2017年浙江大学生物医学工程与仪器科学学院830生物化学与分子生物学之现代分子生物学考研冲刺密押题
● 摘要
一、名词解释
1． 简并性（degeneracy ）
【答案】简并性是指由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象，对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子 （synonymouscodon ） 。
2． DNA 复性（DNA renaturation）
【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。
3． 顺式作用元件
【答案】顺式作用元件是指与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别并结合的特异DNA 序列，包括启动子、上游启动子元件、增强子、沉默子等。
4． 核酸分子杂交（hybridization ）
【答案】核酸分子杂交是指应用核酸分子的变性和复性的性质，使来源不同的DNA （或RNA ）片段，按碱基互 补关系形成杂交双链分子的一项实验技术，杂交双链可以在DNA 与DNA 链之间，也可在RNA 与DNA 链之间 形成。
5． 反式剪切（Trans-splicing ）
【答案】反式剪切是指一种保守的mRNA 加工机制，已经在包括原生动物和多细胞动物等多种生物体中发现。SL 反式剪切是反式剪切的一种，是将一段相对保守的剪切引导序列（SL ）加到
前体mRNA 的5' 端作为一个外显子，从而提高成熟mRNA 的稳定性，并且可能参与翻译的起始。
6． DNA Fingerprint
DNA 指纹是指由于限制性酶切位点的改变或DNA 序列中重复序列等原【答案】DNA 指纹。
因，以及一些DNA 遗传标记的差异性，生物个体DNA 表现的个体间的差异，这些个体差异反映了个体的身份。利用DNA 指纹鉴定个体差异的技术为DNA fingerprinting，用于亲子鉴定。
7． 内含子（intron ）与外显子（exon ）
，只转录，在【答案】内含子（intron ）是指真核基因中的非编码序列，又称插入序列（IVS ）
前体mRNA 加工时被剪切掉;
外显子（exon ）是指真核基因中的编码序列，是一个基因表达为多肤链的部分。
8． 无义突变（nonsensemutation ）
【答案】无义突变是指在DNA 序列中任何导致氨基酸的三联体密码子转变为终止密码子（UAG 、UGA 、U 从）的突变，它使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽。
9． Non-Watson-Crickbasepairing
【答案】非沃森-克里克式碱基配对。非沃森-克里克式碱基配对是指不完全依照Α-T/U，C-G 配对的一些碱基配对现象，如U-G 配对。
10．Edman 降解（Edman degradation）
【答案】Edman 降解是指由P. Edman于1950年首先提出来的，最初用于N 端氨基酸残基分析，现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术，
其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应，切下与之反应的那个氨基酸残基，这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基，而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基，又可参加第二轮反应，如此重复，就可以测出n 个残基的顺序。
11．反式作用因子
【答案】反式作用因子是指通过直接结合或间接作用于DNA 、RNA 等核酸分子，对基因表达发挥不同调节作用 （激活或抑制：）的各类蛋内质因子的总称，也称反式作用元件。
12．锌指结构（zine finger motif）
【答案】锌指结构是指许多转录因子共有的DNA 结合结构域，具有很强的保守性，具有此结构的蛋白借肽链的弯曲使两个Cys 和两个His 与一个锌离子，或四个Cys 与一个锌离子形成形似手指状的三级结构。
二、简答题
13．RNA 的结构有哪些特点?
【答案】（1）RNA 含有核糖和嗜咤，与DNA 不同，一般为单链长分子;
（2）RNA 不是双螺旋结构，但可通过自身链的折叠，在局部形成双螺旋结构;
（3）RNA 中Α-U , G-C 配对，未配对的区域可形成突起，也可自由旋转，并由于RNA 碱基和核糖磷酸骨架之间的相互作用，可折叠成复杂的三级结构。
14．假如你得到一个据说通过改造并适合作为基因治疗载体的病毒，你将如何分析这种可行性？主要在哪些 方面做改造？你将如何测试改造后的病毒载体的效率和安全性？
【答案】（1）作为基因治疗载体的病毒的基本要求：
①能够感染多种生物的多种类型不同的细胞；
②易于改造并易于插入外源基因，能装配成病毒颗粒；
③能使外源基因完全整合到宿主细胞中，并且外源基因要有较高的表达水平；
④对人体安全。
（2）改造包括：
①改造病毒壳粒蛋白的抗原表位；
②减少病毒DNA 中非必需基因的表达；
③减少病毒载体的免疫反应及对细胞的毒性；
④改造所选择的目标基因的插入位点，便于目的基因的装载。
（3）测试病毒载体的效率与安全性：
①病毒载体的有效性表现在能够尽量多地将目的基因导入靶细胞并整合到宿主染色体上，因此可通过检测目的基因的含量来衡量。
②病毒载体的安全性表现在载体对细胞正常代谢的影响。因为病毒载体中可能产生有传染性、野型或辅助型 病毒，随机整合于宿主基因组中，活化癌基因或抑制癌基因失活；也有可能病毒载体自身编码的基因产物过度表达，引起细胞及机体不适的反应。
15．简述I 、II 类内含子的剪接特点。
【答案】（1）I 类内含子的剪接
主要是转酯反应，剪接反应实际上是发生了两次磷酸二酯键的转移。
①第一步转酯反应由一个游离的鸟苷或鸟苷酸（GMP , GDP 或GTP ）介导，其3'-OH 作为亲核集团攻击内含子5' 端的磷酸二酯键，从上游切开RNA 链，在第二步转酯反应中，上游外显子的自由3'-OH 作为亲核基团攻击内含子3' 位核苷酸上的磷酸二酯键，使内含子完全被切开，上下游两个外显子通过新的磷酸二酯键重新连接;
②I 类自剪接内含子剪切后释放出线性内含子，而不是一个套索状结构。
（2）II 类内含子的剪接
①II 类自剪接内含子的转酷反应无须游离鸟普酸或鸟苷，而是由内含子本身的靠近3' 端的腺苷酸2'-OH 作为亲核基团攻击内含子的5' 端的磷酸二酯键，从上游切开RNA 后形成套索装结构，再由上游外显子的自由3'-OH 作为亲核基团攻击内含子3' 位核苷酸上的磷酸二酯键，使内含子被完全切开，上下游两个外显子通过新的磷酸二酯键重新连接;
（2）II 类自剪接内含子剪切后释放出套索状结构的内含子。
16．分子克隆的基本步骤。
【答案】（1）分离制备待克隆的DNA 片段；
（2）克隆基因载体的选择与构建；
（3）重组DNA 分子的构建；
（4）重组DNA 分子导入受体细胞和重组克隆的筛选；
相关内容
相关标签