● 摘要
本课题主要以茯苓、莲子为原料,提取温度90℃、提取时间3h、料液比1:20得到粗多糖。纯化后茯苓多糖为PCM,莲子多糖分为三种组分SN1、SN2、SN3。利用超声波辐射处理多糖样品,将其结构与未经超声处理的结构进行比较,研究了单糖组分、单糖比例及其结构的影响规律,从而揭示超声波辐射降解多糖的机理,为研究超声降解对多糖的结构,生物活性的影响提供实验数据和理论依据,为超声降解植物多糖的工业化提供实验依据。论文的主要研究内容及相应的实验结果归纳如下:
(1)热水浸提莲子、茯苓多糖
用热水浸提,乙醇沉淀,Sevag法除蛋白得到水溶性莲子粗多糖.经十六烷基三甲基溴化胺沉淀,硼酸反应以及SephadexG-150层析纯化,得到三种莲子多糖SN1、SN2、SN3.同样的方法获得茯苓多糖样品。多糖蛋白含量测定结果为:SN1的蛋白含量27.2%、SN2的蛋白含量36.4%,SN3的蛋白含量22.0%和PCM的蛋白含量6.1%。测粗多糖抗氧化性得出,莲子粗多糖对羟自由基和超氧阴离子自由基具有一定的清除作用,清除能力随多糖浓度的增大而增大,还原力和清除DPPH 自由基能力很弱。
(2)莲子多糖结构表征
气相色谱,红外光谱,紫外光谱分析其化学结构.结果表明SN1主要由葡萄糖、半乳糖组成,含α-D-吡喃葡萄糖环;SN2主链为葡聚糖,并含有其他4种单糖;SN3含7种单糖,并推测是一种酸性氨基多糖或蛋白多糖.高碘酸氧化和Smith降解结果表明SN1和SN2糖链中含有1→3、1→2或1→4及1→(末端).原子力显微镜观测多糖SN1成螺旋状分布,莲子多糖SN2呈聚集体分布。
(3)超声波辐射前后葡聚糖的形貌特征
在400W的功率下对葡聚糖进行处理,处理后的样品利用原子力显微镜,对其超声前后的表面形貌进行观测,结果表明超声波的辐射作用降解了多糖分子链,使得多糖的分支结构减小。
(4)超声波辐射处理莲子、茯苓多糖结构表征
为了研究超声降解对多糖分子结构的影响,采用单频率超声处理两种结构不同的多糖介质,气相色谱、红外光谱和圆二色谱测定降解前后样品的结构变化。实验发现超声之后多糖特征属性没有改变,醚键C—O—C和—OH的变角振动,α-和β-吡喃构型发生变化;单糖组成及含量均有变化。红外光谱图和气相色谱图一致表明超声波对多糖的机械断键作用并没有破坏多糖的单糖糖环以及重复单元的结构。超声不能改变多糖样品的cotton效应,茯苓多糖超声后的圆二色谱发生蓝移。此外,本文还对超声波的降解机理作了一定的研究和探讨。
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