制是先切断DNA ，让DNA 绕过断裂点以后再封闭形成双螺旋或超螺旋DNA 。

5． 基因扩増

【答案】基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象，结果使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要。

6． 聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）

【答案】聚合酶链式反应，简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应有选择地大量扩增 （包括分离）一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补，经过模板DNA 变性，模板DN Α-引物的配对，在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应，三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链，经多次循环后得到大量目标DNA 片。

7． CpG 岛

CpG 岛是指在人类基因组中分布很不均一的CpG 双核苷酸在基因上成串出现所形成【答案】

的区段。CpG 岛经 常出现在真核生物的管家基因（house-keeping gene）基因的调控区，在其它地

方出现时会由于CpG 中胞嘧啶甲基化引发碱基转换，引发遗传信息紊乱。

8． DNA 复性（DNA renaturation）

【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。

9． 基因超家族

【答案】基因超家族是指一组由于序列的同源性通过序列比对可以彼此匹配而相关的基因。判定同源的主要标准是核苷酸残基的保守性，并参考功能的相似性。

10．tmRNA

【答案】转移—信使RNA 。tmRNA 是指细菌体内一种修复翻译水平上受阻的遗传信息表达过程的反式翻译机制的核心分子，它兼具tRNA 和mRNA 的特点，在SmpB 蛋白的帮助下特异性识别携带mRNA 缺失体的核糖体，在核糖体蛋白S1的传递作用下结合在A 位点上，一方面延续被中断的mRNA 上的遗传信息，一方面终止蛋白质的合成，释放被束缚的核糖体和tRNA 进入新的翻译过程。

二、填空题

11．大肠杆菌DNA 聚合酶_____的生理功能主要起修复DNA 的作用。

【答案】II

DNA 聚合酶I 既能合成DNA 链，【解析】又能降解DNA 链，保证了DNA 复制的准确性; DNA

聚合酶II 具有3' →5' 外切酶活性，但酶活性低，目前认为其生理功能主要是修复DNA ; DNA 聚合酶III 有5' →3'DNA 聚合酶活性也有3' →5' 外切酶活性，活性较强，是大肠杆菌DNA 复制中链延长反应的主导聚合酶。

12．在分子生物学发展史上，两次获得诺贝尔奖的科学家是英国著名的_____，他的两项贡献分别是_____和_____。

【答案】Sanger ; 蛋白质序列分析; DNA 序列分析法

【解析】Sanger 利用纸电泳及层析技术首次阐明胰岛素的一级结构，开创了蛋白质序列分析的先河，获1958年诺贝尔化学奖; 1980年，Sanger 和Gilbert （英）设计出一种测定DNA 分子内核苷酸序列的方法，而获得诺贝尔化学奖。

13．转座作用可能引起的突变类型包括a_____、b_____、c_____。

【答案】重复:缺失:倒位。

【解析】转座子插入后往往会造成插入位置上出现受体DNA 的少数核奋酸对的重复; 当复制性转座发生在宿主DNA 原有位点附近时，往往导致转座子两个拷贝之间的同源重组，引起DNA 缺失或倒位。

14．氨酰tRNA 合成酶既能识别tRNA ，也能识别相应的_____。

【答案】氨基酸

15．用于基因克隆载体的质粒都具有_____、_____和_____三种必需条件。

【答案】复制区；选择标记；多克隆位点

16．大肠杆菌表达质粒除质粒复制起点外，通常还包括下列组成部分：a._____ 、b._____ 、c._____ 、d. _____和e._____ 。

【答案】具有抗菌素抗性基因；多克隆位点；启动子；前导序列；加尾信号

【解析】一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足如下几个方面的条件：（1）具有复制起点；（2）具有抗菌 素抗性基因；（3）具若干限制酶单一识别位点；（4）具有较小的相对分子质量；（5）较高的拷贝数；（6）还应具 备与宿主细胞相适应的启动子、前导顺序、増强子、加尾信号等DNA 调控元件。

三、简答题

17．简述DNA 结合结构域分类及碱性亮氨酸拉链结构的特点。

【答案】（1）蛋白质与DNA 结合区域存在一些特殊的基序（motif ）结构，主要有：

①螺旋一转角一螺旋（HTH ）基序。两段螺旋被一短的转角结构分开，其中一段螺旋为DNA 识别螺旋。 ②锌指基序。由肽链的保守序列中的一对组氨酸加一对半胱氨酸

或2

对半胱氨酸

与一个锌离子形成配位键，这些氨基酸对之间的多肽链成环状突出并折迭成指形结构，多个指结构常串联重复。 锌指族转录因子以二聚体形式同DNA 上的顺式调控元件结合。含锌指基序的转录因子，与GC 盒结合的SP1、 类固醇激素受体家族，抑癌蛋内

1^11都位于螺

等。 ③亮氨酸拉链基序。由一段每隔6个aa 就有一个Leu 的伸展肽链组成，这些周期性出现的 旋的同一侧面，因此两条均含Leu 拉链基序的蛋白质通过亮氨酸侧链的相互作

用形成二聚体。具有亮氨酸拉链基 序的转录因子，如原癌基因

基因产物 及其结合蛋白Max 。 ④螺旋一环一螺旋（HLHt ）基序。由2个a 螺旋间隔一个非螺旋的环（loop ）组成，如原癌⑤同源域（ho-meodomain ）蛋白。来自控制躯体发育的基因，长约60个氨基酸，其中的DNA 结合区与螺旋 一转角一螺旋相似，主要与DNA 大沟相结合。

（2）碱性亮氨酸拉链结构的特点：

①两个蛋白质分子近处C 端肽段各自形成两性a 螺旋, ot 螺旋的肽段每7个氨基酸残基出现一个亮氨酸残基， 两个a 螺旋的疏水面互相靠拢，两排亮氨酸残基疏水侧链排列成拉链状，形成疏水键使蛋白质结合成二聚体；

②亮氨酸拉链区并不能直接结合DNA , 只有肽链氨基端20~30个富含碱性氨基酸结构域与