2018年湖北省培养单位武汉植物园610分子生物学之现代分子生物学考研核心题库
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一、名词解释
1.
【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件,它位于特定的mRNA 区域,可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物,继而发生构象重排,影响mRNA 活性。
2. Blue-white screening
【答案】蓝白斑筛选。蓝白斑筛选是指基于半乳糖苷酶系统的一种重组子筛选方法。其基本原理是很多载体都
携带一段来自大肠杆菌的
序列的宿主细胞。宿主经上述质粒转化后,
整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补
活性蛋白质。由
互补而产生的操纵子DNA 区段,
其中有半乳糖苷酶基因的调控序列和前146个氨基酸的编码信息,这种载体适用于可编码半乳糖苷酶C 端部分 基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完,产生完整 细菌在诱导剂的作用下,在生色底物存在时产生易于识别的蓝色菌落。而当外源DNA 插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
3. tmRNA
【答案】转移—信使RNA 。tmRNA 是指细菌体内一种修复翻译水平上受阻的遗传信息表达过程的反式翻译机制的核心分子,它兼具tRNA 和mRNA 的特点,在SmpB 蛋白的帮助下特异性识别携带mRNA 缺失体的核糖体,在核糖体蛋白S1的传递作用下结合在A 位点上,一方面延续被中断的mRNA 上的遗传信息,一方面终止蛋白质的合成,释放被束缚的核糖体和tRNA 进入新的翻译过程。
4. 简并性(degeneracy )
【答案】简并性是指由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象,对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子 (synonymouscodon ) 。
5. 反式作用因子
【答案】反式作用因子是指通过直接结合或间接作用于DNA 、RNA 等核酸分子,对基因表达发挥不同调节作用 (激活或抑制:)的各类蛋内质因子的总称,也称反式作用元件。
6. 重组修复
【答案】重组修复是指遗传信息有缺损的子代DNA 分子从同源DNA 的母链上将相应的核苷酸序列移至缺口处,再合成新的序列来填补母链的空缺的修复过程,因为发生在DNA 复制之后,又称复制后修复。
7. 蛋白质印迹法(Western blotting)
【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜(如硝酸纤维素膜、尼龙膜等)上,再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等,检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体,由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。
8. 内含子(intron )与外显子(exon )
【答案】内含子(intron )是指真核基因中的非编码序列,又称插入序列(IVS ),只转录,在前体mRNA 加工时被剪切掉;
外显子(exon )是指真核基因中的编码序列,是一个基因表达为多肤链的部分。
9. TATA 框
【答案】TA TA 框是指位于基因转录起始点上游-30p~-25bp(真核)或-10bp (原核)的一段保守性较高的序列,控制转录起始的准确性和频率,因共有序列为TATAAAA 而得名。
10.基因超家族
【答案】基因超家族是指一组由于序列的同源性通过序列比对可以彼此匹配而相关的基因。判定同源的主要标准是核苷酸残基的保守性,并参考功能的相似性。
二、填空题
11.原核生物同源重组时,RecBCD 蛋白具有_____、_____、_____的活性。
【答案】核酸外切酶; 解旋酶; A TP 酶的活性。
RecB 、RecC 和RecD 三者构成在原核生物同源重组中的功能单位RecBCD 蛋白复合【解析】
物,它是一个多功能的酶系,具有依赖于ATP 的单链和双链DNA 外切酶的性质,因此又称为外切核酸酶V 能利用水解A TP 释放的能量使线型DNA 解旋,此外还呈现序列特异性的DNA 单链内切酶活性。
12.大肠杆菌表达质粒除质粒复制起点外,通常还包括下列组成部分:a._____ 、b._____ 、c._____ 、d. _____和e._____ 。
【答案】具有抗菌素抗性基因;多克隆位点;启动子;前导序列;加尾信号
【解析】一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足如下几个方面的条件:(1)具有复制起点;(2)具有抗菌 素抗性基因;(3)具若干限制酶单一识别位点;(4)具有较小的相对分子质量;(5)较高的拷贝数;(6)还应具 备与宿主细胞相适应的启动子、前导顺序、増强子、加尾信号
等DNA 调控元件。
13.第一个被解析出晶体结构的蛋白是_____。
【答案】胰岛素
14.常见的转录活化域的特征性结构包括:带负电荷的螺旋结构,富含_____的结构和富含_____的结构。
【答案】谷氨酰胺;脯氨酸
【解析】转录激活域是由30〜100个氨基酸残基组成的。根据氨基酸组成特点,转录激活域又有酸性激活域、 谷氨酰胺富含区域及脯氨酸富含区域。
15.表皮生长因子受体具有_____酶的活性。
【答案】酪氨酸激酶
【解析】表皮生长因子受体(EGFR )是一个170kDa 的跨膜糖蛋白受体,本身具有酪氨酸激酶活性,由表 皮生长因子激活,影响细胞的生长和分化。
酸激酶活力。EGFR 羧基末端的酪氨酸残基
和对EGFR 的结合激活酪氨是EGF 结合后发生自动磷
对酸化的主要位点,一旦被激活,EGFR 的1068位和1173位磷酸化的酪氨酸残基就能介导
EGFR 的结合。此外,1173位磷酸化的酪氨酸残基是SHC 在EGFR 上的主要结合位点。EGFR 广泛分布在许多正常和恶性上皮细胞中,其过度表达和自我激活可能与 许多肿瘤的发生发展有关。目前主要用于各种上皮源性恶性肿瘤--头颈部鳞癌、肺癌、乳腺癌和膀胱癌等的研究。
16.转座作用可能引起的突变类型包括a_____、b_____、c_____。
【答案】重复:缺失:倒位。
【解析】转座子插入后往往会造成插入位置上出现受体DNA 的少数核奋酸对的重复; 当复制性转座发生在宿主DNA 原有位点附近时,往往导致转座子两个拷贝之间的同源重组,引起DNA 缺失或倒位。
三、简答题
17.遗传密码是怎样被破译的?
【答案】(1) 1954年,物理学家George Gamov根据DNA 中基于存在四种核苷酸和蛋白质中存在20种氨基酸 的对应关系,通过数学推理,得出三个核苷酸编码一个氨基酸。
(2)1961年,Brenner 和Grick 根据DNA 链与蛋白质链的共线性,首先肯定了三个核苷酸的推理。
(3)Brenner 和Grick 随后用各种人工合成模板在体外翻译蛋白质的方法确定遗传密码子;用核糖体结合技 术测定密码子中的核苷酸排列顺序,历经4年时间,破解了编码20种天然氨基酸的密码子,并编成遗传密码的翻译字典。