2017年青岛大学医学院889分子生物学[专业硕士]考研冲刺密押题
● 摘要
一、名词解释
1.
【答案】,是指一种利用非放射即荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization)
性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性,荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合
起来,通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数,从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断,为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
2. DNA 复性(DNA renaturation)
【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。
3. 穿梭载体(shuttle vector)
【答案】穿梭载体是指具有多个复制子能在两个以上的不同宿主细胞复制和繁殖的载体。
4. 转录单位(transcription unit)
【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基因序列范围,可以是单一基因,也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列,是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段,这是转录单位的重要特征。
5.
【答案】泛素(遍在蛋白)。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中,主要功能是标记需要分解掉的蛋白质,使其被水解的小蛋白。
6. DNA 解链温度(melting temperature, T m )
【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。
7. 蛋白质印迹法(Western blotting)
【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜(如硝酸纤维素膜、尼龙
膜等)上,再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等,检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体,由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。
8. Telomerase
【答案】端粒酶。端粒酶是指由蛋白质和RNA 两部分组成的一种反转录酶,其中RNA 作为模板序列,指导合成染色体末端的端粒DNA 的重复序列片段。
9. 拓扑异构酶(topoisomerase )
【答案】拓扑异构酶是指能在闭环DNA 分子中改变两条链的环绕次数的酶,其作用机制是先切断DNA ,让DNA 绕过断裂点以后再封闭形成双螺旋或超螺旋DNA 。
10.MissenseMutation
【答案】错义突变。错义突变是指DNA 分子中碱基对的取代,使得mRNA 的某一密码子发生变化,由它所编码的氨基酸基变成另一种的氨基酸,使得多肽链中的氨基酸序列也相应的发生改变的突变。
二、简答题
11.比较原核与真核基因组结构特点。
【答案】(1)原核基因组的结构特点如下:
①结构简练,非编码序列极少,这与真核细胞DNA 冗余现象完全不同;
②存在转录单元,转录产物为多顺反子mRNA ;
③有重叠基因,同一段DNA 含有两种不同蛋白质的信息。
(2)真核基因组结构特点:
①真核基因组庞大,一般都远大于原核生物的基因组;
②真核基因组存在大量的重复序列;
③真核基因组的大部分为非编码序列,占整个基因组序列的90%以上,这是真核生物与细菌和病毒之间的最主要的区别;
④真核基因组的转录产物为单顺反子;
⑤真核基因是断裂基因,有内含子结构;
⑥真核基因组存在大量的顺式作用元件,包括启动子、增强子、沉默子等;
⑦真核基因组中存在大量的DNA 多态性;
⑧真核基因组具有端粒结构。
12.简述摆动学说。
【答案】1966年,Crick 根据立体化学原理提出摆动学说,解释了反密码子中某些稀有成分(如I )的配对。摆动学说认为:
(1)在密码子与反密码子的配对中,前两对严格遵守碱基配对原则,第三对碱基有一定的自
由度,可以“摆 动”,因而使某些tRNA 可以识别1个以上的密码子.
(2)究竟能识別多少个密码是由反密码的第一个碱基的性质决定的。
①第一位碱基为A 或C 者,只能识别1种密码;
②第一位碱基为G 或U 者可以识别2种密码;
③第一位碱基为I 者可识别3种密码。
13.什么是编码链? 什么是模板链?
【答案】(1)编码链即有义链,是指DNA 双链中与mRNA 的序列(在RNA 中是以U 取代了DNA 中的T )和方向相同,不能充当转录模板的那条DNA 链。
(2)模板链即反义链,是指DNA 双链中作为转录模板利用碱基互补配对原则指导mRNA 前体合成的那条DNA 链。
14.什么是完全基因敲除和条件基因敲除?
【答案】(1)完全基因敲除
完全基因敲除是指通过同源重组法完全消除细胞或者动物个体中的靶基因活性;
(2)条件基因敲除
条件基因敲除是指通过定位重组系统实现特定时间和空间的基因敲除。
15.简述蛋白质生物合成的过程。
【答案】蛋白质生物合成包括5步:
(1)氨基酸的活化:在氨酰合成酶的作用下,将氨基酸活化形成氨酰; (2)起始:原核生物需要三个起始因子(IF )、真核生物需要更多起始因子(elF )的参与,与mRNA 、核糖体大小亚基结合形成起始复合物;
(3)延伸:在延伸因子的作用下催化进位、转肽与移位反应;
(4)终止:需要释放因子(RF )参与,切开肽酰-tRNA 中连接tRNA 和肽链羧基端(C 端)氨基酸的酯键, 以及核糖体与mRNA 的解离;
(5)翻译后的折叠与加工:在分子伴侣的作用下完成新生肽的折叠与寡聚蛋白的组装;氨末端、羧末端的修饰;信号肽的切除;二硫键的形成;酶原的激活等。
16.tRNA 是如何转运活化的氨基酸至mRNA 模板上的?
【答案】(1)由于tRNA 的氨基酸臂上存在特定的识别密码可以为氨酰-A 合成酶所识别,在
将相应地氨基酸活化, 该酶的催化下,形成氨酰tRNA (起始氨基酸为Met-tRNAf 或fMet-tRNAf )。
(2)氨酰tRNA 结合GTP 的起始因子IF2-GTP (或延伸因子EF-Tu-GTT )结合形成三元复合物。
(3)该氨酰tRNA 上的反密码子通过碱基互补配对的原则识别mRNA 上相应的密码子与起始复合物的P (A )位点结合(只有第一个活化的氨基酸进入P 位点,链延伸过程中,氨酰tRNA
,这样就将活化的 氨基酸至mRNA 模板上。 均进入A 位点)