2018年山东大学济宁医学院306西医综合之生物化学考研基础五套测试题
● 摘要
一、名词解释
1．
【答案】泛素蛋白的多聚体，是标记待分解蛋白质的泛紊形式。与蛋白质连接的多聚泛素的长短是介导靶蛋白选择性降解或细胞定位的重要信号。
2． P/0。
【答案】磷氧比是指经电子与氧结合生成水的过程消耗一个原子的氧所要消耗的无机磷酸的分子数（或者是生成A TP 的分子数）。电子经过呼吸链的传递作用最终与氧结合生成水，在此过程中所释放的能量用于ADP 磷酸化生成A TP 。经此过程消耗一个原子的氧所要消耗的无机磷酸的分子数（也是生成A TP 的分子数）称为磷氧比值（P/0）。如NADH 的磷氧比值是2.5，磷氧比值是1.5。
3． 碱基互补规律。
【答案】碱基互补规律是碱基在配对过程中遵循的规律，在形成双螺旋结构的过程中，由于各种碱基的大小与结构的不同，
使得碱基之间的互补配对只能在
间进行。
4． 氨基酸的活化。
【答案】
在
参与下由氨酰合成酶催化氨基酸与相应tRNA
形成氨酰的过程，是氨基酸的活化形式。
5． 最适温度。
【答案】酶反应的最适温度是指酶促反应过程中，
当
度，酶促反应速度减小。
6． 摆动假说（wobble hypothesis）。
【答案】mRNA 上的密码子与tRNA 上的反密码子相互辨认，大多数情况是遵从碱基配对规律的。遗传密码的摆 动性是指出现不严格的配对的现象，tRNA 分子上有相当多的稀有碱基，例如次黄嘌呤（inosine , I）常出现于三
联体反密码子的
A 、C 、U 都可以配对。
端第一位，它和mRNA 密码子第3位的时的环境温度，高于和低于此温和之的
7． 诱导酶。
【答案】诱导酶是指当生物体或细胞中加入特定诱导物后诱导产生的酶，它的含量在诱导物存在下显著提高，诱导物通过对基因表达的调控促进酶蛋白的合成。
8． 配体（ligand ）。
【答案】配体是能够与特定受体结合的各种物质的总称，如所有的激素，它们可能是小分子，也可能是大分子。
二、问答题
9．
在脂肪酸
是脱氢反应。
（2
）脂肪酸
（3
）脂肪酸
脂肪酸氧化第二步类似于延胡索酸转变为苹果酸，都是加水反应。 氧化第三步类似于苹果酸转变为草酰乙酸，都是脱氢反应。 氧化循环和糖的三竣酸循环中有哪些类似的反应顺序？ 氧化循环的第一步类似于三羧酸循环中琥珀酸转变为延胡索酸，都【答案】（1
）脂肪酸氧化和糖的三羧酸循环都是在线粒体内进行的氧化反应，有上述相似的过程，但是由于他们的底物和参与反应的酶系不同，两者之间也有许多差别。
10．有一种酶E 作用底物S 产生产物P 。化合物C 是这一种酶的别构激活剂。使用定点突变技术将酶E 的Val57突变成其他集中氨基酸残基。将野生型和突变体纯化以后，分别在有C 和无C 的条件下测定酶活性，活性分析的结果见表:
表
（1）根据突变体的数据，你认为Val57位于别构中心还是活性中心？
（2）根据氨基酸的性质，解释突变如何影响到酶E 的活性？
【答案】（1）突变对酶的基础活性（无C 时）没有影响，说明Val57不是酶活性中心的一部分或者与别构中心有关。相反，在有C 时，Val57的突变对酶活性影响很大，这说明Val57的取代影响激活剂C 与别构中心的结合，进而影响到活性中心的构象和活性。
（2）Val 和Ala 都是疏水氨基酸，不带电荷，
因此
的功能影响不大。但Ser 和Glu 都是极性氨基酸，所以的效果更大。
属于保守性突变，对别构中心或突变都能影响到C 的结合，降低C 的激活效果，但与Ser 不同的是，Glu 既是极性氨基酸，又带电荷，故影响
11．试述生物膜的两侧不对称性。
【答案】生物膜的两侧不对称性表现在以下几个方面。（1）磷脂组分在膜的两侧分布是不对称的。（2）膜上的糖基（糖蛋白或糖脂）在膜上的分布不对称，在哺乳动物中脂膜都位于膜的外表面。（3）膜蛋白在膜上有明确的拓扑学排列。（4）酶分布的具有不对称性。（5）受体分布具有不对称性。膜两侧不对称性保证了膜的方向性功能。
12．假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么？为什么
会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？
【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。
（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将
的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，
可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
13．DNA 变性与降解的区别是什么？
【答案】变性只涉及次级键的变化，是双链间螺旋被破坏，碱基间的氢键断裂；降解是指磷酸二酯键的断裂。
14．半保留复制是如何用实验证明的？
【答案】
利用氮的同位素
标记大肠杆菌
先让大肠杆菌在以为唯一碳源的培养大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这
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