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一、名词解释

1． 透析（dialysis ）。

【答案】透析是指利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。

2． 乳酸循环。

【答案】乳酸循环是指指肌肉缺氧时产生大量乳酸。大部分经血液运到肝脏，通过糖异生作用，肝糖原或葡萄糖补充血糖，血糖可再被肌肉利用，这样形成的循环。

3． 无效合成（abortive synthesis）。

【答案】无效合成是指原核生物转录起始过程中，在进入真正的转录延伸之前，RNA 聚合酶往往会重复催化合 成并释放短的RNA 分子，长度一般在6核苷酸左右的现象。 4．

（限制性内切酶）。

【答案】

苷酸序列，

并断开每条链的一个磷酸酶

5． 低密度脂蛋白

受体。

6． 核心酶。

【答案】

核心酶是指没有亚基的RNA 聚合酶。大肠杆菌的RNA 聚合酶全酶由5个亚基组 成

7． 第二信使。

【答案】第二信使是指细胞外第一信使与其特异受体结合后，通过信息跨膜传递机制激活的受体，刺激膜内特定 的效应酶或离子道，而在胞浆内产生的信使物质。这种胞内信息分子起到将胞外信息传导、放大、变为细胞内信息的作用，包括环磷酸腺苷（cAMP ）、环磷酸鸟苷（cGMP ）、三磷酸肌醇（IP3）、二酰基甘油（DG ）等。

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（限制性内切酶）时是指一类能识别双链DNA 中特定的核

的DNA 内切酶，时细菌限制修饰系统的重要部分，

可防止外源DNA 的入侵。目前发现了三类限制性内切酶，其中第二类酶是基因工程重要的工具

受体

把

内吞入细胞，获得其中的胆固醇的

【答案】

低密度脂蛋白受体是指能识别并结合

8． DNA

的双螺旋

【答案】DNA 的双螺旋是一种核酸的构象，在该构象中，两条反向平行的多核苷酸链相互缠绕形成一个右手的双螺旋结构。碱基位于双螺旋内侧，磷酸与糖基在外侧，通过磷酸二酯键相连，形成核酸的骨架。碱基平面与假设的中心轴垂直，糖环平面则与轴平行，两条链皆为右手螺旋。双螺旋的直径为2nm ，

碱基堆积距离为

组成，

碱基按

两核苷酸之间的夹角是

每对螺旋由10对碱基

配对互补，彼此以氢键相联系。维持DNA 双螺旋结构稳定的力主要是碱

基堆积力和氢键，以及离子键。双螺旋表面有宽窄深浅不一的一个大沟和一个小沟。

二、问答题

9． 使用非变性凝胶电泳分离蛋白质时，蛋白质分子的大小、形状和电荷决定其在凝胶上的迁移率。而为何DNA 用限制性内切核酸酶切割得到线形的片段DNA 电泳时，决定其迁移率的主要是DNA 的大小，而与其形状、电荷无关？

【答案】电泳的DNA 通常用限制性内切核酸酶进行切割得到线性片段，因此DNA 的形状都是均一的。电荷对于DNA 也是恒定的，因为每一个核苷酸由于磷酸基团都有相同的电荷，因此DNA 具有均一的形状和荷质比，因此分离仅取决于DNA 分子大小，小片段电泳快，大片段电泳慢。

10．在催化葡萄糖进行磷酸化反应时，肝脏同时具有己糖激酶和葡萄糖激酶有何生物学优势？

【答案】当己糖激酶被饱和时，葡萄糖激酶能继续移除血液中的葡萄糖用以生成肝糖原，以确保升高的血糖储存备用。

11．对于表达载体有何要求？

【答案】

表达载体如

质粒，具有所有正常克隆载体的组成（如复制起始点，可供选择的

聚

标记，多克隆位点），而且它还具有使插入的DNA 被转录的能力。它具有RNA 聚合酶，如酶的细胞系一起使用。

12．外源NADH 是如何进入线粒体参加电子传递的？

【答案】外源NADH 进入线粒体是通过两种穿梭作用参加电子传递的：

（1）甘油-3-憐酸穿梭：经甘油-3-憐酸穿梭，胞质中NADH 进入到线粒体变成FADH ，经呼吸链氧化可生成

（2）苹果酸穿梭:经苹果酸穿梭，胞质中NADH 进入到线粒体变成仍然是NADH 经呼吸链氧

A TP 。 化可生成

13．具有酶活性的核酸通常是RNA ，而不是DNA 。为什么？

【答案】因为RNA 能够像蛋白质一样折叠成各种不同的三维结构，这对于酶来说十分重要

；

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合酶的启动子，以及终止序列。这些都位于多克隆位点附近，这些载体与可以产生T7RNA 聚合

另外，RNA

具有，可以做亲核进攻，这对于酶的催化活性非常关键。实际上细胞内的各种

核酶都依赖于引发的亲核进攻。

14．写出真核mRNA 的帽子结构式。真核生物mRNA

的端有一段polyA ，端有一个“帽子”，“帽子”的结构特点是什么？比较原核mRNA 和真核mRNA 的区别。

【答案】mRNA

的

帽子结构式如图所示。

图mRNA 的Y 帽子结构

在

核苷的

（1

）（2

）

端有一“帽子结构”

甲基鸟苷的核糖

其特点为

端的鸟嘌呤

被甲甲基

基化，形成7-

甲基鸟苷

通过3

个磷酸残基与相邻的

连接。这个帽子结构在mRNA 的翻译中可能有重要作用。 端无帽状结构存在。 端不含polyA 结构。

原核mRNA 和真核mRNA 有显著不同，表现在：

（3）—般为多顺反子结构，即一个mRNA 中常含有几个蛋白质信息，能指导几个蛋白质的生物合成，如MS2的mRNA 就含有A 蛋白基因、外壳蛋白基因、复制酶基因等三个基因。

（4）mRNA 代谢很快，代谢半衰期一般以秒计，很少达到lOmin 以上。 15

．

和米氏常数可以通过作图法求得，试比较

的优缺点。

时对应的

优点是

所以测不准。

图是一条直线，它与纵

都较容易求，缺点是实验

就求不准。

斜率即为

优

【答案】轴的截距为

图、双倒数图

作图

作

图及直接线性作图法求

图是双曲线的一支，

可以通过其渐近线求

与横轴的截距为

优点是使用方便

与横轴的截距为

比较直观，

缺点是实际上测定时不容易达到

得到的点一般集中在直线的左端，

作图时直线斜率稍有偏差

图也是一条直线，

它与纵轴的截距为

点是求

很方便，

缺点是作图前计算较繁琐

优缺点与寸

是求

和

纵坐标为

与横轴的截距为

的横坐标为

图也是一条直线，它与纵轴的截距

图相似。直接线性作图法是一组交于一点的直线，交点

的最好的一种方法，不需计算，作图方便，结果准确。

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