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一、名词解释

1． 锌指结构（zine finger motif）

【答案】锌指结构是指许多转录因子共有的DNA 结合结构域，具有很强的保守性，具有此结构的蛋白借肽链的弯曲使两个Cys 和两个His 与一个锌离子，或四个Cys 与一个锌离子形成形似手指状的三级结构。

2． 聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）

【答案】聚合酶链式反应，简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应有选择地大量扩增 （包括分离）一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补，经过模板DNA 变性，模板DN Α-引物的配对，在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应，三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链，经多次循环后得到大量目标DNA 片。

3． tmRNA

【答案】转移—信使RNA 。tmRNA 是指细菌体内一种修复翻译水平上受阻的遗传信息表达过程的反式翻译机制的核心分子，它兼具tRNA 和mRNA 的特点，在SmpB 蛋白的帮助下特异性识别携带mRNA 缺失体的核糖体，在核糖体蛋白S1的传递作用下结合在A 位点上，一方面延续被中断的mRNA 上的遗传信息，一方面终止蛋白质的合成，释放被束缚的核糖体和tRNA 进入新的翻译过程。

4． 感受态细胞（competent cell）

【答案】感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法（如CaCL 等化学试剂）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。

二、填空题

5． 在反密码子与密码子的相互作用中，反密码子IGA 可识别的密码子有_____，_____和_____。

【答案】UCC ; UCU; UCA

【解析】根据摆动假说，当反密码子的第一位是I 时，可识别3种密码子：

6． cccDNA 是指_____。

【答案】共价闭环DNA

【解析】cccDNA 是乙肝病毒前基因组RNA 复制的原始模板。

7． 转座作用可能引起的突变类型包括a_____、b_____、c_____。

【答案】重复:缺失:倒位。

【解析】转座子插入后往往会造成插入位置上出现受体DNA 的少数核奋酸对的重复; 当复制性转座发生在宿主DNA 原有位点附近时，往往导致转座子两个拷贝之间的同源重组，引起DNA 缺失或倒位。

8． 大肠杆菌表达质粒除质粒复制起点外，通常还包括下列组成部分：a._____ 、b._____ 、c._____ 、d. _____和e._____ 。

【答案】具有抗菌素抗性基因；多克隆位点；启动子；前导序列；加尾信号

【解析】一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足如下几个方面的条件：（1）具有复制起点；（2）具有抗菌 素抗性基因；（3）具若干限制酶单一识别位点；（4）具有较小的相对分子质量；（5）较高的拷贝数；（6）还应具 备与宿主细胞相适应的启动子、前导顺序、増强子、加尾信号等DNA 调控元件。

三、简答题

9． 什么是DNA 的T m 值? 它受哪些因素的影响?

【答案】（1）DNA 的T m 值即DNA 的解链温度，是指DNA 在加热变性过程中，紫外光吸收值达到最大值的50%的温度，或者说是核酸分子内50%的双螺旋结构被破坏时的温度。

（2）影响Tm 值的因素:

①DNA 的均一性

均质DNA 的熔解过程发生在一个较小的温度范围内，异质DNA 熔解过程发生在一个较宽的温度范围内，均一性高，则融解过程爆发的温度范围窄;

②DNA 分子中G-C 碱基对的含量

在pH7.0，0.165mo1/L的NaCl 中，DNA 的Tm 值与G-C 含量之间有正比关系，DNA 分子中GC 含量高，则Tm 值大，两者的关系可表示为:Tm=69.3+0.41（%G+C）。测定Tm 值可推算DNA 中碱基的百分组成。

③DNA 溶液的离子强度

一般情况，离子强度较低的介质中，DNA 的解链温度较低，而且解链温度范围较宽。而在高离子强度时，DNA 的Tm 值较高，且解链发生在一个较小的温度范围内。

④DNA 溶液的pH 值

溶液的PH 值在5~9范围内，Tm 值变化不明显，当PH>11或PH<4时，Tm 值变化明显。 ⑤DNA 双链本身的长度

一定条件下（相对较短的核酸分子），Tm 值大小还与核酸分子的长度有关。

⑥变性剂

Tm 值变化明显。各种变性剂主要是干扰碱基堆积力和氢键的形成而降低Tm 值。核酸分子越

长，Tm 值越大。

10．以雌二醇为例，简述类固醇激素发挥作用的主要机制。

【答案】雌二醇为雌性性激素，能促进子宫的生长。雌二醇首先穿过子宫细胞的细胞膜，与细胞质内的专一性受体结合，使其构象发生改变，形成激素-受体复合物，此时雌二醇对DNA 的亲和力大大增加，可以作为转录增强子，由细胞质中转移到细胞核内，与染色质中DNA 的特定部位结合，使原来转录活性不甚高的结构基因表现出 极大的转录活性，引起大量地生成专一性的mRNA , 再合成出大量的特异蛋白质，从而调节代谢或生理功能。 由于这种作用是通过基因转录形成mRNA 而实现的，因此作用过程较慢。

11．简述DNA 的一、二、三级结构特征。

【答案】（1）DNA 的一级结构

DNA 的一级结构是指四种核苷酸按照任意顺序连接而成的线性结构，表示该DNA 分子的化学构成。其特点是:

①DNA 分子的基本单位是脱氧核苷酸。

②DNA 分子中的脱氧核糖和磷酸是不变的，而含氮碱基是可变的，主要有4种，即A 、G 、C 和T 。

③DNA 分子具有多样性，由于其中碱基可以任何顺序排列。

（2）DNA 的二级结构

DNA 的二级结构是指两条脱氧多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构，其基本特点是: ①DNA 由两条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成，且为反向平行。

②DNA 中的脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本骨架。

③两条链上的含氮碱基排列在内侧，并遵循碱基互补配对原则（即A 与T ，G 与C 配对）通过氢键结合形成碱基对。

（3）DNA 的三级结构

DNA 的三级结构是指DNA 双螺旋进一步扭曲盘旋所形成的特定空间结构，其特点为:

①超螺旋结构是其主要形式，环状分子的额外螺旋可以形成超螺旋;

②超螺旋可分为正超螺旋和负超螺旋两类，它们在不同类型的拓扑异构酶作用下或特殊情况下可相互转变。

12．什么是转录因子？如果你找到了一个转录因子，设计一个实验来证明该转录因子与某一顺式作用元件间的互作关系。

【答案】（1）转录因子（transcription factor）是指转录起始过程中，RNA 聚合酶所需要的辅助因子，是参与正调控的反式作用因子，通常识别位于基因上游启动子附近的顺式作用元件。

（2）可以使用Dnase I足迹实验来证明转录因子与顺式作用元件的互作关系。DNase 工足迹