2018年青岛大学医学院889分子生物学[专业硕士]之现代分子生物学考研核心题库
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2018年青岛大学医学院889分子生物学[专业硕士]之现代分子生物学考研核心题库(五) .. 19
一、名词解释
1. 等电聚焦
【答案】
等电聚焦 是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。
2. SD 序列(Shine Dalgamo sequence)
【答案】SD 序列是指存在于原核生物mRNA 起始密码子上游7〜12个核苷酸的富含嘌呤的保守片段,能与 16SrRNA3' 端富含嘧啶的区域进行反向互补,所以可将mRNA 的AUG 起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。
3. 顺式作用元件
【答案】顺式作用元件是指与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别并结合的特异DNA 序列,包括启动子、上游启动子元件、增强子、沉默子等。
4. TATA 框
【答案】TA TA 框是指位于基因转录起始点上游-30p~-25bp(真核)或-10bp (原核)的一段保守性较高的序列,控制转录起始的准确性和频率,因共有序列为TATAAAA 而得名。
二、问答与实验设计题
5. 简述σ因子的作用。
【答案】σ因子作为所有RNA 聚合酶的辅助因子起作用,主要负责模板链的选择和转录的起始,它是酶的别构效应物,使酶专一性识别模板链上的启动子,可以极大地提高RNA 聚合酶对启
动子区DNA 序列的亲和力,还能极大地降低RNA 聚合酶与模板DNA 上非特异性位点的亲和力。
6. 基因、外显子和开放阅读框的区别。
【答案】(1)基因是产生一条多肤链或功能RNA 分子所必需的全部核苷酸序列。
(2)外显子是基因及其转录初级产物上可表达的序列,或转录初级产物上通过拼接作用而保留于成熟的RNA 中的核苷酸序列或基因中与成熟RNA 相对应的DNA 序列。
(3)开放阅读框是基因序列的一部分,包含一段可以编码蛋白的碱基序列,不能被终止子打断,也就是被翻译的区域。
7. 简述DNA 结合结构域分类及碱性亮氨酸拉链结构的特点。
【答案】(1)蛋白质与DNA 结合区域存在一些特殊的基序(motif )结构,主要有:
①螺旋一转角一螺旋(HTH )基序。两段螺旋被一短的转角结构分开,其中一段螺旋为DNA 识别螺旋。 ②锌指基序。由肽链的保守序列中的一对组氨酸加一对半胱氨酸
或2
对半胱氨酸
与一个锌离子形成配位键,这些氨基酸对之间的多肽链成环状突出并折迭成指形结构,多个指结构常串联重复。 锌指族转录因子以二聚体形式同DNA 上的顺式调控元件结合。含锌指基序的转录因子,与GC 盒结合的SP1、 类固醇激素受体家族,抑癌蛋内
1^11都位于螺
等。 ③亮氨酸拉链基序。由一段每隔6个aa 就有一个Leu 的伸展肽链组成,这些周期性出现的 旋的同一侧面,因此两条均含Leu 拉链基序的蛋白质通过亮氨酸侧链的相互作
用形成二聚体。具有亮氨酸拉链基 序的转录因子,如原癌基因
基因产物 及其结合蛋白Max 。 ④螺旋一环一螺旋(HLHt )基序。由2个a 螺旋间隔一个非螺旋的环(loop )组成,如原癌⑤同源域(ho-meodomain )蛋白。来自控制躯体发育的基因,长约60个氨基酸,其中的DNA 结合区与螺旋 一转角一螺旋相似,主要与DNA 大沟相结合。
(2)碱性亮氨酸拉链结构的特点:
①两个蛋白质分子近处C 端肽段各自形成两性a 螺旋, ot 螺旋的肽段每7个氨基酸残基出现一个亮氨酸残基, 两个a 螺旋的疏水面互相靠拢,两排亮氨酸残基疏水侧链排列成拉链状,形成疏水键使蛋白质结合成二聚体;
②亮氨酸拉链区并不能直接结合DNA , 只有肽链氨基端20~30个富含碱性氨基酸结构域与DNA 结合。
8. 请分析人类基因组计划的发展趋势。
【答案】随着人类基因组计划的完成,人类基因组中储藏的有关人类生存和繁衍的全部遗传信息将被破译,它将帮助人类了解各种生理过程的内在机制,揭开癌症等严重危害人类健康的疾病的生理及分子机制,并最终为疾病的预防及治疗提供理论基础。
如今,随着计算机分析处理能力的提高以及序列分析流程的不断改进和优化,“后基因组时代”已经到来, 基因组研究由静态的序列测定进入了动态的基因组功能鉴定的新阶段,从单一的基因或蛋白质的研究转向全面分析基因组功能的系统研究。越来越多物种的基因组DNA 被测定,基因组功能被解析,在基因组学、蛋白组学和 代谢组学为核心的各类“组学”研究基础上开展的系统生物学研究是现在研究的前沿方,有助于解决诸如粮食短 缺、环境污染、能源资源匮乏、生态平衡失调、生物物种消亡等一系列世界难题。
9. 简述叶绿体蛋白质的跨膜运转机制。
【答案】叶绿体定位信号肽一般有两部分:第一部分决定该蛋白质能否进人叶绿体基质,第
二部分决定该蛋白质能否进人类囊体。叶绿体蛋白质的跨膜运转机制:
(1)胞质中游离核糖体上合成的叶绿体多肽。
(2)叶绿体多肽在脱离核糖体后折叠成具有三级结构的蛋白质分子。
(3)多肽上某些特定位点结合于只有叶绿体膜上才有的特异受体位点,产生跨膜通道,进入叶绿体基质。
(4)在位于叶绿体基质内的可溶性活性蛋白水解酶的作用下,叶绿体多肽的第一部分跨膜信号肽切除,并 在第二部分信号肽的引导下,跨过类囊体膜,进入类囊体。
(5)切除第二部分信号肽,成为成熟的叶绿体蛋白质。
10.原核与真核生物的核糖体组成有哪些异同点?
【答案】核糖体又称核蛋白体,由rRNA 和蛋白质组成,是指导蛋白质合成的大分子机器。原核与真核的核糖体 均由大小两个亚基组成。单核糖体有二个亚基,分别称为大亚基和小亚基。在原核细胞和真核细胞中核糖体的组 成见差异下表。
表
11.真核细胞的转录和加上是高度偶联灼,简述有哪些加工过程与转录偶联? 是如何偶联的?
【答案】(1)与转录相偶联的加工过程有:5’-端加帽,5'~3'间的剪接,3' 末端的加工。
(2)RNA 聚合酶II 最大亚基的梭基末端具有一段特殊的序列,被称为CTD 结构。该结构是以7个氨基酸(-Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser-)为重复单位的高度保守重复序列。CTD 结构的磷酸化与去磷酸化之间的转换参与到转录与加工的偶联过程中,通过与加工因子的有机结合而对mRNA 的加工过程产生作用。正是由于CTD 的存在,RNA 聚合酶在整个转录延伸的过程中不仅聚集了与转录合成、延伸相关的作用因子,还聚集了与mRNA 加工相关的加工囚子。这些囚子通过蛋白间相互作用而组成了一个庞大的复合体,mRNA 从合成到加工到成熟的整个过程都在这个复合体内完成。
12.什么是增强子?有哪些特点?试述它的作用机制。
【答案】(1)增强子是指能够提高转录起始效率的DNA 序列,它可位于转录起始点的5' 或
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