● 摘要
虎奶菇是热带地区一种珍稀的食用兼药用真菌,在我国,仅仅分布在我国云南省的章凤及腾冲两地,富含多种生物活性成分。其中,多糖作为虎奶菇的主要功能活性成分,具有抗辐射、抗疲劳、抗癌、抗病毒、降血糖等生物活性功效。但目前对其结构及活性作用机制尚且不清楚。本文以虎奶菇菌核为材料提取虎奶菇菌核多糖SHNP,并对其理化性质、化学修饰、化学结构、溶液构象以及形貌特征等问题进行了系统的研究,得出以下结果:
1. 虎奶菇菌核多糖的结构分析
(1)采用100℃热水浸提法获得虎奶菇菌核粗多糖HNP,通过DEAE-52纤维素柱层析以及葡聚糖凝胶(Sephadex G-150)柱层析分离纯化得到虎奶菇菌核多糖SHNP,经紫外光谱和高效液相色谱分析: SHNP为均一多糖,且分子量为1.463×106 Da。
(2)气相色谱分析:SHNP是由葡萄糖组成的葡聚糖。
(3)红外光谱分析:SHNP是呋喃环,且为β-D构型。
(4)高碘酸氧化和Smith降解、甲基化、气相-质谱联用及核磁共振波谱分析:SHNP具有多分支结构,SHNP分子存在1→,l→6和l→2,6这三种糖苷键型,且三种键型摩尔比近似1:1:1,主链由(l→6)-Glc组成,分支位点为l→2,6-Glc糖苷键,且分支位点位于葡萄糖的6碳位上。
2. 虎奶菇菌核多糖化学修饰及其生物活性分析
虎奶菇菌核多糖经羧甲基化、硫酸化、磷酸化、乙酰化的化学修饰后,修饰多糖的体外抗氧化活性及体外抗糖尿病活性均发生了明显变化。其中,经羧甲基化和硫酸化修饰后多糖的各项活性均有显著提高,表明了羧甲基化和硫酸化修饰的虎奶菇菌核多糖有开发为功能性食品和保健药品的潜质。
3. 虎奶菇菌核多糖SHNP溶液的构象行为分析
(1)比浓粘度测定结果:虎奶菇多糖SHNP溶液的比浓粘度受多糖浓度、温度、pH,变性剂及金属离子的影响,但影响程度各个不相同。
(2)圆二色谱和刚果红实验表明:SHNP不具有三股螺旋结构,为无规线团链构象,且外界条件对其构象有一定影响。
(3)激光粒度分布测定:碱性条件对 SHNP溶液的粒度影响较大,该溶液在酸性及中性条件下粒度分布较接近。
(4)环境扫描电镜及原子力显微镜综合分析表明:虎奶菇菌核多糖SHNP形貌规则,呈现多股刚性链状,且为紧密排列的高分支链状形态。
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