● 摘要
摘要:本文以食品新资源开发、食品功能成分分离、理化特性研究及功能表征为目的,以莎能奶山羊初乳为原料,利用等离子发射光谱、氨基酸自动分析仪、气相色谱、琼脂糖免疫扩散、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、动物试验等分析、分离、功能表征技术对莎能奶山羊初乳中的矿物质、氨基酸、脂肪、蛋白质等营养成分的种类、含量、组成及营养价值进行了分析和评价;对莎能奶山羊初乳中的功能成分---免疫球蛋白(IgG)的含量、提取工艺、分离纯化、稳定性、抑菌特性、生物功能等方面进行了研究。其主要成果表现在:
一、对莎能奶山羊初乳的基本营养成分包括蛋白质含量、氨基酸组成、脂肪及20种矿物元素的含量进行了分析测定。结果表明,莎能奶山羊初乳具有丰富的营养价值,分娩3h后所挤初乳中以下各成分(乳糖除外)的含量最高,其中总干物质21.32%,灰分1.57%,蛋白质10.24%,免疫球蛋白72.01 mg/mL,脂肪7.73%,但这些指标均随泌乳期延长呈下降趋势;莎能奶山羊初乳蛋白质中免疫球蛋白(IgG)的平均含量为蛋白质含量的27%,17种氨基酸的总含量为5796.6 mg/100mL,平均含量为340 mg/100mL,7种必需氨基酸的总含量为2358.6 mg/100mL,平均含量为336.94mg/100mL,占氨基酸总量的40.69%;莎能奶山羊初乳中饱和脂肪酸的含量较高,占脂肪酸总含量的75.21%,其中低级脂肪酸(C80、C100)含量占饱和脂肪酸含量的19.84%;莎能奶山羊初乳中含有丰富且较均衡的矿物元素,其中Ca、Mg、P、Zn、Fe等元素的含量很高,Cu、Fe、Mn、Mo、Ni、Zn 、Se、Sn、Cr、Al、Li、Co等元素也有一定的含量,Cd、As、Pb、Hg等有害有毒元素的含量较低。
二、按照FAO/WHO的蛋白标准模式对莎能奶山羊初乳中所含蛋白质的营养价值进行了评价。结果显示其蛋白组分为优质、理想的食用蛋白,其氨基酸指数和FAO/WHO标准模式相当。
三、首次对莎能奶山羊初乳的理化性质尤其是热稳定性进行了研究。结果表明,莎能奶山羊初乳的相对密度、折光度、酸度、干物质均高于常乳,而pH低于常乳,但都随泌乳期的延长向常乳水平接近;莎能奶山羊初乳热稳定性较差,随泌乳期延长而增加,较高温度即可发生凝固,与pH值呈正相关,pH值增大,初乳的热凝固时间亦增大。但pH 6.5~6.8条件下,蔗糖浓度为45%~60%、尿素浓度为0.50%~1.0%、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)浓度为0.0004mol/L时,可使其热稳定性明显改善。
四、首次对莎能奶山羊初乳免疫球蛋白(IgG)的提取、分离技术进行了研究。结果显示,采用离心脱脂、蛋白质等电点沉降分离、饱和(NH4)2SO4盐析、透析、DEAE-Sepharose F.F.离子交换色谱等技术和方法,分离得到的免疫球蛋白(IgG)其含量为86.78%,纯度较高。经琼脂糖双向免疫扩散法和SDS-PAGE不连续凝胶电泳分析,表明分离纯化得到较纯的免疫球蛋白IgG。
五、首次对莎能奶山羊初乳免疫球蛋白(IgG)的稳定性进行了详细的研究。结果显示,加热对莎能奶山羊初乳免疫球蛋白(IgG)稳定性影响较大,75℃加热7min、85℃加热2.0min,其变性率均达到100%。在同一加热条件下,随着加热时间的延长,变性率增大;莎能奶山羊初乳免疫球蛋白(IgG)在55℃、65℃、75℃、85℃时,D值分别为147.05min、135.13min、6.96min、1.88min,在此温度范围内,Z值为14.40℃;莎能奶山羊初乳免疫球蛋白(IgG)在pH 5.0—10.0范围内十分稳定;在pH低于5.0时,随着pH值降低,变性率迅速上升;在75℃、pH2.0条件下,糖对IgG有保护作用,且糖浓度越大,对IgG的保护效果越好。其中蔗糖、果糖、麦芽糖对IgG的保护效果较好,葡萄糖、乳糖的效果相对较差;正交试验表明,胃蛋白酶对IgG变性率的影响的主次顺序是:pH值影响最大,其次是作用时间,胃蛋白酶的加入量对其影响较小,最优工艺条件为pH4.0,胃蛋白酶加入量0.5mg/ml,作用时间1h;胰蛋白酶对IgG活性的影响相对较小。
六、 首次对莎能奶山羊初乳免疫球蛋白(IgG)的抑菌特性进行了研究。结果显示,莎能奶山羊初乳免疫球蛋白(IgG)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌具有显著的抑菌作用,对绿脓杆菌有一定的抑菌作用,对枯草芽孢杆菌未表现出抑菌活性。
七、 通过动物试验,验证了莎能奶山羊初乳免疫球蛋白(IgG)的生物学功能。结果显示,莎能奶山羊初乳免疫球蛋白(IgG)对小鼠的体重增长及脏器/体重比值的影响作用不明显,但对于提高受试小鼠血中、肝脏组织和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSP-PX)、过氧化氢酶(CAT)的活性,降低因脂质氧化而产生的丙二醛(MDA)含量具有明显的作用。
关键词:莎能奶山羊 初乳 理化性质 免疫球蛋白(IgG)
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