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题目:板栗多糖的分离纯化、结构分析及体外抗氧化研究

关键词:板栗,多糖,分离纯化,体外抗氧化

  摘要


板栗(Castanea mollissima Blume)属壳斗科(Fagacaea)栗属(Castanea),药食两用。全世界有12~17种,我国有4种及1变种。目前国内外对板栗多糖的研究鲜见报道。本研究选用陕西省镇安县板栗,采用现代分离分析技术提取和分离纯化板栗多糖,对纯化部分进行了结构测定及表征,并采用现代功能评价方法初步研究了板栗多糖粗品的体外抗氧化活性,研究主要成果如下:
(1)热水浸提法提取板栗多糖,正交试验得到最佳工艺条件组合为:料液比1:30、浸提温度85℃、浸提时间3h,提取3次,提取率为12.64%。
(2)超声波辅助法提取板栗多糖,正交试验得到最佳工艺条件组合为:料液比1:25,超声时间50min,总浸提时间3h,提取温度75℃,超声功率150W,提取1次,在此条件下提取率为14.17%。
(3)板栗多糖(CPS)粗品经过离子交换纤维素DEAE-52分离得到各组分,选用SephadexG-100葡聚糖凝胶柱层析进一步分离纯化得到两种单糖组分:CPS-a、CPS-b,并经比旋光度法纯度鉴定验证CPS-a、CPS-b为均一的板栗多糖组分。通过高效凝胶渗透色谱法测定板栗多糖CPS-a和CPS-b分子量分别为34500Da和52100Da。
(4)通过纸色谱法和气相色谱法测定CPS-a、CPS-b单糖组成:CPS-a主要由葡萄糖、甘露糖、木糖及阿拉伯糖组成;CPS-b主要由葡萄糖、果糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖组成。
(5)红外光谱分析得:CPS-a和CPS-b在3400cm-1、2900 cm-1、1640 cm-1、1400 cm-1、1075-1000 cm-1附近区域都有吸收峰,这些区域的吸收峰都是多糖的特征吸收峰。CPS-b在1354 cm-1、1273 cm-1附近的吸收峰都是S=O伸缩振动引起,分别是磺酰基和硫酸基,表明此糖链可能是硫酸化多糖。
(6)板栗多糖体外抗氧化活性测定结果显示,随着浓度的增大,其还原力和对有机自由基(DPPH•)、超氧阴离子自由基(O2-•)、羟基自由基(•OH)的清除能力也随之增强,呈现良好的量效关系。