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一、名词解释

1． 感受态细胞（competent cell）

【答案】感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法（如CaCL 等化学试剂）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。

2． DNA 解链温度（melting temperature, T m ）

【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。

3．

【答案】泛素（遍在蛋白）。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中，主要功能是标记需要分解掉的蛋白质，使其被水解的小蛋白。

4． 操纵子

【答案】操纵子是指原核生物基因中，多个功能上相关的结构基因串联排列在基因组序列中，构成信息区，连同上游启动区和操纵基因区及下游转录终止区一起构成的基因表达单位。

二、问答与实验设计题

5． 癌症已经成为威胁人类健康的主要杀手，根据你所了解的知识，简述癌症为何具有如此大的危害？对于癌症的防治为何如此困难？

【答案】（1）癌症危害巨大原因

癌细胞是一种变异的细胞，是产生癌症的根源，其具有以下特性使它危害巨大：

①无限增殖：适宜条件下，癌细胞能无限快速增殖，不断夺取人体中的营养，并产生一些毒素。

②丧失接触抑制：癌细胞几乎丧失了彼此间的粘着作用，彼此间基本无抑制作用。

③癌细胞间粘着性减弱：癌细胞相比于同源正常组织，细胞间的粘着性降低，所以癌细胞易于浸润蔓延、侵袭周围的细胞和姐织、甚至能扩散转移。

④癌细胞还具有细胞骨架结构紊乱、能产生新的膜抗原、对生长因子需要量降低等特征。 （2）癌症防治困难的原因：癌细胞的增殖非常快又不受约束和控制，而且一旦遇到不利的条件（刺激、中伤），癌细胞能快速转移或隐匿，由分裂增殖期迅速进入

期，呈一种休眠状态，

任何药物对它都没有效用，加之其易突变，暂时无法找到根除办法，只能预防和减缓。

6． 核糖体有哪些活性中心？

【答案】核糖体至少有5个活性中心：

（1）mRNA 结合位点

位于核糖体小亚基上，在肽基转移位点附近，其功能是结合mRNA 和IF 因子。

（2）A Α-tRNA 结合位点（A 位点）：

即氨酰基位点，即受位，主要位于大亚基，是接受氨酰-tRNA 的部位。

（3）肽基转移部位（P 位点）

即供位，或肽酰基位点，主要位于大亚基，是与延伸中的肽酰tRNA 结合位点。

（4）去氨酰-tRNA 释放位点（E 位点）

位于大亚基，是延伸过程中去氨酰-tRNA 的释放位点。

（5）转肽酶活性中心

位于P 位和A 位的连接处，是形成肽键的部位。

7． 真核细胞的转录和加上是高度偶联灼，简述有哪些加工过程与转录偶联? 是如何偶联的?

【答案】（1）与转录相偶联的加工过程有:5’-端加帽，5'~3'间的剪接，3' 末端的加工。

（2）RNA 聚合酶II 最大亚基的梭基末端具有一段特殊的序列，被称为CTD 结构。该结构是以7个氨基酸（-Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser-）为重复单位的高度保守重复序列。CTD 结构的磷酸化与去磷酸化之间的转换参与到转录与加工的偶联过程中，通过与加工因子的有机结合而对mRNA 的加工过程产生作用。正是由于CTD 的存在，RNA 聚合酶在整个转录延伸的过程中不仅聚集了与转录合成、延伸相关的作用因子，还聚集了与mRNA 加工相关的加工囚子。这些囚子通过蛋白间相互作用而组成了一个庞大的复合体，mRNA 从合成到加工到成熟的整个过程都在这个复合体内完成。

8． 如果一个基因与肿瘤的发生有关，如果设计实验以判断该基因是癌基因还是肿瘤抑制基因？

【答案】（1）检测该基因所表达蛋白在肿瘤组织中和正常细胞中的表达量。如果和正常组织相比，在癌细胞中该蛋白表达量很低甚至没有，该基因很可能是肿瘤抑制基因；如果先比之下癌组织中该蛋白高表达，则该基因是癌基因。

（2）进一步实验：敲除该基因在正常细胞系中的表达或抑制该基因表达，观察细胞转化的效果，与肿瘤组织进行比较分析。如果该基因被抑制以后，细胞分裂性增强，可初步确定该基因为肿瘤抑制基因；若减弱分裂则确定是癌基因。

9． 真核生物RNA 的转录后加工及其意义。

【答案】（1）RNA 转录后加工有:

①减少部分片段:如切除5' 端前导序列、3' 端拖尾序列和中部的内含子;

②增加部分片段:5' 加帽，3' 加polyA ，通过归巢和编辑加入一些碱基;

③修饰:对某些碱基进行甲基化等。

（2）RNA 转录后加工的意义:

①RNA 转录后的一系列加工可使RNA 转录后的初产物变成成熟的、有功能的RNA ;

②有些加工可改变RNA 携带的遗传信息，有利于生物的进化，是对“中心法则”的校正和补充。

10．为什么抑癌基因的突变是隐性突变？

【答案】抑癌基因产物的功能是抑制细胞增殖。当只有一个抑癌等位基因发生突变时，另一拷贝的正常等位基因产物仍正常发挥作用，只有当抑癌基因的两个等位基因全部失活才会失去起抑癌功能，故突变为隐性。

11．原核与真核生物的核糖体组成有哪些异同点？

【答案】核糖体又称核蛋白体，由rRNA 和蛋白质组成，是指导蛋白质合成的大分子机器。原核与真核的核糖体 均由大小两个亚基组成。单核糖体有二个亚基，分别称为大亚基和小亚基。在原核细胞和真核细胞中核糖体的组 成见差异下表。

表

12．已知真核生物的核糖体由4种rRNA 和80多种不同的核糖体蛋白组成，为什么真核生物细胞内rRNA 的基因拷贝数远多于核糖体蛋白的基因？

【答案】一方面，细胞内的RNA 的半衰期比蛋白质要短得多，要行使功能必须有大量基因不断表达。另一方面，细胞内要合成蛋白质需要合成mRNA , 通过mRNA 翻译成蛋白原，而mRNA 可以经过核糖体阅读多次，所以只要一次转录就能产生大量同样的蛋白质，但rRNA 直接转录过来行使功能，无法一次转录产生大量同样的行使功能的rRNA 。一个mRNA 可以翻译多个核糖体蛋白，一个rRNA 只能自己构成核糖体成分。