题目：苦皮藤再生体系的建立及超声生物学效应的研究

苦皮藤（Celastrus anyulatus Maxim）属卫矛科（ Celastraceaes）南蛇藤属（Celastrus.L）多年生落叶藤状灌木，是我国特有的最具潜力的杀虫植物之一, 是生产无公害农药的宝贵资源。目前已经从其根皮、种子中分离出20多种天然化合物，这些物质均具杀虫活性，近年研究表明该类化合物还具有抗肿瘤和杀菌效果。因此，开展对苦皮藤的研究工作具有重要意义。 植物组织培养在生物技术领域中占有不可替代的地位。对苦皮藤进行组织培养并建立其再生体系具有一定的理论意义和应用价值。主要结果如下： 1. 建立了苦皮藤再生体系：MS+2,4-D 2mg/L培养基适合愈伤组织诱导；MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.2mg/L培养基适合芽的分化；MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.2mg/L培养基适合芽的增殖；多效唑、暗培养对根的分化是必需的,将芽转至MS+MET 0.7mg/L+IBA 0.5mg/L培养基暗培养10d 后，转入1/2MS培养基光下培养可形成根。 2. 观察了组织培养条件下出现的苦皮藤白化苗及黄化苗的超微结构：白化苗、黄化苗的细胞器与正常苗叶片具有明显差异。多数黄化苗细胞中叶绿体数量较少，叶绿体内含淀粉粒较少，基粒和基质片层的形态变化较大；白化苗叶绿体多呈解体状态，部分细胞线粒体解体，少数细胞核解体。 3. 研究了苦皮藤组培苗不定根的形成过程：　不定根的根原基发生于维管形成层及其附近的薄壁细胞。苦皮藤茎中未发现有潜伏根原基存在，属诱发根原基类型。不定根的木质部及韧皮部与母体的木质部及韧皮部互相联结形成了连续的维管系统。 环境应力对植物影响已成为生物力学研究领域的一个热点。超声作为一种环境应力，对植物的生长发育有重要影响。但有关超声刺激对植物组培苗影响还少有报道。本文初步研究了超声对苦皮藤组培苗的生物学效应。主要结果如下： 1. 不同频率和强度的超声刺激对苦皮藤组培苗的生长有一定影响：27KHz（250W）超声刺激3min，5min，7min可以促进苦皮藤不定芽的萌发；而1.1MHz（500W）超声刺激对苦皮藤组培苗生长有抑制作用。 2. 27KHz（250W）超声刺激影响苦皮藤组培苗的超微结构：扫描电镜下，超声处理1 min～5min，气孔开张程度与时间呈正相关；处理7 min～11min，气孔开张程度下降，但比对照组高。透射电镜下：短时间的超声处理，细胞膜、细胞核、叶绿体等细胞器有轻微损伤，随着处理时间的延长，细胞质与核内出现空区，质膜有剥离现象，说明超声对细胞的损伤随着处理时间的延长而增大。 3.超声刺激增强了植物体内保护酶活性： 27KHz超声波刺激苦皮藤组培苗5min和7min，处理后继续培养，并分别于 0d，3d，6d，9d，12d，15d，18d，21d测定其超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）的活性。结果表明，超声处理不同程度地增强了这些保护酶的活性。