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一、名词解释

1． 反意义链。

【答案】反意义链又称模板链，是指可作为模板转录为RNA 的那条链，该链与转录的RNA 碱基互补（A-U ，G-C ）。

2． 糖苷。

【答案】糖苷是指单糖半缩醛羟基与另一个分子（例如醇、糖、嘌呤或嘧啶）的羟基、胺基或巯基缩合形成的含糖衍生物。

3． 二硫键。

【答案】二硫键通过两个（半胱氨酸）巯基的氧化形成的共价键。二硫键在稳定某些蛋白质的三维结构上起着重要的作用。

4． 活化能（）。

【答案】（由动力学推导出来的）活化能是指化学反应中，由反应物分子到达活化分子所需的最小能量。

5． 内部控制区（internal control regions ICG）。

【答案】内部控制区是指tRNA 和5S rRNA基因的启动子位于转录起始点的下游区域（转录区）。

6． 多聚核糖体（polysome ）。

【答案】多聚核糖体是指合成蛋白质时，多个甚至几十个核糖体串联附着在一条mRNA 分子上，形成的似念珠状结构。在一个mRNA 分子上同时结合多个核糖体形成的结构，形成多聚核糖体可以提高翻译的效率。

7． 水解修饰（hydrolytic modification）。

【答案】水解修饰是翻译后修饰的一种方式，通过水解，一条肽链可水解为多种组分，例如P0WC （鸦片促黑 皮质素原）可被水解为多种生物活性肽。

8． 稀有密码子（rare codon）。

【答案】稀有密码子是指不同生物体对编码同一种氨基酸的不同密码子（同义密码子）的使

用频率比较低的密码 子。

二、问答题

9． 下图是一个带有单链末端的双链DNA 分子，分别写出用大肠杆菌DNA 聚合酶

理后得到 的延伸产物并简单解释原因。

【答案】大肠杆菌DNA 聚合酶III 处理后的产物为：

端粒酶处理后的产物为：

DNA 聚合酶III 跟大多数其他DNA 聚合酶一样，需要模板和引物，所以从下面一条链的端开始延伸

DNA 链；端粒酶本身由蛋白质和RNA 两种组分组成，其中RNA 部分的一段可以作为模板，因此端粒酶可以在DNA 的凸出末端添加DNA 序列。

10．虽然组蛋白mRNA 前体的转录后加工方式既没有拼接、也没有加尾，但是却保留了加帽过程，为什么？

【答案】组蛋白的合成与DNA 的复制都集中在细胞周期的S 期，需要在较短的时间内合成大量的组蛋白。组蛋白mRNA 前体的后加工既没有拼接，也没有加尾，可以缩短转录后加工时间，便于在短时间内得到大量的成熟 mRNA 。但是加帽反应是一种共转录反应，它并不需要专门的时间来完成，因此组蛋白mRNA 前体的后加工保留了加帽反应。

11．在肽链延长的第一步，哪些因素能保证正确的氨酰进入核糖体的A 位？

【答案】有两种因素与选择正确的氨酰-tRNA 有关：（1） tRNA 反密码子和mRNA 的相应的密码子之间的碱基配对；（2） tRNA 分子同核糖体A 部位的专一结合。如果这两种因素缺乏，延长反应则不会发生。

12．在突变的大肠杆菌中下列基因的缺失将产生什么结果？

乳糖操纵子调节基因缺失；

色氨酸操纵子调节基因缺失。

【答案】（1）lac 调节基因缺失的突变体不能编码有活性的阻遏蛋白，使乳糖操纵子变为组成型的。

（2）trp 调节基因的缺失使该突变体不能产生阻遏蛋白，色氨酸操纵子的表达呈组成型。 或端粒酶处

13．假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？

如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？

你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的

种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条

小的条带。这一次染色方法是什么？为什么

会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？

【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。

（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。

（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。

为了将的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。

14．虽然在柠檬酸循环中并没有

能进行？

【答案】柠檬酸循环中总共有四次底物脱氢反应，可生成3分子NADH 和1分子

这些载氢体都必须经由呼吸链传递以最终将

体的缺乏，进而使循环速率降低 甚至完全停止。

15．原核生物和真核生物识别起始密码子的机制有什么不同？

【答案】原核生物和真核生物识别起始密码子的机制的不同点如下：

（1）原核生物依靠端的SD 序列与核糖体小亚基中端的反SD 序列之间

瑞的帽子结构，然后沿的相互作用，识别SD 序列下游的AUG 作为起始密码子。 （2）真核生物依靠帽子结合蛋白复合物和核糖体小亚基识别

大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这的直接参与，为什么该循环的正常运行却必须在有氧条件下才而与O 结合成水，否则将导致载氢体的堆积和电子受着mRNA 向下 游移动，一般以扫描过程中遇到的第一个AUG 为起始密码子。如果该AUG 所处