2017年南京大学医学院841分子生物学B考研题库
● 摘要
一、名词解释
1. 分子伴侣(molecular chaperone)
【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质,它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解,如热休克蛋白。
2. 单顺反子mRNA (monocistronic mRNA)和多顺反子mRNA (polycistronic mRNA)。
【答案】单顺反子mRNA 是指能翻译成一条肤链的信使核糖核酸(mRNA )来自单顺反子;
,多顺反多顺反子mRNA 是指两个以上相关基因串在一起转录所得到的信使核糖核酸(mRNA )
子mRNA 一般可同步翻译产生功能相关的多个蛋白质或酶。
3. 等电聚焦
【答案】
等电聚焦是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。
4.
【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件,它位于特定的mRNA 区域,可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物,继而发生构象重排,影响mRNA 活性。
5. 同源重组(homologous recombination)
【答案】同源重组是指发生在DNA 的同源序列之间的重组,真核生物的非姐妹染色单体的交换,细菌的转化、转导和接合,噬菌体的重组等都属于这种类型。同源重组要求较大的DNA 片段进行交换它们的序列相同或接近相同。
6. DNA 的甲基化(DNAmethylation )
【答案】DNA 的甲基化是指一种表观遗传修饰,它是由DNA 甲基转移酶催化s-腺苷甲硫氨酸作为甲基的供体,将胞嘧啶转变为
7. 基因扩増 甲基胞嘧啶的一种过程。
【答案】基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象,结果使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要。
8. DNA 解链温度(melting temperature, T m )
【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫
外吸收达到最大增值一半时的温度。
二、简答题
9. 真核和原核细胞的启动子结构和功能及翻译起始的差异与共同点。
【答案】(1)原核和真核启动子结构和功能
①原核生物启动子的结构特点:启动子区长约40bp ,-10序列是几乎所有启动子都含有的一个6bp 的序列,该六聚体通常位于转录起点上游l0bp 处,共有的-10序列是TATAT , 通常称为Pribnow 框,是RNA 聚合酶的 紧密结合位点;-35序列是另一个在大多数启动子中都可以找到的6bp 序列,该六聚体一般位于转录起始点上游35bp 处,共有的-35序列是TTGACA ,是RNA 聚合酶对启动子的识别有关序列,对转录起始频率影响最大。
②真核生物II 类启动子的结构特点:真核生物II 类启动子位于转录起始点上游-25至-30bp
,相当于原核生物的-10区的功能;在起始处的共同序列 TATAAA , 也称为TATA 区(Hogness 框)
位点上游-70至-80bp 处 还有另一段共同序列CCAAT , 这与原核生物-35区相对应,称为CAA T 区。
(2)原核生物与真核生物起始点上游区的结构比较
①原核基因启动区范围较小,一般情况下,TATAAT (Pribnow 区)的中心位于-10〜-7, 上游-70~-10
区为正调控因子结合序列,-20〜+ 1区为负调控因子结合序列;真核基因的调控区较大,TATAA/TA区位于 -30~-20, 而-110〜-40区为上游激活区。
②原核生物基因启动子上游只有TTGACA 区(-40〜-30)作为RNA 聚合酶的主要结合位点,参与转录 调控;真核基因除了含有与之相对应的CAA T 区之外,大多数基因还拥有GC 区和增强子区。
③原核生物RNA 聚合酶不需要大量转录因子参与,一种RNA 聚合酶能识别不同的结构基因;真核生物细 胞内由3种RNA 聚合酶,分别转录+同的基因,而且各自需要一系列转录因子参与转录起始。
(3)真核和原核生物翻译起始的比较
①共同点:都需要核糖体大、小亚基,mRNA , 起始氨酰-tRNA , 翻译起始因子,GTP , Mg 等参与。
②不同点:
a. 原核生物与真核生物翻译起始所需的起始因子不同,原核生物翻译起始因子为IF-1、IF-2和IF-3,而真核生物的起始因子为elF-l 、elF-2和elF-3。
b. mRNA模板不同,真核生物mRNA 分子5' 端有“帽子”结构,3' 端有poly (A )结构,原核生物mRNA 没有。
c. 真核生物40S 起始复合物形成过程有帽子结合蛋白eIF-4E 参与,而原核生物308起始复合物形成不需要帽子蛋白。
d. 核糖体不一样,原核生物翻译起始中是30S 小亚基,而真核生物中为40S 小亚基。e , 真核生物起始复合物形成中需要Met-tRNA Met 2+而原核生物需要的是fMet- tRNAfMet
10.新一代测序较之芯片技术优点有哪些?
【答案】新一代测序较之芯片技术优点主要是高通量、低成本。
(1)通过对标签SNP 进行GWAS (全基因组相关分析)分析,能找出不与周围SNP 连锁的位点;
(2)通过对大量的体细胞突变进行系统性深度序列分析,能阐明疾病的发生机制;
(3)能区分序列的边界以及高度相似的序列,对全基因组的覆盖率更敏感、更完整;
(4)能大范围鉴定各种转录调节因子并研究其功能,探索生命现象的调节机制;
(5)能发现新的转录物和变异体,准确定位转录起始位点;
11.简述癌细胞的主要生物学特征。
【答案】癌细胞是恶性肿瘤细胞的通称,主要特征有:
(1)细胞生长和分裂失去控制,表现为核质比增大,分裂速度加快;
(2)具有侵润性和扩散性,表现为细胞黏着性下降,易于侵润周围健康组织,或通过血液循环、淋巴途径转移到其他部位黏着和增殖;
(3)细胞间的相互作用发生变化,异常表达一些膜受体蛋白,便于和别处的细胞黏着生长,并借此逃脱免疫监控;
(4)蛋白表达谱或蛋白活性发生改变,癌细胞常表达一些胚胎细胞中表达的蛋白质,具有较高的端粒酶活性等;
(5)转录谱系发生变化,与正常细胞相比,其基因表达及调控方向发生改变;
(6)体外培养中具有一些特点,如接触抑制丧失,在琼脂培养基中可形成细胞克隆等。
12.DNA 复制时为什么前导链是连续复制,而后随链是以不连续的方式复制? 并请以大肠杆菌为例简述后随链复制的各个步骤。
【答案】(1)前导链是连续复制,而后随链是以不连续的方式复制的原因:
①DNA 的合成方向是5' →3' ,DNA 聚合酶只有5' →3' 聚合酶活性,而没有3' →5' 聚合酶活性。
②复制叉附近解开的DNA 链一条是5' →3' 方向,另一条是3' →5' 方向,两者分别是后随链和前导链的模板。
DNA 合成方向和复制叉移动方向相同,③在DNA 的一条模板链上,可以连续复制; 而在另一
条模板链上,DNA 合成方向和复制叉移动方向却是相反的。
(2)大肠杆菌DNA 复制包括复制的起始、DNA 片段的延长和复制的终止三个过程。具体如下:
①复制起始
a. 复制叉的形成
复制蛋白DnaA 识别大肠杆菌复制起始点(oriC )并与其结合,然后DnaC 结合上去,允许解旋酶DnaB 结合,将母链DNA 分开,形成一个复制叉; 在起始点出现复制泡,从起点向两个方向
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