题目：苯代谢物对K562细胞红系分化的影响

苯是职业和家居环境中的重要污染物，目前已被国际癌症研究机构（IARC）确认为人类致癌物。人体暴露于苯污染环境下可导致血液系统的改变，苯血液毒性主要表现为骨髓造血功能障碍引起的外周血细胞下降乃至再生障碍性贫血和白血病发生。红白血病细胞系K562细胞在一些诱导剂作用下可向红细胞系和巨核细胞系方向分化，具有造血祖细胞的特点，是目前血液学研究领域中研究造血细胞增殖分化机制的常用模型。红系方面的变化是苯血液毒性主要表现之一，而苯血液毒性并不在于苯本身，而在于其在体内产生的各种代谢产物。本实验就是研究几种苯代谢产物包括1,2,4-苯三醇（BT）、苯酚（PH）、氢醌（HQ）和儿茶酚（CAT）等对K562细胞红系分化的影响，探讨苯红系血液毒性的细胞分子机制。 取对数生长期的K562细胞以一定的密度接种培养24h后，加入一定浓度的BT（0~40 μM）、PH (0~800 μM)、HQ（0~40 μM）和 CAT（0~80 μM）做浓度梯度、时间梯度处理。之后从以下三个方面来探讨苯代谢物对K562细胞红系分化的影响：采用联苯胺染色方法检测K562细胞血红蛋白水平；采用流式细胞术检测K562细胞血型糖蛋白A (GPA)和转铁蛋白受体(CD71)表达水平；采用反转录PCR方法检测K562细胞红系分化的相关基因α-globin、γ-globin、GPA和CD71的mRNA表达水平。 苯代谢物BT、PH和HQ在无或低毒细胞性浓度范围内对Hemin诱导的K562细胞红系分化率有较明显的浓度和时间依赖关系，而CAT对Hemin诱导K562细胞的血红蛋白合成有促进作用。BT、PH、HQ和CAT在对红系分子标志GPA和CD71具有明显的抑制作用，同样这种抑制作用有很强的浓度和时间依赖关系。然而，与未加苯代谢物处理的K562细胞相比，K562细胞经四种苯代谢物对处理24h、48h和72h后，红系分化的相关基因α-globin、γ-globin、GPA和CD71的mRNA的表达水平并没有明显的变化。 初步研究发现苯代谢物BT、PH和HQ对Hemin诱导的具有造血祖细胞特性的K562有红系分化抑制作用；而CAT对血红蛋白合成有促进作用，但对GPA和CD71在细胞表面的表达有抑制作用。这些结果提示，苯代谢物对细胞红系分化的抑制可能是苯红系血液毒性的重要方面。