2018年南华大学长沙市中心医院306临床医学综合能力(西医)[专业硕士]之生物化学考研强化五套模拟题
● 摘要
一、名词解释
1． Edman 降解法（gdmandegradation ）。
【答案】Edman 降解法，又称苯异硫氰酸酯法，是指从肽链的游离的
的序列的过程。末端测定氨基酸残基末端氨基酸被苯异硫氰酸酯（PITC ）修饰，然后从肽链上分离修饰的氨基酸，再用乙酸乙酯抽提后，可用层析等方法鉴定。余下一条缺少一个氨基酸残基的完整的肽链再进行下一轮降解鉴定循环。
2．
【答案】是指在标准条件下（一般定为0.18mol/L阳离子浓度，400核苷酸长的片段）测得的复性率达0.5时的Cot 值
3． 限制酶图谱
【答案】限制酶图谱是指同一DNA 用不同的限制酶进行切割，从而获得各种限制酶的切割位点，由此建立的位点图谱，有助于对DNA 的结构进行分析。
4． 内含肽（inteinh
【答案】内含肽是指在蛋白质拼接过程中被切除的肽段。
5． 组成型基因表达（constitutive gene expression）。
【答案】组成型基因表达是指管家基因表达。管家基因较少受环境因素影响，而是在个体各个生长阶段的大多数、 或几乎全部组织中持续表达，或变化很小。
6． Southernblotting 。
【答案】Southernblotting 即DNA 印迹，是指双链DNA 在凝胶电泳后变性为单链，转移并固定到特定滤膜（如硝酸纤维素膜）上，同标记的核酸探针杂交，根据杂交信号显示靶DNA 的存在与位置。DNA 印迹可用于检测基因突变。
7． 分子伴侣（molecular chaperon）。
【答案】分子伴侣是指帮助细胞内大多数蛋白质正确折叠的特殊蛋白质。
8． 可逆抑制剂。
【答案】可逆性抑制是指对主反应的抑制是可逆的，以酶促反应为例，可逆性抑制剂和酶形
成复合物，抑制酶与底物的作用，从而抑制反应。但这种复合物在相同条件下又可以分解为酶和抑制剂，分解后的酶仍然可以催化反应，也就是说，可逆抑制剂只降低反应的速度，并不影响反应的发生。
二、问答题
9． 简述酶的催化机制。
【答案】（1）酶利用其与底物之间通过非共价键（氢键、巯基相互作用、离子键）结合所释放出的能量（结合能）降低了酶促反应的活化能。结合使酶具备了巨大的催化能力和高度的专一性。
（2）酶与底物的非共价结合在过渡态中达到了最优化。从本质上说，酶的活性中心并非最适于与底物结合，而是最适于与过渡态类似物相结合。
（3）在催化反应瞬间，酶的催化基团与过渡态类似物之间形成瞬时的共价键，或是底物将某个基团瞬时转
10．是不是所有的酶都遵守米氏方程，哪类酶不遵守? 他们的反应速度与底物浓度的曲线有什么区别？
【答案】并不是所有的酶都遵守米氏方程，别构酶就是一种。在反应速度与底物浓度的关系图中，别构酶动力学曲线呈S 形，符合米氏方程的酶的动力学曲线呈双曲线形。别构酶通常由多个亚基构成，底物或效应因子与一个亚基结合会对另一个亚基的结合行为造成影响。
11．脱氧核苷酸是如何合成的？
【答案】生物体内脱氧核苷酸的合成一般通过还原反应，这种还原反应多发生在核苷二磷酸的水平上；在核糖核 苷酸还原酶的作用下，核糖核苷二憐酸（NDP ）可转变为相应的脱氧核糖核苷二憐酸（dNDP ）, 后者还可进一步转变为dNTP 。
12．机体通过哪些方式调节糖的氧化途径和糖异生途径？
【答案】糖的氧化和糖异生是两条反向代谢途径，两别构效应物调节，如ATP 和柠檬酸等抑制己糖激酶并激活丙酮酸羧化酶，AMP 抑制果糖-1，6-二磷酸系并激活丙酮酸羧化酶等；以胰岛素和胰高血糖素作用为主的激素调节，前者能增强氧化途径中的关键酶系等，并同时抑制糖异生途径中的关键酶如磷酸烯醇途径关键酶活性并抑制糖氧化途径中的关键酶。
13．从一种植物叶中得到了粗细胞提取液，每毫升含蛋白质32mg ，在提取条件下，
的催化反应速率为取50ml 提取液，用硫酸铵盐析分析，将饱和度
测定其反应速度为再溶于10ml 水中，此溶液的蛋白质浓度为50mg/ml, 从中取出
计算：
（1）提取过程中，酶的回收百分率；
. 提取液的沉淀物，
（2）酶的提纯倍数。
【答案】酶的提纯常包括两方面的工作，一是把酶制剂从很大体积缩到较小体积；二是把制剂中大量的杂质蛋白和其他大分子分离出去。本题采用的是盐析法。为了判断分离提纯的优劣，一般用两个指标来衡量：一是总活力的回收，二是比活力提高的倍数。
粗提取液：蛋白质浓度=32mg/ml，50ml 提取液含总蛋白质=50X32=1600mg。蛋白质的活力单位数
=，现取
_
则所含蛋白质
则比活力：二活力单位数/
蛋白质14/32U/mg总活力
提纯液：蛋白质浓度=50mg/ml, 10ml 提纯液内含总蛋白质=50X10=500mg。蛋白质的活力单位数=0.65pmol/min, 现取10叫，
则所含蛋白质则比活力2=活力单位数/蛋白质=65/50U/mg
所以酶的回收百分率=总活力2/总活力产[（65/50）×500]/[（14/32）×1600]=93%。酶的 提纯倍数=比活力2/比活力产（65/50）/（14/32）=3（倍）。
14．DNA 复制过程中不连续合成的DNA 链的新生片段是怎样起始的？
【答案】RNA 聚合酶能以DNA 为模板起始合成一条新的RNA 链, DNA 聚合酶能够从一个RNA 引物延伸DNA 。 在不连续DNA 链的合成过程中，在复制叉解旋前进的同时，首先由引发酶（一种特殊类型的RNA 聚合酶）合成RNA 引物，这些引物参与了不连续合成的DNA 新生片段合成的起始。
15．G 蛋白作为许多激素受体和效应器之间的中间接受体在细胞信息传导中发挥着极其重要的作用，试设计一个实验确定植物细胞中也含有这种蛋白质或类似的蛋白质。
【答案】（1）使用重组DNA 技术，制备编码G 蛋白a 亚基或者编码与GTP 结合的结构域的核苷酸序列，以此作为探针与目标植物的DNA 杂交，确定有无同源的序列。
（2）制备哺乳动物G 蛋白的单克隆抗体，与目标植物细胞的抽取物保温，检测有无其交叉反应的植物蛋白。如果有，将其分离纯化，在体外进一步研究它的性质，如能不能结合GTP 。
（3）将目标植物细胞的抽取物与百日咳毒素或霍乱毒素一起保温，寻找有无被ADP-核糖基修饰的蛋白质。
16．在突变的大肠杆菌中下列基因的缺失将产生什么结果？
乳糖操纵子调节基因缺失；
色氨酸操纵子调节基因缺失。
【答案】（1）lac 调节基因缺失的突变体不能编码有活性的阻遏蛋白，使乳糖操纵子变为组成型的。
（2）trp 调节基因的缺失使该突变体不能产生阻遏蛋白，色氨酸操纵子的表达呈组成型。
三、论述题