2017年天津大学生命科学学院856分子生物学考研题库
● 摘要
一、名词解释
1． 同源重组（homologous recombination）
【答案】同源重组是指发生在DNA 的同源序列之间的重组，真核生物的非姐妹染色单体的交换，细菌的转化、转导和接合，噬菌体的重组等都属于这种类型。同源重组要求较大的DNA 片段进行交换它们的序列相同或接近相同。
2． 等电聚焦
【答案】
等电聚焦是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同，在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。
3． 蛋白质组（proteome ）
【答案】蛋白质组是指一种生物或一个细胞、组织所表达的全套蛋ft 质（protein ）, 即包括一种细胞乃至一种生 物所表达的全部蛋白质。
4．
【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件，它位于特定的mRNA 区域，可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物，继而发生构象重排，影响mRNA 活性。
5． Transcriptome
【答案】转录组。转录组是指一个活细胞所能转录出的所有niRNA ，即基因组DNA 转录的基因总和。研究转录组的一个重要方法是利用DNA 芯片技术检测机体中基因组的表达。
6． 分子伴侣（molecular chaperone）
【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质，它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解，如热休克蛋白。
7． DNA 解链温度（melting temperature, T m ）
【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。
8． Gene Family
【答案】基因家族。基因家族是指一组功能相似且核苷酸序列具有同源性的基因，可能由某一共同祖先基因（ancestral gene
）经重复和突变产生。基因家族的成员可以串联排列
，如rRNA 、tRNA 在一起，形成基因族（gene cluster）或串联重复基因（tandemly repeated genes）
和组蛋白的基因；有些基因家族的成员也可位于不 同的染色体上，如珠蛋白基因；有些成员不产生功能产物，这种基因称为假基因（Pseudogene ）。
9． 转录单位（transcription unit）
【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基因序列范围，可以是单一基因，也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列，是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段，这是转录单位的重要特征。
10．突变
【答案】突变是指由自身或环境因素导致的DNA —级机构的改变，主要包括碱基的增添、缺失或改变等，染色体结构的畸变也会导致DNA 的突变。
二、填空题
11．SDS-PAGE 中，凝胶的单体为_____，_____是交联剂。蛋白质结合SDS 后均带_____电荷，肽链越长迁移速度越_____。
【答案】丙烯酰胺；甲叉双丙烯酰胺；负；慢
12．研究蛋白质相互作用可以采用_____、_____、_____等方法。
【答案】酵母双杂交；免疫共沉淀；噬菌体展示
13．真核基因表达的调控可以在五种水平上进行，这五个水平是：a._____、b._____ 、c._____、d._____和e._____ ，其中最终决定蛋白质寿命的主要调节途径是f._____ 。
【答案】转录前表达调控；转录水平的调节；转录后水平的调节；翻译水平的调节；翻译后水平的调节；翻译后水平的调节
【解析】基因表达是指遗传信息的转录和翻译过程，它受到不同水平的调节。由于真核生物基因不组成操纵 子，不形成多顺反子mRNA , 所以，真核生物的基因表达受到多级调控系统的调节。
（1）转录前水平的调节主要指染色体DNA 的断裂、删除、扩増、重排、修饰和异染色质化等改变基因结 构和活性的过程。
（2）转录水平的调节包括染色质的活化和基因的活化，增强子通过改变染色质DNA 的结构而促进转录„
（3）转录后水平的调节包括转录产物的加工和转运的调节；通过+同方式的拼接可产生不同的mRNA 。
（4）翻译水平的调节主要是控制mRNA 的稳定性和有选择地进行翻译。
（5）翻译后水平的调节主要控制多肽链的加工和折叠，通过不同方式的加工可产生不同的活性多肽；细胞蛋白质的寿命与其成熟蛋白质N 端的氨基酸有关。
14．第一个被解析出晶体结构的蛋白是_____。
【答案】胰岛素
15．原核生物同源重组时，RecBCD 蛋白具有_____、_____、_____的活性。
【答案】核酸外切酶; 解旋酶; A TP 酶的活性。
RecB 、RecC 和RecD 三者构成在原核生物同源重组中的功能单位RecBCD 蛋白复合【解析】
物，它是一个多功能的酶系，具有依赖于A TP 的单链和双链DNA 外切酶的性质，因此又称为外切核酸酶V 能利用水解A TP 释放的能量使线型DNA 解旋，此外还呈现序列特异性的DNA 单链内切酶活性。
16．含HTH 的DNA 结合蛋白多以_____结构插入DNA 双螺旋的_____以识别DNA 的特定序列。
【答案】a 螺旋；大沟
，近羧【解析】这一类蛋白质分子中有至少两个螺旋，中间由短侧链氨基酸残基形成“转折”
基端的
螺旋中氨基酸残基的替换会影响该蛋白质在DNA 双螺旋大沟中的结合。与DNA 相
互作用时，同源域蛋白的第 一、二两个螺旋往往靠在外侧，其第三个螺旋则与DNA 大沟相结合。
三、简答题
17．为什么抑癌基因的突变是隐性突变？
【答案】抑癌基因产物的功能是抑制细胞增殖。当只有一个抑癌等位基因发生突变时，另一拷贝的正常等位基因产物仍正常发挥作用，只有当抑癌基因的两个等位基因全部失活才会失去起抑癌功能，故突变为隐性。
18．简述染色质免疫共沉淀（CHIP ）技术原理与基本过程。
【答案】（1）基本原理
在活细胞状态下固定蛋白质-DNA 复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免 疫学方法沉淀复合体，特异性地富集目的蛋白结合的DNA 片段，通过对目的片断的纯化与检测，获得该蛋白质 与DNA 相互作用的信息。
（2）基本过程
①首先用甲醛处理细胞，使DNA 和蛋白质固定在交联状态；
②接着用超声波法或酶法等处理处理细胞，获得一定长度范围内的染色质小片段；
③ 之后加入目的蛋白的抗体，使其与靶蛋白
④ 随后加入ProteinA , 结合抗体-祀蛋白
与DNA 相互作用的信息。
⑤ 得到富集复合物，解除交联，对纯化富集的复合物结合； 复合物，并沉淀，清洗沉淀下来的复合物； 片断进行PCR 检测与分析，获得蛋白质
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