2018年内蒙古民族大学生命科学学院818分子生物学之现代分子生物学考研基础五套测试题
● 摘要
一、名词解释
1. TATA 框
【答案】TA TA 框是指位于基因转录起始点上游-30p~-25bp(真核)或-10bp (原核)的一段保守性较高的序列,控制转录起始的准确性和频率,因共有序列为TATAAAA 而得名。
2. 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)
【答案】聚合酶链式反应,简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应有选择地大量扩增 (包括分离)一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补,经过模板DNA 变性,模板DN Α-引物的配对,在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应,三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链,经多次循环后得到大量目标DNA 片。
3. SDS 电泳(SDS-PAGE )
【答案】SDS 电泳(SDS-PAGE )是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小,在恒定pH (碱性) 缓冲系统中分离的方法,主要用于测定蛋白质亚基分子质量。
4. 感受态细胞(competent cell)
【答案】感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法(如CaCL 等化学试剂)的处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。
5. Molecular Bescons
【答案】分子信标。分子信标是指一种具有自身配对区的DNA 寡核苷酸分子探针,利用荧光标记探针的碱基配对原理,通过观察探针荧光显示或淬灭的现象,确定目的基因的分子标记。
6.
【答案】泛素(遍在蛋白)。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中,主要功能是标记需要分解掉的蛋白质,使其被水解的小蛋白。
7. 移码突变(frameshi Kmutation)
【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变,从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。
8. CpG 岛
CpG 岛是指在人类基因组中分布很不均一的CpG 双核苷酸在基因上成串出现所形成【答案】
的区段。CpG 岛经 常出现在真核生物的管家基因(house-keeping gene)基因的调控区,在其它地方出现时会由于CpG 中胞嘧啶甲基化引发碱基转换,引发遗传信息紊乱。
二、简答题
9. 大肠杆菌的RNA 聚合酶有哪些组成成分? 各个亚基的作用如何?
【答案】(1)大肠杆菌RNA 聚合酶的核心酶由2个α 亚基、1个β亚基、1个β' 哑基和1个ω组成,加上1个α亚基后成为聚合酶全酶。
(2)五种亚基的功能分别为
①α 亚基:负责核心酶的组装及启动子识别,并参与RNA 聚合酶和部分调节因子的相互作用。
②β亚基:起催化作用,催化核昔三磷酸形成磷酸二酯键。
③ω亚基:功能尚不清楚。
④β' 基:有与DNA 模板结合的功能。
⑤σ亚基:负责模板链的选择和识别转录的起始位置,它是酶的别构效应物,使酶专一性识别模板链上的启动子,与链的延伸没有关系。
10.某些动物的部分器官切除后可再生,如蝾螈的前肢。你认为再生的过程中包括了哪些细胞生物学事件?
【答案】再生是生物界普遍存在的现象,广义的再生包括分子水平、细胞水平、组织与器官水平、整体水平的再生,但一般再生是指生物体缺失部分后重建的过程。在蝾螈前肢再生的过程中,包括细胞凋亡、细胞去分化、再分化等一系列的生物学事件。例如,蝾螈前肢的伤口处部分细胞凋亡,多数细胞经去分化形成间充质或纤维细胞 样的细胞团,再由这些细胞再分化形成以有序方式排列的从肱骨直到指骨的完整肢体,该过程由同源异型基因的表达模式调控。
11.新一代测序较之芯片技术优点有哪些?
【答案】新一代测序较之芯片技术优点主要是高通量、低成本。
(1)通过对标签SNP 进行GW AS (全基因组相关分析)分析,能找出不与周围SNP 连锁的位点;
(2)通过对大量的体细胞突变进行系统性深度序列分析,能阐明疾病的发生机制;
(3)能区分序列的边界以及高度相似的序列,对全基因组的覆盖率更敏感、更完整;
(4)能大范围鉴定各种转录调节因子并研究其功能,探索生命现象的调节机制;
(5)能发现新的转录物和变异体,准确定位转录起始位点;
12.简述原核基因转录后调控的不同方式。
【答案】(1) mRNA 自身结构元件对翻译起始的调控
①起始密码子的突变会大大降低翻译效率;
②AUG 上游的一段非翻译区上SD 区域与起始密码子见的距离影响翻译效率;
③mRNA 的二级结构影响核糖体与mRNA 的结合,从而影响了翻译的效率。
(2)mRNA 稳定性对转录水平的影响
mRNA 分子被降解的可能性取决于它们的二级结构,mRNA 被降解翻译效率自然下降。 (3)调节蛋白质的调控作用
mRNA 特异性抑制蛋白则通过与核糖有些mRNA 编码的蛋白质可激活靶基因的翻译,相反,
体竞争结合 mRNA 分子来抑制翻译的起始。
(4)反义RNA 的调节作用
反义RNA 与特定的mRNA 互补配对来抑制mRNA 的翻译。
(5)稀有密码子对翻译的影响
由于细胞内稀有密码子的tRNA 较少,不易获得,因而延长了核糖体在mRNA 上行经的时间,从而降低了翻译的效率;
(6)重叠基因对翻译的影响
偶联翻译可能是保证两个基因产物在数量上相等的重要手段。
(7)翻译的阻遏
复制酶可以作为翻译阻遏物来调控蛋白质的合成。
(8)魔斑核苷酸水平对翻译的影响 魔斑核苷酸即分子,当细胞缺乏氨基酸时产生魔斑核苷酸,可在很大范围内做出如抑制核糖体和其他大分子合成的应急反应,活化某些氨基酸操纵子的转录表达,抑制与氨基酸转运无关的系统,活化蛋白水解酶等,以节省或开发能源,以渡过难关。
13.基因治疗比较难于推广应用的主要原因是载体。简述病毒载体和非病毒载体的优缺点并加以比较。
【答案】(1)病毒性载体
①优点:
a. 病毒性载体容量大、效率高、宿主范围广,并且易于分离制备;
b. 逆转录病毒载体介导的外源基因可以在靶细胞中永久表达。
②缺点:
a. 由于逆转录病毒载体是随机整合的,存在插入突变、激活癌基因的危险;
b. 有些病毒载体,如腺病毒载体,可能产生复制型腺病毒;
c. 宿主的免疫反应可能导致病毒载体表达短暂;
d. 病毒载体可能会引起机体免疫排斥。
(2)非病毒载体
①优点:
相关内容
相关标签