2018年安徽医科大学阜阳临床学院(阜阳市人民医院,阜阳)306西医综合之生物化学考研强化五套模拟题
● 摘要
一、名词解释
1． 核小体（nucleosome ）。
【答案】核小体是用于包装染色质的结构单位，是由DNA 链缠绕一个组蛋白核构成的。
2． Edman 降解法（gdmandegradation ）。
【答案】Edman 降解法，又称苯异硫氰酸酯法，是指从肽链的游离的
的序列的过程。末端测定氨基酸残基末端氨基酸被苯异硫氰酸酯（PITC ）修饰，然后从肽链上分离修饰的氨基酸，再用乙酸乙酯抽提后，可用层析等方法鉴定。余下一条缺少一个氨基酸残基的完整的肽链再进行下一轮降解鉴定循环。
3． 等电聚焦电泳。
【答案】等电聚焦电泳（IFE , isoelectric focusing electrophoresis）是指利用一种特殊的缓冲液（两性电解质）
在聚丙烯酰胺凝胶内制造一个pH 梯度的电泳方法，电泳时每种蛋白质迀移到它的等电点（pI ）处，即梯度中的某一pH 时，由于表面静电荷为零而停止泳动。
4． SD 序列（Shine-Dalgamo sequence）。
【答案】SD 序列是指位于原核生物mRNA5' 端的一段富含嘌呤的保守序列，由
成，一般位于起始
密码子上游约7个碱基的位置。
5． 鹏值（iodine number）。
【答案】碘值又称碘价，是100g 脂质样品所吸收的碘的克数，通常用它来表示油脂中脂酸的不饱和程度。
6． 脂多糖（lipopolysaccharide ）。
【答案】脂多糖是革兰氏阴性细菌细胞壁特有的结构成分，种类很多，分子结构一般由外层专一性寡糖链、中心多糖链和脂质三部分组成。
7． 简单扩散。
【答案】简单扩散是指不需要消耗代谢能量，小分子物质利用膜两侧的电化学势梯度而通过
个碱基组
膜的运输方式。
8． 拓扑异构酶（topoisomerase ）。
【答案】拓扑异构酶是指通过切断DNA 的一条或两条链中的磷酸二酯键，然后重新缠绕和封口来改变DNA 连环数的酶。拓扑异构酶I 通过切断DNA 中的一条链减少负超螺旋，增加一个连环数。某些拓扑异构酶II 也称为DNA 促旋酶。
二、问答题
9． 碘乙酸是有效的巯基烷化剂，能抑制糖酵解途径的特定步骤。写出碘乙酸抑制糖酵解的反应，包括酶和辅酶，以及为什么碘乙酸可以抑制该步反应。
【答案】甘油醛-3-
磷酸二磷酸甘油酸催化该反应的酶是甘油醛-3-磷酸脱氢酶，其活性中心的巯基能与底物形成共价中间物，而碘乙酸与该巯基的结合将阻止这一共价中间物的形成，使甘油醛-3-磷酸不能被氧化，结果导致糖酵解途径被抑制。
10．目的DNA 片段的获得主要有哪几种方法？
【答案】获得DNA 片段的主要方法有：（1）化学法直接合成基因；（2）从基因组文库中获取目的基因；（3） 从cDNA 文库中获取目的基因；（4）通过PCR 直接扩增出目的基因。
11．一个双螺旋DNA 分子中有一条链的A%=24%, C%=30%。
（1）说明这一条链上的（T+G）的摩尔分数；
（2）互补链上的A , C ，（A+C）的摩尔分数。
【答案】（1）已知A%=24%。C%=30%
所以这条链上（T+G）%=1-（A%+C%）=46%
（2）根据Chargaff 规则，A%=T%，C%=G%
所以互补链上T%=24%，G%=30%，（A+C）%=46%
12．简述Cech 及Altman 是如何发现具有催化活性的RNA 的。
【答案】1982年，美国的T.Cech 发现原生动物四膜虫的26SrRNA 前体能够在完全没有蛋白质的情况下，自我加工、拼接，得到成熟的rRNA 。
1983年，SAtman 和Pace 实验室研宄RNaseP 时发现，将RNaseP 的蛋白质与RNA 分离，分别测定，发现蛋白质部分没有催化活性，而RNA 部分具有与全酶相同的催化活性。
1986年，T.Cech 发现在一定条件下，L19RNA 可以催化PolyC 的切割与连接。
13．凝胶过滤和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳这两种分离蛋白质的方法均建筑在分子大小的基础上，而且两种方法均采用交联的多聚物作为支持介质，为什么在凝胶过滤时，相对分子质量小的蛋白质有较长的保留时间，而在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，它又“跑”得最快？
【答案】凝胶过滤常用的是葡聚糖凝胶（Sephadex ），这凝胶颗粒的交联介质排阻相对分子
质量较大的蛋白质，仅允许相对分子质量较小的蛋白质进入颗粒内部，所以相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶颗粒之间的空隙中通过。这意味着它通过柱的体积为床体积减去凝胶颗粒本身所占的体积。而相对分子质量小的蛋白质必须通过所有的床体积才能流出，所以，相对分子质量小的蛋白质比相对分子质量大的蛋白质有较长的保留时间。而SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，其凝胶介质并不存在像Sephadex 那样的颗粒之间的空隙。所以，所有的蛋白质分子必须全部通过这交链介质而移动。蛋白质的相对分子质量越小，通过这介质就越快，移动得越迅速。
14．用处理Simian 病毒的DNA , 只产生一种双链DNA 片段，有关这种DNA 结构可以得出什么推论。 【答案】是一种DNA 限制性内切核酸酶，因为用这种酶酶切只产生一种双链DNA 片段，所以肯定只有一个酶切位点，这种DNA —定是环状结构。
15．（1）从上如何区分竞争性抑制与非竞争性抑制？
（2）为什么竞争性抑制不改变
（3）为什么非竞争性抑制不改变
的值会增加，在非竞争性抑制的情况下的大小的（4）从分子机制上说明竞争性与非竞争性抑制？ 【答案】（1
）在竞争性抑制的情况下
不会改变。
（2）竞争性抑制只是阻碍了底物的结合并不影响催化。
（3）非竞争性抑制并不影响酶与底物的结合。
（4）竞争性抑制剂与酶的活性部位结合，从而阻止了底物与酶的结合。非竞争性抑制剂与非活性部位结合导致酶的构象发生变化，导致活性部位与底物的结合能力与转化底物的能力下降。
16．有一种酶E 作用底物S 产生产物P 。化合物C 是这一种酶的别构激活剂。使用定点突变技术将酶E 的Val57突变成其他集中氨基酸残基。将野生型和突变体纯化以后，分别在有C 和无C 的条件下测定酶活性，活性分析的结果见表:
表
（1）根据突变体的数据，你认为Val57位于别构中心还是活性中心？
（2）根据氨基酸的性质，解释突变如何影响到酶E 的活性？
【答案】（1）突变对酶的基础活性（无C 时）没有影响，说明Val57不是酶活性中心的一部分或者与别构中心有关。相反，在有C 时，Val57的突变对酶活性影响很大，这说明Val57的取代影响激活剂C 与别构中心的结合，进而影响到活性中心的构象和活性。