● 摘要
动物界社会组织形成的机理越来越受到人们的关注。田鼠属动物，虽 然亲缘关系很近，但由于其社会组织和婚配制度的明显差异，已成为揭示婚配制 度及相关社会行为内在机制、进化和适应功能研究的模式动物。近来研究发现， 加压素(AVP)和催产素(OT)两种神经肽与田鼠的社会组织和婚配制度密切相 关。AVP和OT可以影响动物社会识别、繁殖行为、性行为、母性行为、亲本行为 及配偶选择等多种社会行为，且具有种属特异性。V1aR和OT的受体在不同婚配制 度的田鼠中枢分布不同，推测这些分布不同的脑区可能参与婚配制度相关行为的 调控。 实验用棕色田鼠(Microtus mandarinus淞)和沼泽田鼠(Microtus fastis)，根据 行为学研究分析，分别为单配制和多配制的野生田鼠，二者间存在的很多差异已 有所研究，但婚配制度不同的神经内分泌机理涉及不多。本实验试图利用免疫组 织化学的方法，通过对外源性AVP、OT对棕色田鼠中枢神经细胞活动影响的观察 以及不同婚配制度田鼠V1aR和OTR受体的分布的研究结合配偶选择过程中棕色田 鼠中枢神经元的活动以及V1aR及OTR的表达变化阐明田鼠婚配制度差异的神经生 物学机制，同时研究了雄激素与棕色田鼠下丘脑V1aR分布的关系，结果如下： 1．选择成体雄性棕色田鼠皮下微量注射AVP，2小时后进行FOS的免疫组化观察， 发现注射AVP的棕色田鼠SON、PVN、PAN、ME等脑区与对照相比表达了显著 多的FOS阳性颗粒。PAN、ME等与动物性行为密切相关，说明外周注射AVP影 响了棕色田鼠的神经活动，同时从侧面证明AVP与动物的社会行为及婚配制度 有关。 2．选择初生棕色田鼠，腹腔注射OT，1小时后进行FOS的免疫组化实验。结果发 现未注射药物的初生棕色田鼠脑区FOS表达具有性别差异。雄性幼子的SON、 PVN表达的FOS阳性颗粒较雌性多，而雌性的MD表达显著多的FOS阳性颗粒。 同时，注射OT的雄性幼子，其SON、PVN、PAN的FOS阳性神经元显著高于注 射生理盐水的幼子；注射OT的雌性幼子，其MD的FOS阳性神经元却显著少于 注射生理盐水组。说明初生棕色田鼠某些脑区的活动具有性别差异性，外源OT 促进了雄性初生棕色田鼠的SON、PVN、PAN等脑区的活动，却抑制了雌性棕 色田鼠MD的FOS表达。 3．通过观察比较成年雌性棕色田鼠，侧脑室注射生理盐水组，注射OT组和假手术 组脑区Fos免疫阳性神经元数量和分布，发现注射OT后CPU、PE、CE、ME、 VMH表达较多的FOS阳性颗粒；而MD核在注射OT后FOS阳性颗粒反而减少。 VMH、AR等脑区为性行为中枢，说明外源OT显著诱导了棕色田鼠中枢众多脑 区的神经活动，激发了SON的分泌活动，也间接证明OT与性行为及婚配制度关 系密切。 4．以单配制的棕色田鼠和多配制的沼泽田鼠为实验对象，采用V1aR特异性抗体的 细胞免疫组化法研究发现，棕色田鼠和沼泽田鼠中枢V1aR分布显著不同，从神 经内分泌角度证明棕色田鼠确实是单配制田鼠，同时说明AVP与婚配制度密切 相关，中枢V1aR分布可以反映出动物的婚配制度。 5．以单配制的棕色田鼠和多配制的沼泽田鼠为实验对象，采用OTR特异性抗体的 细胞免疫组化法发现两种田鼠中枢均有广泛的OTR分布，主要是下丘脑和边缘 系统，但LSD、MFB、VMt、ME和MD等脑区的阳性颗粒数差异显著。说明 OT可能与动物的婚配制度密切相关，棕色田鼠受体分布多的脑区可能参与单配 制特异性社会行为。 6．探讨棕色田鼠暴露于配偶鼠和陌生动情期鼠时，中枢V1aR及OTR的表达情况。 结果发现，雄性棕色田鼠遭遇配偶鼠时，LSD、BST、VMH、AR、ME、LD的 阳性神经元显著多于遭遇陌生异性的棕色田鼠，雌鼠遭遇配偶鼠时MD的阳性 神经元显著多于遭遇陌生异性的。遭遇配偶时受体表达多的脑区可能参与单配 制社会特异性行为的调控，表明AVP、OT与动物性行为的关系。 7．以c-fos为神经元活动标志，探讨棕色田鼠遭遇配偶鼠和陌生异性动情鼠时中枢 的神经元活动情况。结果发现，配偶鼠诱导棕色田鼠中枢神经元活动增强的脑 区与两种神经肽受体表达脑区一致。说明遭遇配偶鼠时fos表达强烈的脑区可能 参与对配偶的识别记忆、亲密行为及配偶关系的形成过程。 8．运用细胞免疫组化法，选用特定纯化的V1aR的抗体，探索棕色田鼠下丘脑的 V1aR的分布与雄激素的关系，结果发现，去势棕色田鼠VMH、PAN、ME、LA 等的V1aR阳性神经元显著下降，说明棕色田鼠V1aR分布确实受到雄激素调控， 雄激素减少，则下丘脑V1aR分布也显著减少，AVP作用于社会行为确实受到雄 激素的调控。 这些结果的获得说明AVP、OT对棕色田鼠神经系统具有深刻的影响，与田鼠 婚配制度密切相关，对进一步揭示婚配制度进化形成机制具有重要意义。