● 摘要
摘要 连翘叶在我国河北、陕西和河南等地常作为保健茶使用，化学研究证明，连翘叶与常用药材连翘果实的化学成分有较好一致性，而且连翘叶中有的生物活性成分如连翘苷 、连翘酯苷的含量远高于连翘果实。已有研究证实，连翘叶提取物有较好的抗氧化和降血脂作用，连翘酯苷有较好的抗病毒和抗氧化作用，连翘苷有较好的抗菌、降血脂和减肥作用。本研究着重对连翘叶的采收期，连翘叶和连翘果实抗氧化活性部位的筛选和其活性成分连翘苷的工业化提取工艺，连翘苷的急性毒性、抗氧化和保肝活性进行了研究。
1、以连翘苷、连翘酯苷和芦丁这三种生物活性成分为指标，综合评价不同采收时间的连翘叶的质量，结果显示，6月份采收的连翘叶中3种成分含量均比较高，然后随生长时间延长而逐渐下降，到10月份以后又略有回升，由此可见，连翘叶的最佳采收时间应在6月份左右。
2、对连翘叶中连翘苷的快速纯化工艺研究结果显示，乙醇提取法可以达到较高的得率和较高的纯度，得率可以达到2.5％以上，纯度可高达85％，与传统的醋酸铅法和氧化镁法等提取分离方法相比较，消耗较少，而且无污染，是比较适合工业化生产的提取工艺路线。该路线的基本步骤为：连翘叶用无水乙醇回馏3次，提取液过滤；滤液混合浓缩至糊状，加热水煮沸溶解，趁热过滤，弃去沉淀，滤液放于4℃冰箱保存4h～8h；过滤浓缩液，所得沉淀溶于乙醇重结晶既可。
3、连翘苷急性毒性试验的结果显示，连翘苷的LD50＝8.30g/kg，LD50的95％可信限为：7.29～9.45 g/kg。按照世界卫生组织规定的化学物质急性毒性分级标准属于实际无毒物质，所以连翘苷是一种副作用较小，开发前景较好的天然化学成分。体外抗氧化和在体动物实验均显示，连翘苷具有很好地清除羟自由基，超氧自由基等活性，抑制过氧化氢诱导的红细胞溶血，可以降低体内过氧化产物MDA的积累，抑制线粒体的氧化损伤。
4、四氯化碳诱导的肝损伤模型是最为常用的一种动物模型，连翘苷可以有效地降低四氯化碳诱导的急性肝损伤小鼠的血清AST、ALT酶活性和升高CHE酶活性，同时也可以降低肝组织中氧化产物MDA的积累，提高肝组织中抗氧化酶SOD的活性以及参与自由基清除的GSH（参与自由基清除）的含量，说明连翘苷的保肝作用可能与提高机体的抗氧化能力有关。连翘苷也可以升高CHE酶活性以及血清中BIL、TP、ALB的含量，这些指标直接反映了肝的蛋白质合成能力及其对胆红素的代谢能力，是肝脏功能的直接体现，所以连翘苷可以有效地减轻四氯化碳对肝组织的损伤作用。
5、利用DPPH法对连翘果实和连翘叶不同提取部位的筛选结果显示：连翘果实和连翘叶提取物中抗氧化的活性部位主要位于乙酸乙酯、正丁醇和乙醇提取部位，而乙醚提取部位抗氧化活性较差；连翘果实正丁醇提取部位抗氧化能力最强，乙醇提取部位次之，乙酸乙酯提取部位再次之；而连翘叶也是正丁醇提取部位抗氧化能力最强，乙酸乙酯部位次之，乙醇提取部位再次之，说明连翘叶和连翘果实中抗氧化作用的物质种类总体上有很大的一致性，只有微小的区别，而不同的提取部位均有抗氧化活性，可能是不同提取部位往往有部分成分是重合的原因所致。