2018年首都医科大学康复医学院306西医综合之生物化学考研核心题库
● 摘要
一、名词解释
1． RNA interference （RNA 干扰）。
【答案】RNAinterferenceCRNA 干扰）即RNAi ，是指与靶基因同源的双链RNA 诱导的特异性转录后基因表达 沉默的现象，其作用机制是双链RNA 降解产生的小干扰RNA （siRNA ）与同源的靶mRNA 互补结合，导致mRNA 降解而抑制基因表达。RNAi 技术广泛用于基因功能研宄和重大疾病的基因治疗。
2． 脂肪动员（fatty mobilization）
【答案】脂肪动员是指脂库中的储存脂肪，在脂肪酶的作用下，逐步水解为脂酸和甘油，以供其他组织利用的过程。
3． 后随链（lagging strand）。
【答案】后随链是指DNA 半不连续复制过程中，延伸方向与复制叉前进方向相反、由合成的一系列短的DNA 片段（冈崎片段）连接而成的新生链。
4． 抗维生素
【答案】抗维生素是指结构类似于维生素的结构，它们在体内与维生素竞争，而使维生素不能发挥作用的某些化合物。在研宄维生素缺乏病的过程中经常使用某些抗维生素来造成动物的维生素缺乏病。
5．
【答案】（肝葡萄糖激酶）。 （肝葡萄糖激酶）是指定位于肝脏中的催化葡萄糖接受末端磷酸、生成6-磷酸葡萄糖的一类己糖激酶同功酶。该酶专一性作用于葡萄糖，基本不以其他己糖为底物；该酶对葡萄糖的亲和力低于肝外组织的己糖激酶，但不受6-磷酸葡萄糖的反馈抑制。其生理意义在于分解进食后的葡萄糖，以维持血糖稳定。
6． 低密度脂蛋白 受体
【答案】低密度脂蛋白受体是指能识别并结合受体。
7． 尿素-梓檬酸双循环（krebsbicycle ）。
【答案】尿素-柠檬酸双循环是尿素循环和柠檬酸循环密切联系在一起的循环途径。在尿素循
第 2 页，共 31 页 把内吞入细胞，获得其中的胆固醇的
环中生成的延胡索酸，使尿素循环和柠檬酸循环密切联系在一起。精氨玻珀酸裂解生成的延胡索酸可转变为苹果酸，苹果酸进一步氧化生成草酰乙酸，草酰乙酸既可进入柠檬酸循环，也可经转氨作用再次形成天冬氨酸进入尿素循环。
8． 疏水作用（hydrophobic interaction）。
【答案】疏水作用是疏水基团或疏水侧链出自避开水的需要而被迫接近，并非疏水基团之间有什么吸引力。疏水作用使水介质中球状蛋白质折叠总是倾向把疏水残基埋藏在分子的内部，它对稳定蛋白质三维结构有突出重要的作用。
二、问答题
9． 试用激素分泌的反馈机制解释缺碘是怎样导致患者得地方性甲状腺肿大的？
【答案】甲状腺素对下丘脑分泌TRF 和脑垂体前叶分泌TSH 均有反馈抑制作用，碘的缺乏导致甲状腺素不能正常地合成，TRF 和TSH 失去反馈控制，因而两者的浓度必然提高，特别是TSH , 直接作用于甲状腺，促进甲状腺细胞的分裂，最终导致甲状腺的肥大。
10．预测下列突变对胆固醇代谢和脂代谢会带来什么影响。
（1）肉碱-软脂酰转移酶I 对丙二酸单酰CoA 不再敏感。
（2）将HMG-CoA 还原酶上磷酸化的位点（一个特殊的Ser 残基）替换成Ala 。
（3）过量表达固醇调节元件结合蛋白（SREBP ）上的碱性螺旋-环-螺旋
结构域（无跨膜螺旋）。
（4）肝细胞组成型表达LDL 受体。
（5）使柠檬酸不能与乙酰CoA 羧化酶结合。
【答案】（1）肉碱软脂酰转移酶Ⅰ控制脂肪酸进入线粒体，其活性受到丙二酸单酰CoA 的抑制，这种突变将使得长链脂肪酸的β-氧化不再受到调控，将在任何条件下都能进行。
（2）AMPK 活性直接受细胞能量状态的控制，高水平的AMP 可直接激活AMPK 。AMPK 的底物包括HMG-CoA 还原酶。在AMPK 的催化下，HMG-CoA 还原酶磷酸化而丧失活性。如果它的磷酸化位点变成Ala ，则不能再被磷酸化修饰，于是，胆固醇的合成即使在能量极端贫乏的条件下仍然能够进行。
（3）此结构域激活参与胆固醇合成的酶的基因表达，然而正常的情况下它受到跨膜螺旋的限制而定位在膜上，只有在胆固醇水平较低的情况下，才会与跨膜螺旋分离，进入细胞核，激活特定的基因表达。如果过量表达无跨膜螺旋限制的bHLH , 将会导致上述参与胆固醇合成的酶基因的持续表达。
（4）这将使肝细胞在各种条件下吸收存在于LDL 和IDL 中的胆固醇，有利于降低血液中的胆固醇，但也可能导致肝外组织得不到需要的胆固醇。
（5）柠檬酸激活受AMPK 磷酸化的乙酰CoA 羧化酶。如果乙酰CoA 羧化酶不能与柠檬酸结合，则磷酸化的乙酰CoA 羧化酶对于过量的柠檬酸不再有反应。然而，在某些激素的作用下，
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它可以发生去磷酸化，于是，脂肪酸仍然能够合成（至少在某些条件下）。
11．简述核酸分离纯化的原则和大致步骤。
【答案】（1）核酸分离纯化最重要的原则有两个：①保持核酸分子一级结构的完整性；②防止核酸分子的生物降解。
（2）核酸分离的大致步骤是：①破碎细胞；②有机溶剂（如苯酚、酚氯仿、异戊醇以及SDS ）变性蛋白，反复抽提，获得核酸制品；③密度梯度离心进一步分离不同构象的核酸；④柱层析分离变性核酸与天然核酸。
此外，还有一些特殊方法用于提纯特定的核酸。例如，
纯化，用纯的RNase 处理除去DNA 中混杂的少量RNA 。
12．何为糖酵解？糖异生与糖酵解代谢途径有哪些差异？
【答案】糖酵解途径将葡萄糖降解为丙酮酸，糖异生途径则将丙酮酸转化成葡萄糖，但这两条代谢途径并非简单的逆转，因为糖酵解中由己糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶催化的3个反应是不可逆的，糖异生中必须利用另外4种酶来绕行这3个能量障碍：以丙酮酸羧化酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶反应绕行丙酮酸。
激酶反应，以果糖二磷酸酶反应绕行磷酸果糖激酶反应，以葡萄糖-6-磷酸酶反应绕行己糖激酶反应。另外，这两条途径的酶系分布也有所不同：糖酵解全部在胞液中进行，糖异生则发生在胞液和线粒体。
13．假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么？为什么
会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？
【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。
第 4 页，共 31 页 可以用亲和层析和免疫法分离大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这