● 摘要
猕猴桃溃疡病是一种严重威胁猕猴桃生产的毁灭性病害。该病在中国陕西、四川、湖北、安徽等猕猴桃产地及世界猕猴桃产区如新西兰、意大利、智利、韩国等爆发流行,对猕猴桃产业的发展构成了严重威胁。该病害不仅能够使猕猴桃大量减产,而且会降低果肉品质,极大影响猕猴桃的商品价值和食用价值。该病一旦发病则很难治愈。因此,加强检疫,控制病原的传播是防止该病发生的关键措施。现已查明,该病的病原菌是丁香假单胞菌猕猴桃致病性变种(Pseudomonas syringae pv. Actinidiae, Psa)。引起Psa在世界范围内的远距离传播主要是由于感病苗木、接穗、花粉的运输导致。但猕猴桃果实表面是否携带Psa、在猕猴桃销售运输中是否会造成Psa的传播则未见报道。本文建立了一种特异性强、灵敏度高的Psa检测方法,并研究了新型防腐保鲜剂二氧化氯(ClO2)溶液对Psa的杀灭效果,同时研究了经ClO2溶液处理对猕猴桃果实在货架期内贮藏品质的影响,为该病害的防治及猕猴桃果实贮藏保鲜提供了理论依据。
研究结果如下:
一、猕猴桃果实表面Psa检测
从陕西省周至县采集试验果实,收集猕猴桃果实表面病原菌,经培养后提取病原菌DNA,根据陕西猕猴桃产区Psa的hrpW基因保守区序列设计两对引物,采用巢式PCR检测技术,并对扩增产物测序。经过序列对比,检索同源性。测序结果显示其与Psa的hrpW基因序列同源性为99%,与Pseudomonas syringae pv.theae、Pseudomonas avellanae同源性在90%以下。表明所检测病原菌为Psa,检测结果是可靠的。本研究从41份样品中检测出8份样品存在Psa,表明猕猴桃果实表面存在Psa,因此在猕猴桃的销售运输中可造成Psa的传播。故杀灭猕猴桃果实表面Psa,对猕猴桃溃疡病的防治具有重要作用。
二、ClO2溶液对Psa杀灭效果的研究
研究ClO2溶液处理时间、浓度及处理pH三个因素对Psa杀灭效果的影响,并通过响应曲面分析确定ClO2溶液杀灭Psa的最佳条件。结果表明:ClO2溶液对于Psa的杀菌效果与ClO2溶液浓度、处理时间、pH有关。随着ClO2溶液浓度的升高、处理时间的增加、pH的下降,其对Psa的杀菌率逐渐升高;通过响应曲面试验研究ClO2溶液对Psa杀灭的最适条件,得出采用ClO2溶液浓度114.69mg/L,处理时间7.87min,pH3.79为杀灭Psa的最适条件,此时的杀菌率达到100%。
三、ClO2溶液处理对猕猴桃果实货架期内贮藏品质的影响
研究了ClO2溶液处理对猕猴桃果实在货架期内贮藏品质产生的影响。结果表明:采用100mg/L、pH=4的ClO2溶液处理猕猴桃果实10min,在猕猴桃果实货架期内能够有效延缓猕猴桃果实硬度下降、延缓果实可溶性固形物含量上升、保持果实可滴定酸含量,降低果实腐烂率,延长果实货架期。
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