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一、名词解释

1． 移码突变（frameshi Kmutation）

【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变，从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。

2． 基因扩増

【答案】基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象，结果使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要。

3． DNA 的甲基化（DNAmethylation ）

【答案】DNA 的甲基化是指一种表观遗传修饰，它是由DNA 甲基转移酶催化s-腺苷甲硫氨酸作为甲基的供体，将胞嘧啶转变为

4． RNA 编辑（RNA editing） 甲基胞嘧啶的一种过程。

【答案】RNA 编辑是指某些RNA ，特别是mRNA 前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA 所编码的遗传信息发生改变，因为经过编辑的mRNA 序列发生了不同于模板DNA 的变化。

5． 基因超家族

【答案】基因超家族是指一组由于序列的同源性通过序列比对可以彼此匹配而相关的基因。判定同源的主要标准是核苷酸残基的保守性，并参考功能的相似性。

6． TATA 框

【答案】TATA 框是指位于基因转录起始点上游-30p~-25bp（真核）或-10bp （原核）的一段保守性较高的序列，控制转录起始的准确性和频率，因共有序列为TATAAAA 而得名。

7． 核酸分子杂交（hybridization ）

【答案】核酸分子杂交是指应用核酸分子的变性和复性的性质，使来源不同的DNA （或RNA ）片段，按碱基互 补关系形成杂交双链分子的一项实验技术，杂交双链可以在DNA 与DNA 链之间，也可在RNA 与DNA 链之间 形成。

8． DNA 复性（DNA renaturation）

【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。

二、简答题

9． 为什么机体需要体液免疫和细胞免疫两种免疫方式？缺失其中一种的后果是什么？

【答案】体液免疫中的效应细胞是浆细胞，作用对象是抗原，通过效应B 细胞的产生抗体与抗原相互作用而产生免疫效应；细胞免疫中的效应细胞T 淋巴细胞，作用对象是靶细胞，通过T 淋巴细胞与靶细胞接触而产生免疫效应。

因为侵入体内的异物有很多种，病原菌的增殖方法也不全相同，有的在体液中增殖，有的在细胞中增殖，所以单一种类的淋巴细胞难以应付所有的情况，而两种不同的免疫作用机制不同，可以相互配合，协同抵抗。在细胞免疫中起主要作用的T 淋巴细胞，能够攻击、破坏受到感染的靶细胞，同时在体液免疫中起连接作用，与抗原一起激活在体液免疫起主要作用的B-淋巴细胞，使其产生抗体。缺失其中一种免疫效应，两种细胞的作用都 不能完全发挥，机体将难以抵抗病原的侵噬。

10．什么是封闭复合物、开放复合物以及二元复合物?

【答案】（1）封闭复合物是指RNA 聚合酶全酶与DNA 组成的复合物。此时DNA 仍处于双链状态，不能起始RNA 的合成。

（2）开放复合物是指RNA 聚合酶全酶所结合的DNA 序列中有一小段双链被解开，封闭复合物转变形成的复合物。此时的复合物形成转录泡，酶的构象也发生改变，β和β' 亚基牢固夹住DNA ，这种由启动子与RNA 聚合酶的复合物在这里能进行RNA 的起始合成。

（3）三元复合物是指由开放复合物与最初的两个NTP 相结合并在两个核苷酸之间形成磷酸二酷键后所形成的包括RNA 聚合酶、DNA 和新生RNA 的复合物。

11．什么是上升突变? 什么是下降突变?

【答案】（1）上升突变是指发生在启动子序列上的增强结构基因转录水平的突变。突变后的启动子比现有的启动子更强，能使转录效率和转录量增加。

（2）下降突变是抬发生在启动子序列上的降低结构基因转录水平灼突变。突变后启动子可能不会阻止各个转录单位的起始，但起始效率可能变低并且可能使其邻近基因的转录量降低。

12．简述全基因组鸟枪测序（whole genome shotgun sequencing）的基本步骤。

【答案】全基因组鸟枪测序法是在获得一定的遗传及物理图谱信息的基础上，将基因组DNA 分解成2kb 左右的数百万个DNA 小片段进行随机测序，辅以一定数量的10kb 的克隆和BAC 克隆的末端测序，利用超级计算机进行整合及序列组装。该方法是一种广泛使用的DNA 测序的方法，比传统的测序法快速，但精确度较差。其具体步骤为：

（4）建立高度随机、插入片段大小为2kb 左右的基因组文库。克隆数要达到一定数量，即经末端测序的克 隆片段的碱基总数应达到基因组5倍以上；

（5）高效、大规模的末端测序。对文库中每一个克隆，进行两端测序；

（6）序列集合。利用新的计算机软件，完善序列集合规则，最大限度地排除错误的连锁匹配；

（7）填补缺口。有两种待填补的缺口，一是没有相应模板DNA 的物理缺口，二是有模板DNA 但未测序的序列缺口。可以同时建立插入片段为15〜20kb 的文库以备缺口填补。

13．简述σ因子的作用。

【答案】σ因子作为所有RNA 聚合酶的辅助因子起作用，主要负责模板链的选择和转录的起始，它是酶的别构效应物，使酶专一性识别模板链上的启动子，可以极大地提高RNA 聚合酶对启

动子区DNA 序列的亲和力，还能极大地降低RNA 聚合酶与模板DNA 上非特异性位点的亲和力。

14．DNA 复制时为什么前导链是连续复制，而后随链是以不连续的方式复制? 并请以大肠杆菌为例简述后随链复制的各个步骤。

【答案】（1）前导链是连续复制，而后随链是以不连续的方式复制的原因:

①DNA 的合成方向是5' →3' ，DNA 聚合酶只有5' →3' 聚合酶活性，而没有3' →5' 聚合酶活性。

②复制叉附近解开的DNA 链一条是5' →3' 方向，另一条是3' →5' 方向，两者分别是后随链和前导链的模板。

DNA 合成方向和复制叉移动方向相同，③在DNA 的一条模板链上，可以连续复制; 而在另一

条模板链上，DNA 合成方向和复制叉移动方向却是相反的。

（2）大肠杆菌DNA 复制包括复制的起始、DNA 片段的延长和复制的终止三个过程。具体如下:

①复制起始

a. 复制叉的形成

复制蛋白DnaA 识别大肠杆菌复制起始点（oriC ）并与其结合，然后DnaC 结合上去，允许解旋酶DnaB 结合，将母链DNA 分开，形成一个复制叉; 在起始点出现复制泡，从起点向两个方向移动。

b. 引物的形成

在后随链上，DNA 引发酶（DnaG ）与DnaB 结合形成复合体，A TP 水解驱动复合物沿模板链移动，促使母链分开，单链结合蛋白（SSB ）与单链DNA 相结合，DnaG 催化合成短的RNA 引物。

②DNA 片段的延长

DNA 聚合酶III 从引物3'-OH 起，延伸冈崎片段，当DNA 聚合酶III 遇到已经合成的冈崎片段引物时，延长反应停止

③DNA 复制的终止:

a.DNA 聚合酶I 去除引物，并填补留下的空隙。

b.DNA 连接酶封闭缺口，完成链的合成。