2018年江南大学生物工程学院703分子生物学之现代分子生物学考研仿真模拟五套题
● 摘要
一、名词解释
1． 双向电泳
【答案】双向电泳是指将样品进行电泳后，在它的直角方向再进行一次电泳，为了不同的目的而采用不同的组合 方式的分离方法，目前双向电泳大多是指第一向为等电聚焦，平衡后，第二向为SDS 电泳。
2． 移码突变（frameshi Kmutation）
【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变，从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。
3． Intein
【答案】内含肽。内含肽是指存在于某些蛋白质前体肽链内部的一些肽段在转变为成熟蛋白质时，通过非酶促的转肽反应被切除，与其对应的是保留于成熟蛋白质中的外显肽。这些肽段具有核酸酶活性。
4． 转录单位（transcription unit）
【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基因序列范围，可以是单一基因，也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列，是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段，这是转录单位的重要特征。
5． 反式作用因子
【答案】反式作用因子是指通过直接结合或间接作用于DNA 、RNA 等核酸分子，对基因表达发挥不同调节作用 （激活或抑制：）的各类蛋内质因子的总称，也称反式作用元件。
6． Telomerase
【答案】端粒酶。端粒酶是指由蛋白质和RNA 两部分组成的一种反转录酶，其中RNA 作为模板序列，指导合成染色体末端的端粒DNA 的重复序列片段。
7． RNA 编辑（RNA editing）
【答案】RNA 编辑是指某些RNA ，特别是mRNA 前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA 所编码的遗传信息发生改变，因为经过编辑的mRNA 序列发生了
不同于模板DNA 的变化。
8． DNA 解链温度（melting temperature, T m ）
【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。
9． 拓扑异构酶（topoisomerase ）
【答案】拓扑异构酶是指能在闭环DNA 分子中改变两条链的环绕次数的酶，其作用机制是先切断DNA ，让DNA 绕过断裂点以后再封闭形成双螺旋或超螺旋DNA 。
10．无义突变（nonsensemutation ）
【答案】无义突变是指在DNA 序列中任何导致氨基酸的三联体密码子转变为终止密码子（UAG 、UGA 、U 从）的突变，它使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽。
11． 【答案】即荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization ），是指一种利用非放射性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性，荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合
起来，通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交，在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断，为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
12．同源重组（homologous recombination）
【答案】同源重组是指发生在DNA 的同源序列之间的重组，真核生物的非姐妹染色单体的交换，细菌的转化、转导和接合，噬菌体的重组等都属于这种类型。同源重组要求较大的DNA 片段进行交换它们的序列相同或接近相同。
二、简答题
13．DNA 复制时为什么前导链是连续复制，而后随链是以不连续的方式复制? 并请以大肠杆菌为例简述后随链复制的各个步骤。
【答案】（1）前导链是连续复制，而后随链是以不连续的方式复制的原因:
①DNA 的合成方向是5' →3' ，DNA 聚合酶只有5' →3' 聚合酶活性，而没有3' →5' 聚合酶活性。
②复制叉附近解开的DNA 链一条是5' →3' 方向，另一条是3' →5' 方向，两者分别是后随链和前导链的模板。
DNA 合成方向和复制叉移动方向相同，③在DNA 的一条模板链上，可以连续复制; 而在另一
条模板链上，DNA 合成方向和复制叉移动方向却是相反的。
（2）大肠杆菌DNA 复制包括复制的起始、DNA 片段的延长和复制的终止三个过程。具体如
下:
①复制起始
a. 复制叉的形成
复制蛋白DnaA 识别大肠杆菌复制起始点（oriC ）并与其结合，然后DnaC 结合上去，允许解旋酶DnaB 结合，将母链DNA 分开，形成一个复制叉; 在起始点出现复制泡，从起点向两个方向移动。
b. 引物的形成
在后随链上，DNA 引发酶（DnaG ）与DnaB 结合形成复合体，A TP 水解驱动复合物沿模板链移动，促使母链分开，单链结合蛋白（SSB ）与单链DNA 相结合，DnaG 催化合成短的RNA 引物。
②DNA 片段的延长
DNA 聚合酶III 从引物3'-OH 起，延伸冈崎片段，当DNA 聚合酶III 遇到已经合成的冈崎片段引物时，延长反应停止
③DNA 复制的终止:
a.DNA 聚合酶I 去除引物，并填补留下的空隙。
b.DNA 连接酶封闭缺口，完成链的合成。
14．试述结合各种基因组学方法和已有数据还能进一步探索哪些生物学问题。
【答案】（1）以全基因组测序为目标的结构基因组学和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学，有助于人们在基因组学、蛋白质组学、分子细胞生物学以及生物体水平上探宄生命现象，对疾病机理的阐明以及疾病的防治有重要应用意义。
（2）根据同源性方法将人类基因组与模式生物基因组进行比较，有助于分析人类基因的功能，也有助于区别人类和其他生物的本质差异，进而探索遗传的奥秘。
15．简述双脱氧链终止法进行DNA 测序的原理和方法。
【答案】（1）原理：双脱氧的核苷酸是人造的分子，
这种分子糖环的
轻基基团，而在天然分子中糖环的
基互补配对原则是天然三磷酸核苷酸，用它的但是，若进入的核苷酸是双脱氧的，则由于
复制终止。
（2）方法：将待测序的单链DNA 的模板、引物、四种单脱氧碱基和DNA 聚合酶分成四管，在四管反应系 统中分别按比例引入四种双脱氧碱基，只要双脱氧碱基掺入链端，该链就停止延长，链端掺入单脱氧碱基的片段
可继续延长。如此每管反应体系中便合成以共同引物为
脱氧碱基为
不一的核酸片段（长度相邻者仅差一个碱基），根据片段
片段的碱基排列顺序。
和碳上都没有了g 基连接。碳上有一个羟基。在DNA 复制过程中，新掺入的碱基按碱磷酸基团同生长链的前一个核苷酸的没有羟基而影响下一个磷酸二酯键的形成，导致DNA 端，以双端的一系列长度不等的核酸片段。反应终止后，分四个泳道进行电泳，以分离长短端的双脱氧碱基，便可依次阅读合成
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