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题目:石榴皮多酚纯化及其脂质体的制备

关键词:石榴皮多酚,FC比色法,纯化,脂质体,响应曲面

  摘要


本论文以石榴皮多酚为考察对象,采用FC比色法对石榴皮中多酚类物质的含量进行测定,以确定一种适合石榴皮中多酚类物质含量测定的规范化方法;选用XRD-6型树脂对提取出的石榴皮多酚及多酚的主要成分安石榴苷进行动态纯化研究,确定动态纯化过程中多酚吸附和解吸的最佳参数条件,并确定了获取高纯度的多酚和安石榴苷的最佳纯化时间段;以纯化后的石榴皮多酚为研究对象,对其进行包覆处理,并对制备过程的工艺进行了优化,最后,评价了在优化条件下制备的石榴皮多酚脂质体的特性和质量。研究成果如下:
(1)通过正交优化法确定了FC法测定石榴皮中多酚含量的最佳条件。即:在测量石榴皮多酚含量时,取稀释好的多酚溶液1mL,加入0.6 mol/L 的FC试剂1 mL,混匀,在5~8 min 内加入质量浓度为0.15 g/mL的Na2CO3 2 mL,充分摇匀后定容至25 mL的棕色容量瓶中,在25 ℃条件下反应50 min,该条件下多酚显色反应最充分。
(2) 建立了XRD-6型树脂动态纯化石榴皮多酚条件的数学回归方程模型,并确定了纯化参数。
a吸附试验优化的数学模型为:Y=92.54-0.95A-1.48B-1.91C-0.18AB-2.06AC+0.36BC-0.28A2-0.34B2-4.82C2,各因素对吸附率影响的主次顺序:上样液浓度>上样液pH>吸附速率。最佳纯化条件:吸附速率为0.8 mL/min,上样液pH为3,上样液浓度为1.17 mg/mL。在此条件下石榴皮多酚的吸附率理论值为94.18%。?
b解吸试验优化的数学模型为:Y=92.59-4.92A+4.56B-1.17C-1.28AB+2.97AC-0.92BC-2.13A2-8.44B2+0.56C2,各因素对解吸率影响的主次顺序为:乙醇体积分数>解吸液pH>解吸剂量。最佳解吸条件:乙醇体积分数为70%,洗脱液pH值为9.02,解吸剂量为2.0 BV。在此条件下石榴皮多酚的解吸率理论值为101.43%。
(3)确定了获取高纯度的多酚和安石榴苷的最佳时间段。纯化过程第3个10 min收集的解吸液中多酚和安石榴苷的纯度均达到最大,分别为86.28%和67.51%。
(4)建立了逆向蒸发法制备石榴皮多酚脂质体二次多项数学模型并确定了最佳制备参数。制备石榴皮多酚脂质体优化的数学模型为:Y=52.14+2.57A+2.40B-0.93C-1.57AB-0.16AC-0.05BC-6.88A2+0.34B2-1.43C2,各因素对包封率影响影响的主次顺序为:SPC/CH>O/A>pH。最佳制备工艺条件为:SPC/CH值为3.08,O/A值为4,缓冲液pH值为6.17。在此条件下制备的石榴皮多酚脂质体包封率理论值为55.08%。
(5)评价了石榴皮多酚脂质体的性质和质量。制备的石榴皮多酚脂质体为淡黄色的均匀混悬液,其显微结构呈球形或椭球形,粒径为91.13±2.5 nm,分散系数(Pdi)是0.613,分布均匀,电位为-55.7 mv,其表面带负电荷,体系比较稳定。体外释放程度缓慢,缓释率延长32 h,缓释效果明显。稳定性方面,在4 ℃条件下储存稳定性良好,60天之内,包封率共下降13.72%,外观上基本无絮凝和沉淀现象。