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2018年华南理工大学医学院878生物化学与分子生物学之现代分子生物学考研仿真模拟五套题

  摘要

一、名词解释

1. 顺式作用元件

【答案】顺式作用元件是指与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别并结合的特异DNA 序列,包括启动子、上游启动子元件、增强子、沉默子等。

2. 蛋白质印迹法(Western blotting)

【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜(如硝酸纤维素膜、尼龙膜等)上,再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等,检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体,由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。

3. Attenuator

【答案】弱化子。弱化子是指当操纵子被阻遏时,RNA 合成终止,起终止转录信号作用的核苷酸序列。弱化子 对于基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA 的结构而发挥作用的,其调节作用的是某种对应氨酰-tRNA 的浓度,典型例子是细菌中的色氨酸操纵子。

4. Molecular Bescons

【答案】分子信标。分子信标是指一种具有自身配对区的DNA 寡核苷酸分子探针,利用荧光标记探针的碱基配对原理,通过观察探针荧光显示或淬灭的现象,确定目的基因的分子标记。

二、填空题

5. DNA 序列分析常用的方法有_____和_____。

【答案】Sanger 双脱氧链终止法;化学修饰法

【解析】测定DNA 的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链 终止法、化学降解法、自动测序,DNA 测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用Sanger 双脱氧链终止法、 Maxam-Giibert 化学修饰法、DNA 杂交测序法等。

6. 真核生物RNA 聚合酶I 、II 和III 分别负责_____和_____基因的转录。

【答案】rRNA ; hnRNA ; tRNA

【解析】真核生物中存在3类RNA 聚合酶,其催化的转录产物及对α-鹅膏覃碱的敏感性见表。

表 真核生物的RNA 聚合酶

7. SDS-PAGE 中,凝胶的单体为_____,_____是交联剂。蛋白质结合SDS 后均带_____电荷,肽链越长迁移速度越_____。

【答案】丙烯酰胺;甲叉双丙烯酰胺;负;慢

8. 转座作用可能引起的突变类型包括a_____、b_____、c_____。

【答案】重复:缺失:倒位。

【解析】转座子插入后往往会造成插入位置上出现受体DNA 的少数核奋酸对的重复; 当复制性转座发生在宿主DNA 原有位点附近时,往往导致转座子两个拷贝之间的同源重组,引起DNA 缺失或倒位。

三、简答题

9. 请分析人类基因组计划的发展趋势。

【答案】随着人类基因组计划的完成,人类基因组中储藏的有关人类生存和繁衍的全部遗传信息将被破译,它将帮助人类了解各种生理过程的内在机制,揭开癌症等严重危害人类健康的疾病的生理及分子机制,并最终为疾病的预防及治疗提供理论基础。

如今,随着计算机分析处理能力的提高以及序列分析流程的不断改进和优化,“后基因组时代”已经到来, 基因组研究由静态的序列测定进入了动态的基因组功能鉴定的新阶段,从单一的基因或蛋白质的研究转向全面分析基因组功能的系统研究。越来越多物种的基因组DNA 被测定,基因组功能被解析,在基因组学、蛋白组学和 代谢组学为核心的各类“组学”研究基础上开展的系统生物学研究是现在研究的前沿方,有助于解决诸如粮食短 缺、环境污染、能源资源匮乏、生态平衡失调、生物物种消亡等一系列世界难题。

10.什么是应急调控?何时会有这种现象发生?应急调控过程中的两个重要信号分子是什么?应急调控会调控哪些生化过程,上调还是下调?

【答案】(1)应急调控是指细菌处于贫瘠的生长环境,缺乏氨基酸供给,以进行蛋白质合成,它们即关闭大量代谢过程的紧急应答反应。这是细菌抵御不良条件,保存自己的一种机制,即细菌为节省其贮藏物将代谢活性降至最低,借以度过艰难时期,等待培养条件的改善。

(2)应急调控过程中有两种重要的信号分子:ppGpp 和pppGpp 。这两种效应分子能与其目标蛋白结合,改变其活性,进而抑制转录,使rRNA 和tRNA 的合成下降。同时蛋白质的降解加速糖、脂类及核苷酸的合成以下降。

11.什么是出核信号序列?其序列组成有哪些特点?主要功能是什么?

【答案】⑴出核信号序列(NES )是指进出细胞核的蛋白质上能被相应的核转运蛋白所识别,指导该蛋白质出 核的氨基酸序列。

(2)序列组成特点

经典的NES 序列是由疏水性氨基酸尤其是亮氨酸和异亮氨酸富集的区域构成,其保守性氨基酸排序为其中,代表疏水性氨基酸L 、I 、F 或M , 而X 代表任意氨基酸。

(3)NES 主要功能是被出核因子识别并结合,从而携带自身蛋白出核。

12.简述RNA 转录的概念及其基本过程。

【答案】转录是指以DNA 的一条链为模板,在RNA 聚合酶的作用下,依据碱基配对原则,合成一条与DNA 模板链的一定区段互补的RNA 链的过程,即遗传信息、由DNA 流向RNA 的过程。

无论是原核细胞还是真核细胞,转录的基本过程都包括以下几个步骤:

(1)模板识别

模板识别是指RNA 聚合酶与启动子DNA 双链相互作用并与之相结合的过程。

(2)转录起始

①RNA 聚合酶全酶与启动子可逆性结合形成封闭复合物,此时的DNA 链仍处于双链状态; ②封闭复合物转变成开放复合物,聚合酶全酶结合的DNA 序列中有一小段双链被解开; ③开放复合物与最初的两个NTP 相结合并在这两个核苷酸之间形成磷酸二酯键后转变成包括RNA 聚合酶、DNA 和新生RNA 的三元复合物。

(3)转录延伸

转录延伸阶段是RNA 聚合酶离开启动子,即6因子从全酶上脱离后,余下的核心酶沿模板DNA 链移动,并按照碱基互补原则,不断聚合RNA 的过程。

(4)转录终止

转录终止是指RN Α-DNA 杂合物分离,转录泡瓦解,DNA 恢复成双链状态,RNA 聚合酶和RNA 链都被从模板上释放出来的过程。即包括停止延伸及释放RNA 聚合酶和合成RNA 。

四、论述题

13.列举已知非编码区(不编码蛋白质)的保守序列种类,尽可能说明它们的种类和在细胞中的基本功能。

【答案】非编码区的保守序列主要包括启动子、增强子、转座子、重复序列、假基因和小RNA , 它们在编码基 因的转录、翻译表达全过程中的各个环节起着重要的作用:

(1) 启动子(promoter ):在端转录起始点上游的DNA 序列a 在. 的区域有TATA 框(TATAbox )。TATA 框是一个短的核苷酸序列,其碱基顺序为TA TAA TAAT , 它是RNA 聚合酶的重要的接触点,能够使酶准确 地识别转录的起始点并开始转录。当TA TA 框中的碱基顺序有所