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一、名词解释

1． tmRNA

【答案】转移—信使RNA 。tmRNA 是指细菌体内一种修复翻译水平上受阻的遗传信息表达过程的反式翻译机制的核心分子，它兼具tRNA 和mRNA 的特点，在SmpB 蛋白的帮助下特异性识别携带mRNA 缺失体的核糖体，在核糖体蛋白S1的传递作用下结合在A 位点上，一方面延续被中断的mRNA 上的遗传信息，一方面终止蛋白质的合成，释放被束缚的核糖体和tRNA 进入新的翻译过程。

2． polysome

【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体，能同时合成若干条蛋白质多肽链。

3． 基因组学

【答案】基因组学是指研究生物基因组和如何利用基因的一门科学，研究目标是认识基因组的结构、功能及进化， 弄清基因组包含的遗传物质的全部信息及相互关系。

4． 蛋白质组和蛋白质组学（proteomeandproteomics ）

【答案】蛋白质组是指一个细胞或一个机体的基因所表达的全部蛋白质。

蛋白质组学是指着眼于研究并解析生物体整个基因组所有遗传信息的学科，旨在阐明生物体全部蛋白质的表 达模式与功能模式，从整体的角度分析，鉴定细胞内动态变化的蛋白质的组成、结构、性质、表达水平与修饰状态，了解蛋白质之间、蛋白质与大分子之问的相互作用与联系，揭示蛋白质的功能与细胞生命活动的规律等。

二、填空题

5． PCR 反应主要有_____、_____和_____三个步骤。

【答案】变性；退火；延伸

【解析】PCR 反应是模仿生物体内DNA 的复制过程，典型的PCR 反应包括以下三个过程： （1）变性：双链DNA 在高温条件下（90〜95°C ）变成两条单链，作为DNA 复制的模板； （2）退火：单链DNA 在较低温度下（37〜60°C ）与引物互补结合，形成杂交双链结构； （3）延伸：升温至70〜75°C , 结合模板上的引物在耐热DNA 聚合酶的催化下按5' —3' 方向

延伸，合成 模板DNA 的互补链。

重复以上过程经过多次循环就得到所需要的目的DNA 片段。

6． cccDNA 是指_____。

【答案】共价闭环DNA

【解析】cccDNA 是乙肝病毒前基因组RNA 复制的原始模板。

7． 含HTH 的DNA 结合蛋白多以_____结构插入DNA 双螺旋的_____以识别DNA 的特定序列。

【答案】a 螺旋；大沟

【解析】这一类蛋白质分子中有至少两个螺旋，中间由短侧链氨基酸残基形成“转折”，近羧基端的

螺旋中氨基酸残基的替换会影响该蛋白质在DNA 双螺旋大沟中的结合。与DNA 相互作用时，同源域蛋白的第 一、二两个螺旋往往靠在外侧，其第三个螺旋则与DNA 大沟相结合。

8． 大肠杆菌DNA 聚合酶_____的生理功能主要起修复DNA 的作用。

【答案】II

DNA 聚合酶I 既能合成DNA 链，【解析】又能降解DNA 链，保证了DNA 复制的准确性; DNA

聚合酶II 具有3' →5' 外切酶活性，但酶活性低，目前认为其生理功能主要是修复DNA ; DNA 聚合酶III 有5' →3'DNA 聚合酶活性也有3' →5' 外切酶活性，活性较强，是大肠杆菌DNA 复制中链延长反应的主导聚合酶。

三、简答题

9． 假设某哺乳动物基因可能编码了脂肪酸脱氢酶，请在酵母细胞中设计试验研究该基因的功能。

【答案】（1） PCR 扩増哺乳动物该基因，接着对其进行克隆；

（2）将克隆完成的目的基因片段插入到酵母表达载体的相应启动子下；

（3）把构建好的携带目的基因的表达载体转化到酵母脂肪脱氢酶突变体中，观察结果。 脂肪酸脱氢酶突变体中，代谢活动异常，脂肪酸脱氢酶涉及的代谢反应终止，当含该基因的表达载体转化突变体后，相应代谢途径的生化反应恢复正常即说明该基因编码了脂肪酸脱氢酶，并执行了相应的功能。

10．说出凝胶滞缓实验的原理与应用。

【答案】（1）基本原理

蛋白质可以与DNA 结合后将大大增加其相对分子质量，而凝胶电泳中DNA 朝正电极移动的距离与其相对 分子质量的对数成正比，因此，没有结合蛋白的DNA 片段跑得快，而与蛋白质形成复合物的DNA 由于受到阻 滞而跑得慢。

（2）应用

①用于研究与蛋白质相结合的DNA 序列的特异性；

②用于确定带有放射性标记的DNA 分子中与蛋白直接发生相互作用的关键性碱基。

11．简述新一代测序各平台的优点和缺点及适用领域。

【答案】见表。

表 新一代测序平台的优缺点及应用

12．以雌二醇为例，简述类固醇激素发挥作用的主要机制。

【答案】雌二醇为雌性性激素，能促进子宫的生长。雌二醇首先穿过子宫细胞的细胞膜，与细胞质内的专一性受体结合，使其构象发生改变，形成激素-受体复合物，此时雌二醇对DNA 的亲和力大大增加，可以作为转录增强子，由细胞质中转移到细胞核内，与染色质中DNA 的特定部位结合，使原来转录活性不甚高的结构基因表现出 极大的转录活性，引起大量地生成专一性的mRNA , 再合成出大量的特异蛋白质，从而调节代谢或生理功能。 由于这种作用是通过基因转录形成mRNA 而实现的，因此作用过程较慢。

13．简述癌细胞的主要生物学特征。

【答案】癌细胞是恶性肿瘤细胞的通称，主要特征有：

（1）细胞生长和分裂失去控制，表现为核质比增大，分裂速度加快；

（2）具有侵润性和扩散性，表现为细胞黏着性下降，易于侵润周围健康组织，或通过血液循环、淋巴途径转移到其他部位黏着和增殖；

（3）细胞间的相互作用发生变化，异常表达一些膜受体蛋白，便于和别处的细胞黏着生长，并借此逃脱免疫监控；

（4）蛋白表达谱或蛋白活性发生改变，癌细胞常表达一些胚胎细胞中表达的蛋白质，具有较高的端粒酶活性等；

（5）转录谱系发生变化，与正常细胞相比，其基因表达及调控方向发生改变；

（6）体外培养中具有一些特点，如接触抑制丧失，在琼脂培养基中可形成细胞克隆等。