2017年辽宁省培养单位沈阳应用生态研究所610分子生物学考研导师圈点必考题汇编
● 摘要
一、名词解释
1． 转录后加工（post-transcription processing）
【答案】转录后加工是指新合成的较大的前体RNA 分子，经过进一步的加工修饰，转变为具有生物学活性的、成熟的RNA 分子的过程，主要包括剪接、剪切和化学修饰。
2． 双向电泳
【答案】双向电泳是指将样品进行电泳后，在它的直角方向再进行一次电泳，为了不同的目的而采用不同的组合 方式的分离方法，目前双向电泳大多是指第一向为等电聚焦，平衡后，第二向为SDS 电泳。
3． 移码突变（frameshi Kmutation）
【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变，从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。
4． 穿梭载体（shuttle vector）
【答案】穿梭载体是指具有多个复制子能在两个以上的不同宿主细胞复制和繁殖的载体。
5． 单顺反子mRNA （monocistronic mRNA）和多顺反子mRNA （polycistronic mRNA）。
【答案】单顺反子mRNA 是指能翻译成一条肤链的信使核糖核酸（mRNA ）来自单顺反子;
，多顺反多顺反子mRNA 是指两个以上相关基因串在一起转录所得到的信使核糖核酸（mRNA ）
子mRNA 一般可同步翻译产生功能相关的多个蛋白质或酶。
6． 分子伴侣（molecular chaperone）
【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质，它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解，如热休克蛋白。
7．
【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件，它位于特定的mRNA 区域，可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物，继而发生构象重排，影响mRNA 活性。
8． 聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）
【答案】聚合酶链式反应，简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应
有选择地大量扩增 （包括分离）一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补，经过模板DNA 变性，模板DN Α-引物的配对，在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应，三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链，经多次循环后得到大量目标DNA 片。
9．
，是指一种利用非放射即荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization）【答案】
性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性，荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合
起来，通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交，在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断，为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
10．转录单位（transcription unit）
【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基因序列范围，可以是单一基因，也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列，是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段，这是转录单位的重要特征。
二、简答题
11．以雌二醇为例，简述类固醇激素发挥作用的主要机制。
【答案】雌二醇为雌性性激素，能促进子宫的生长。雌二醇首先穿过子宫细胞的细胞膜，与细胞质内的专一性受体结合，使其构象发生改变，形成激素-受体复合物，此时雌二醇对DNA 的亲和力大大增加，可以作为转录增强子，由细胞质中转移到细胞核内，与染色质中DNA 的特定部位结合，使原来转录活性不甚高的结构基因表现出 极大的转录活性，引起大量地生成专一性的mRNA , 再合成出大量的特异蛋白质，从而调节代谢或生理功能。 由于这种作用是通过基因转录形成mRNA 而实现的，因此作用过程较慢。
12．DNA 以何种方式进行复制? 如何保证DNA 复制的准确性?
【答案】（1）双链DNA 的复制大都以半保留方式进行的，即双螺旋的DNA 分子解螺旋后，分别作为模板，按照碱基互补配对原则，在DNA 聚合酶的作用下合成新的互补链，形成了两个DNA 分子的DNA 复制方式。通过θ型、滚环型或D 环型等以复制叉的形式进行。
①线性DNA 双链的进行双向复制
线性DNA 在复制中，当RNA 引物被切除后，留下5' 端的部分单链DNA 不能为DNA 聚合酶所作用，使子链短于母链，因此，线性DNA 复制子末端的复制需要有下列特殊的机制:
a. 将线性复制子转变为环状或多聚分子。
b. 在DNA 末端形成发夹式结构，使该分子没有游离的末端。
c. 在某种蛋白质（如末端蛋白）的介入下，在真正的末端上启动复制。
②环状双链DNA 的复制
可分为θ型、滚环型和D 环型几种类型。
a. θ型
复制的起始点涉及DNA 双链的解旋和松开，形成两个方向相反的复制叉。从一个起点开始，同时向两个方向进行复制，当两个复制方向相遇时，复制就停止。
b. 滚环型
DNA 的合成由对正链原点的专一切割开始，是单向复制的一种特殊方式，在噬菌体中很常见。
所形成的自由5' 端被从双链环中置换出来并为单链DNA 结合蛋白所覆盖，使其3'-OH 端在DNA 聚合酶的作用下不断延伸。在这个过程中，单链尾巴的延伸与双链DNA 的绕轴旋转同步进行。
c.D —环型
单向复制的一种特殊方式，叶绿体和线粒体DNA 、采用这样的机制。双链环在固定点解开进行复制，但两条链的合成是高度不对称的，最初仅以一条母链作为新链合成的模板，迅速合成出互补链，另一条链则成为游离的单链环（即D 环）。
（2）维持DNA 复制准确性的因素:
①内因
a. 按碱基配对原则进行DNA 链的合成。
b.DNA 聚合酶对碱基的识别作用，有利于选择正确的碱基掺入引物末端。
c.DNA 聚合酶对底物的识别作用，可以先识别引物最后一个碱基是否正确，后识别掺入的dNTP 是否正确。
d.DNA 聚合酶具有3' →5' 外切酶的作用，可以校正阅读。
e.RNA 引物最终被切除，提高了复制准确性。
f. 复制完成后对错配碱基进行修复的酶系统。
②外因
a. 浓度对核苷酸还原酶活性的调控，确保细胞内四种dNTP 在浓度上的平衡;
b.Mn 2+和Mg 2+的比例等。
13．简述真核生物核基因mRNA 前体的剪接机制。
【答案】GT-AG 内含子的剪接机制:
（1）U1snRNP 识别外显子的5' 末端剪接序列，并与其互补而结合。U2辅助因子（U2AF ）随后结合在分支点下游嘧啶区。某些剪接和调节因子将U1 snRNP 和U2AF 连在一起，组成E 复合物。
（2）U2snRNA 含有与分支点互补的序列，在其辅助因子帮助下结合其上，E 复合物转变为A 复合物。
（3）U4与U6和U5 snRNP 三聚体进入A 复合物后形成B1复合物，组成剪接体。
（4）U1 snRNP随即被释放，腾出空间，使U5 snRNP得以从外显子转到内含子，U6结合到
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