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2017年西南林业大学生命科学学院727分子生物学考研题库

  摘要

一、名词解释

1.

【答案】泛素(遍在蛋白)。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中,主要功能是标记需要分解掉的蛋白质,使其被水解的小蛋白。

2. 穿梭载体(shuttle vector)

【答案】穿梭载体是指具有多个复制子能在两个以上的不同宿主细胞复制和繁殖的载体。

3. SD 序列(Shine Dalgamo sequence)

【答案】SD 序列是指存在于原核生物mRNA 起始密码子上游7〜12个核苷酸的富含嘌呤的保守片段,能与 16SrRNA3' 端富含嘧啶的区域进行反向互补,所以可将mRNA 的AUG 起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。

4. 等电聚焦

【答案】

等电聚焦是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。

5. 反式剪切(Trans-splicing )

【答案】反式剪切是指一种保守的mRNA 加工机制,已经在包括原生动物和多细胞动物等多种生物体中发现。SL 反式剪切是反式剪切的一种,是将一段相对保守的剪切引导序列(SL )加到

前体mRNA 的5' 端作为一个外显子,从而提高成熟mRNA 的稳定性,并且可能参与翻译的起始。

6. Transcriptome

【答案】转录组。转录组是指一个活细胞所能转录出的所有niRNA ,即基因组DNA 转录的基因总和。研究转录组的一个重要方法是利用DNA 芯片技术检测机体中基因组的表达。

7. 突变

【答案】突变是指由自身或环境因素导致的DNA —级机构的改变,主要包括碱基的增添、缺失或改变等,染色体结构的畸变也会导致DNA 的突变。

8. 蛋白质印迹法(Western blotting)

【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜(如硝酸纤维素膜、尼龙膜等)上,再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等,检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体,由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。

二、简答题

9. 简述I 、II 类内含子的剪接特点。

【答案】(1)I 类内含子的剪接

主要是转酯反应,剪接反应实际上是发生了两次磷酸二酯键的转移。

①第一步转酯反应由一个游离的鸟苷或鸟苷酸(GMP , GDP 或GTP )介导,其3'-OH 作为亲核集团攻击内含子5' 端的磷酸二酯键,从上游切开RNA 链,在第二步转酯反应中,上游外显子的自由3'-OH 作为亲核基团攻击内含子3' 位核苷酸上的磷酸二酯键,使内含子完全被切开,上下游两个外显子通过新的磷酸二酯键重新连接;

②I 类自剪接内含子剪切后释放出线性内含子,而不是一个套索状结构。

(2)II 类内含子的剪接

①II 类自剪接内含子的转酷反应无须游离鸟普酸或鸟苷,而是由内含子本身的靠近3' 端的腺苷酸2'-OH 作为亲核基团攻击内含子的5' 端的磷酸二酯键,从上游切开RNA 后形成套索装结构,再由上游外显子的自由3'-OH 作为亲核基团攻击内含子3' 位核苷酸上的磷酸二酯键,使内含子被完全切开,上下游两个外显子通过新的磷酸二酯键重新连接;

(2)II 类自剪接内含子剪切后释放出套索状结构的内含子。

10.什么是转座子? 可分为哪些种类?

【答案】(1)转座子是存在于染色体DNA 上可自主复制和位移的基本单位。转座子常常被定位到特定的基因中,造成该基因突变。

(2)转座子可以分为两大类:插入序列(IS 因子)和复合型转座子。

①插入序列(IS 因子)

a. 插入序列是最简单的转座子,它不含有任何宿主基因。

b. 插入序列是可以独立存在的单元,带有介导自身移动的蛋白,也可作为其他转座子的组成部分;

c. 插入序列是很小的DNA 片段,末端具有反向重复序列,转座时复制宿主靶位点一小段DNA ,形成位于IS 两端的正向重复序列。

②复合型转座子

a. 复合型转座子是一类带有某些抗药性基因(或其他宿主基因)的转座子

b. 复合型转座子的两翼往往是两个相同或高度同源的IS 序列。

11.真核生物单拷贝基因转录调控的Britten-Davidson 模型。 【答案】模型是1969年Britten 和Davidson 提出来的,该模型的组成:

,端存在着一段序列称为受体序列(位点)(1)结构基因:在该模型中称为生产基因(P )的

它可被某 种激活因子(A )所激活;

(2)整合基因是产生激活物的基因;

(3)感受位点(S )负责接受生物体对基因表达的调控信号,如在氨基酸饥饿、激素水平等条件影响下能诱 导整合基因合成激活物,而激活物的合成又受感受位点的控制。

这个模型和原核细胞调控模型不同之处,主要在于:每一个特定的受体顺序不是只结合于一个特定的基因组, 它在DNA 链上有重复顺序,各重复顺序可和多个分开的结构基因组结合,而一个结构基因(或结构基因组)又 可以有一个以上的受体顺序。因此一个激活蛋白可激活多个不同基因,而一个基因又可为多个激活蛋白所激活。

12.简述摆动学说。

【答案】1966年,Crick 根据立体化学原理提出摆动学说,解释了反密码子中某些稀有成分(如I )的配对。摆动学说认为:

(1)在密码子与反密码子的配对中,前两对严格遵守碱基配对原则,第三对碱基有一定的自由度,可以“摆 动”,因而使某些tRNA 可以识别1个以上的密码子.

(2)究竟能识別多少个密码是由反密码的第一个碱基的性质决定的。

①第一位碱基为A 或C 者,只能识别1种密码;

②第一位碱基为G 或U 者可以识别2种密码;

③第一位碱基为I 者可识别3种密码。

13.简述代谢物对基因表达调控的两种方式。

【答案】基因表达调控由调控机制的不同而分为正调控和负调控。

(1)在正调控系统中,调节基因的产物是激活蛋白,起着激活结构基因转录的作用。

根据作用效果不同,正调控系统分为:

①正控诱导:效应物(诱导物)存在时,激活蛋白处于活性状态,结构基因转录;

②正控阻遏:效应物存在时,激活蛋白处于无活性状态,结构基因不转录。

(2)在负转录调控系统中,调节基因的产物是阻遏蛋白,其作用部位是操作区,起着阻止结构基因转录的作用。根据作用效果不同,负调控系统分为:

①负控诱导:阻遏蛋白不与效应物(诱导物)结合时,结构基因不转录;

②负控阻遏:阻遏蛋白与效应物结合时,结构基因不转录。

14.病毒致癌基因很多是宿主本身的原癌基因,这种选择对于病毒本身有何意义?

【答案】(1)病毒致癌基因是指一类存在于肿瘤病毒中能使靶细胞发生恶性转化的基因,这种肿瘤病毒大多是逆 转录病毒。

(2)病毒获得致癌基因的过程

病毒感染宿主细胞后,在逆转录酶的催化下,以病毒RNA 为模板合成双链DNA 前病毒,在宿主细胞中一直传代;然后病毒DNA 随机整合于宿主细胞基因组中,通过重排或重组,将宿主细胞自身的原癌基因转至病毒 基因组中,这样野生型病毒就转变成携带原癌基因的病毒,而获得致癌性质。