2018年安徽医科大学北大深圳医院临床学院306西医综合之生物化学考研强化五套模拟题
● 摘要
一、名词解释
1． Southernblotting 。
【答案】Southernblotting 即DNA 印迹，是指双链DNA 在凝胶电泳后变性为单链，转移并固定到特定滤膜（如硝酸纤维素膜）上，同标记的核酸探针杂交，根据杂交信号显示靶DNA 的存在与位置。DNA 印迹可用于检测基因突变。
2． 氨基酸残基（amino acid residue）。
【答案】氨基酸残基是指肽链中的氨基酸由于参加肽键的形成已不是完整的分子。
3． 抗毒素。
【答案】抗毒素是一类对毒素具有中和作用的特异性抗体。能中和相应外毒素的毒性作用，机体经产生外毒素而致病的病原菌感染后即能产生抗毒素。外毒素经甲醛处理后，可丧失毒性而保持免疫原性成为类毒素，应用类毒素进行免疫预防接种，使机体产生相应的抗毒素可以预防疾病。
4． 酶工程。
【答案】酶工程是指在一定生物反应装置中利用酶的催化性质，将相应原料转化成有用物质的技术，是酶学和工程学相互渗透结合、发展而成的一门新的技术科学，是酶学、微生物学的基本原理与化学工程有机结合而产生的边缘科学技术。包括化学酶工程和生物酶工程。
5． 鞘糖脂（glycosphingolipid ）。
【答案】鞘糖脂是指单糖或寡糖的糖链与神经酰胺上的轻基以糖苷键相连而形成的化合物，主要包括脑苷脂和神经节苷脂。
6． 酶的必需基团。
【答案】酶的必需基团是指与酶活性有关的基团。酶的分子中存在着许多功能基团，
例如
等，但并不是这些基团都与酶活性有关。
7． 转氨基作用。
【答案】转氨基作用是指在转氨酶的催化下，将成新的氨基酸和
酮酸的过程。
第 2 页，共 34 页 氨基酸和酮酸之间的氨基进行移换，形
8．
【答案】（泛紊）又称泛肽，是由76个氨基酸组成的高度保守的小分子蛋白，它广泛存在于各种细胞，故名泛素。泛素在真核细胞中的含量尤为丰富，负责标记待分解的蛋白质，介导其选择性降解。泛素在蛋白定位、细胞周期、凋亡、代谢调节、免疫应答、信号传递、转录调控、应激反应以及
修复等生命活动中发挥重要作用。
二、问答题
9． 毒蛇的毒液中通常含有磷脂酶
之后对红细胞的功能有什么影响？
【答案】磷脂酶的作用位点是磷脂2号位上的酯键，释放出来的是溶血磷脂，对红细胞的影响是能导致红细胞溶血。
10．从一种植物叶中得到了粗细胞提取液，每毫升含蛋白质32mg ，在提取条件下，
的催化反应速率为取50ml 提取液，用硫酸铵盐析分析，将饱和度
测定其反应速度为再溶于10ml 水中，此溶液的蛋白质浓度为50mg/ml, 从中取出
计算：
（1）提取过程中，酶的回收百分率；
（2）酶的提纯倍数。
【答案】酶的提纯常包括两方面的工作，一是把酶制剂从很大体积缩到较小体积；二是把制剂中大量的杂质蛋白和其他大分子分离出去。本题采用的是盐析法。为了判断分离提纯的优劣，一般用两个指标来衡量：一是总活力的回收，二是比活力提高的倍数。
粗提取液：蛋白质浓度=32mg/ml，50ml 提取液含总蛋白质=50X32=1600mg。蛋白质的活力单位数
=，现取
_
则所含蛋白质
则比活力：二活力单位数/
蛋白质14/32U/mg总活力其作用磷脂酰胆碱的产物是什么？释放出来的产物进入血流. 提取液的沉淀物，
提纯液：蛋白质浓度=50mg/ml, 10ml 提纯液内含总蛋白质=50X10=500mg。蛋白质的活力单位数=0.65pmol/min, 现取10叫，
则所含蛋白质则比活力2=活力单位数/蛋白质
=65/50U/mg
所以酶的回收百分率=总活力2/总活力产[（65/50）×500]/[（14/32）×1600]=93%。酶的 提纯倍数=比活力2/比活力产（65/50）/（14/32）=3（倍）。
11．蛋白质合成的自体调控是某一种蛋白质与自身的mRNA 结合而阻止自身的翻译。这实际上是一种翻译水 平上的反馈。试提出其他形式的反馈，同样也能导致某一种蛋白质量的降低。
【答案】蛋白质作为自身基因的阻遏蛋白，与自己的启动子结合，从而阻止自身的转录；蛋白质与自己的mRNA 结合，从而促进自身mRNA 的水解。
第 3 页，共 34 页
12．假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么？为什么
会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？
【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。
（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
13．—个DNA 的相对分子质量为多少时，它的长度可达到16.4nm?
【答案】双链DNA 的质量/长度大约是2X1〇6（Da/nm），当某DNA 的长度为
相对分子质量=
长度司达到
14．简述尿素循环的过程和发生部位。
【答案】尿素循环的过程：
（1）在线粒体中氨甲酰磷酸合成酶将氨和
（2）合成氨甲酰磷酸。氨甲酰磷酸与鸟氨酸形成瓜氨酸和磷酸；
（3）瓜氨酸出线粒体，进入细胞质，与天冬氨酸生成精氨琥珀酸，然后精氨琥珀酸裂解生成精氨酸和延胡索酸，精氨酸被水解生成鸟氨酸和尿素。
总反应为：
第 4 页，共 34 页 大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这时，其时，它的即，当一个DNA 的相对分子质量为
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