2017年天津大学生命科学学院856分子生物学考研仿真模拟题
● 摘要
一、名词解释
1. DNA Fingerprint
DNA 指纹是指由于限制性酶切位点的改变或DNA 序列中重复序列等原【答案】DNA 指纹。
因,以及一些DNA 遗传标记的差异性,生物个体DNA 表现的个体间的差异,这些个体差异反映了个体的身份。利用DNA 指纹鉴定个体差异的技术为DNA fingerprinting,用于亲子鉴定。
2. Non-Watson-Crickbasepairing
【答案】非沃森-克里克式碱基配对。非沃森-克里克式碱基配对是指不完全依照Α-T/U,C-G 配对的一些碱基配对现象,如U-G 配对。
3. DNA 解链温度(melting temperature, T m )
【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。
4. 核酸分子杂交(hybridization )
【答案】核酸分子杂交是指应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA (或RNA )片段,按碱基互 补关系形成杂交双链分子的一项实验技术,杂交双链可以在DNA 与DNA 链之间,也可在RNA 与DNA 链之间 形成。
5. Edman 降解(Edman degradation)
【答案】Edman 降解是指由P. Edman于1950年首先提出来的,最初用于N 端氨基酸残基分析,现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术,
其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应,切下与之反应的那个氨基酸残基,这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基,而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基,又可参加第二轮反应,如此重复,就可以测出n 个残基的顺序。
6. 蛋白质印迹法(Western blotting)
【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜(如硝酸纤维素膜、尼龙膜等)上,再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等,检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体,由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。
7. 基因扩増
【答案】基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象,结果使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要。
8. 分子伴侣(molecular chaperone)
【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质,它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解,如热休克蛋白。
9. 重组修复
【答案】重组修复是指遗传信息有缺损的子代DNA 分子从同源DNA 的母链上将相应的核苷酸序列移至缺口处,再合成新的序列来填补母链的空缺的修复过程,因为发生在DNA 复制之后,又称复制后修复。
10.Intein
【答案】内含肽。内含肽是指存在于某些蛋白质前体肽链内部的一些肽段在转变为成熟蛋白质时,通过非酶促的转肽反应被切除,与其对应的是保留于成熟蛋白质中的外显肽。这些肽段具有核酸酶活性。
二、填空题
11.天然染色体末端不能与其他染色体断裂片段发生连接,这是因为天然染色体的末端存在_____结构。
【答案】端粒
12.cccDNA 是指_____。
【答案】共价闭环DNA
【解析】cccDNA 是乙肝病毒前基因组RNA 复制的原始模板。
13.人线粒体基因组DNA 长度约为a._____kb,它所编码的基因按功能可分为b._____,e_____和d._____。
等三类。
【答案】17; rRNA基因;tRNA 基因;蛋白质基因
【解析】人线粒体基因组很小(16569bp ), 仅能编码2种rRNA , 22种tRNA 和13种蛋白质。
14.在蛋白质序列测定中必须先用对蛋白质的多肽链进行部分水解成较小的肽段,才能进一步采用_____法进行肽段的序列测定。
【答案】蛋白酶或化学试剂;Edman 降解
15.研究蛋白质相互作用可以采用_____、_____、_____等方法。
【答案】酵母双杂交;免疫共沉淀;噬菌体展示
16.SOS 应答系统是DNA 损伤修复的一个重要途径
,蛋白在这里的主要功能是通过引起_____蛋白的降解,从而解除它对_____相关基因转录的抑制。
【答案】LexA 阻遏;DNA 损伤修复
【解析】当细菌DNA 遭到破坏时,细菌会启动一个被称为SOS 的诱导型DNA 修复系统,但由于参与SOS DNA修复系统的许多基因分散在染色体的各个部位,都同时受到LexA 阻遏蛋白的抑制,平时表达水平很低; 而一般情况下,
基因表达并不完全受阻遏蛋白的阻遏,可以参与细菌中的SOS 体系的诱导表达,recA 基因的表达产物RecA 蛋白在这里的主要功能是通过引起LexA 阻遏蛋白的降解,从而解除它对DNA 损伤修复 相关基因转录的抑制。
三、简答题
17.简述真核生物转录前水平的调控机制。
【答案】真核生物转录前水平的基因调节方式主要有如下几种:
(1)染色质丢失。某些低等真核生物,如蛔虫,在其发育早期卵裂阶段,所有分裂的细胞除一个之外,均 将异染色质部分删除掉,从而使染色质减少约一半,而保持完整基因组的细胞则成下一代的生殖细胞,在此加工 过程中DNA 发生了切除并重新连接。
(2)基因扩增。基因扩增是细胞短期内大量产生出某一基因拷贝从而适应特殊需要的一种手段,通过改变 基因数量而调节基因表达产物的水平。某些脊椎动物的昆虫的卵母细胞,为贮备大量核糖体以供卵细胞受精后发 育的重要,通常都要专一性地增加编码核糖体RNA 的基因。
(3)基因重排。基因组序列发生改变,较常见的是失去一段特殊序列,或是一段序列从一个
位点转移到另 一个位点。重排可使表达的基因发生切换,由表达一种基因转为表达另一种基因。
DNA 的碱基可被甲基化,(4)染色体DNA 的修饰。主要形成5-甲基胞嘧啶甲基腺嘌呤
DNA 稳定性以及与蛋白
质相互作用方式的改变,从而控制基因的表达。
(5)异染色质化。凝缩状态的染色质称为异染色质,为非活性转录区。真核生物通过异染色质化而关闭某 些基因的表达,如雌性晡乳动物细胞有两个X 染色体,其中一个高度异染色质化而永久性失去活性,通常染色 质的活性转录区没有或很少甲基化,非活性区则甲基化程度高。
18.是通过攻击人体内淋巴细胞,使人体的免疫系统遭到破坏而致病的。能不能对艾滋病患者进行定时输入,通过基因工程生产的特定
碍?
【答案】暂时不能。主要存在的技术障碍有:
(1)体外培养T4淋巴细胞困难:T4淋巴细胞在体内的不同组织环境中分别形成和成熟,于骨髓中生成,在胸腺内分化成熟,然后移居于周围淋巴组织中,而体外很难模拟其所处的环境。
(2)T4淋巴细胞靶向性转移困难:即使产生了正常功能的T4淋巴细胞,但是输入人体后还需解决T4淋巴 细胞正常移居于周围淋巴组织的问题,
和少量DNA 甲基化作用能引起染色质结构、DNA 构象、在生物发育和分化过程中,淋巴细胞而延长生命?主要存在哪些技术上的障
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