2018年河北省培养单位遗传与发育生物学研究所610分子生物学之现代分子生物学考研基础五套测试题
● 摘要
一、名词解释
1． 核酶（ribozyme ）
【答案】核酶也称核糖酶、核酸类酶、酶RNA 、类酶RNA , 是指具有催化功能的RNA 分子，通过催化靶位点RNA 链中磷酸二酯键的断裂，特异性地剪切底物RNA 分子，从而阻断基因的表达。
2． 穿梭载体（shuttle vector）
【答案】穿梭载体是指具有多个复制子能在两个以上的不同宿主细胞复制和繁殖的载体。
3． YAC
【答案】酵母人工染色体。酵母人工染色体是指一种能够克隆长达400Kb 的DNA 片段的载体，含有酵母细胞中 必需的端粒、着丝点和复制起始序列，可用于基因组大片段库构建。
4． 蛋白质组和蛋白质组学（proteomeandproteomics ）
【答案】蛋白质组是指一个细胞或一个机体的基因所表达的全部蛋白质。
蛋白质组学是指着眼于研究并解析生物体整个基因组所有遗传信息的学科，旨在阐明生物体全部蛋白质的表 达模式与功能模式，从整体的角度分析，鉴定细胞内动态变化的蛋白质的组成、结构、性质、表达水平与修饰状态，了解蛋白质之间、蛋白质与大分子之问的相互作用与联系，揭示蛋白质的功能与细胞生命活动的规律等。
5． 反式剪切（Trans-splicing ）
【答案】反式剪切是指一种保守的mRNA 加工机制，已经在包括原生动物和多细胞动物等多种生物体中发现。SL 反式剪切是反式剪切的一种，是将一段相对保守的剪切引导序列（SL ）加到
前体mRNA 的5' 端作为一个外显子，从而提高成熟mRNA 的稳定性，并且可能参与翻译的起始。
6． DNA 解链温度（melting temperature, T m ）
【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。
7． 断裂基因
【答案】断裂基因是指在真核生物结构基因中，编码某一个蛋白质不同区域的各个外显子并
不连续排列在一起， 而常常被长度不等的内含子所隔离，形成镶嵌排列的断裂方式。所以，真核基因常被称为断裂基因。
8． DNA 复性（DNA renaturation）
【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。
9． 核酸分子杂交（hybridization ）
【答案】核酸分子杂交是指应用核酸分子的变性和复性的性质，使来源不同的DNA （或RNA ）片段，按碱基互 补关系形成杂交双链分子的一项实验技术，杂交双链可以在DNA 与DNA 链之间，也可在RNA 与DNA 链之间 形成。
10．蛋白质印迹法（Western blotting）
【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜（如硝酸纤维素膜、尼龙膜等）上，再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等，检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体，由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。
二、简答题
11．碍？
【答案】暂时不能。主要存在的技术障碍有：
（1）体外培养T4淋巴细胞困难：T4淋巴细胞在体内的不同组织环境中分别形成和成熟，于骨髓中生成，在胸腺内分化成熟，然后移居于周围淋巴组织中，而体外很难模拟其所处的环境。
（2）T4淋巴细胞靶向性转移困难：即使产生了正常功能的T4淋巴细胞，但是输入人体后还需解决T4淋巴 细胞正常移居于周围淋巴组织的问题，
（3）排斥反应克服困难：不同个体的细胞表而抗原物质可能会使个体对基因工程产生的细胞产生排斥。
12．简述基因芯片技术对分子生物学研究的意义。
【答案】（1）基因表达检测方面：能一次性检测数千个基因表达谱的差异。
（2）核酸突变的检测及基因组多态性方面：可用于核酸突变的检测，甚至可与生物传感器相结合，通过改 变探针阵列区域的电场强度可以检测到基因的单碱基突变，已经成功应用于人类基因组单核苷酸多态性的鉴定、 作图和分型、人线粒体基因组多态性的研究，酵母基因组作图等方面。
（3）技术难易程度方面，较其他技术更易固定大量核酸分子。
是通过攻击人体内淋巴细胞，使人体的免疫系统遭到破坏而致病的。能不能对艾滋病淋巴细胞而延长生命？主要存在哪些技术上的障患者进行定时输入，通过基因工程生产的特定
13．真核生物如何进行翻译后水平的调节？
【答案】真核生物基因翻译的最初产物是一个大的蛋白质分子。有时，必须经酶切成更小的分子才能有生物活性。 加工过程包括：
（1）除去起始的Met 或随后的几个残基；
（2
）切除分泌蛋白或膜蛋白
（3）形成分子内的二硫键；
（4）肽键断裂或切除部分肽段；
（5）氨基酸修饰；
（6）加上糖基、脂类分子或配基。
此外需在分子伴侣帮助下进行折叠，并正确定位，这种后加工过程在基因表达调控上起主要作用。
14．简述原核生物DNA 的复制特点。
【答案】（1）原核生物双链DNA 都是以半保留方式遗传的，DNA 的复制在整个细胞周期都能进行;
（2）在复制起始、延伸和终止这三个阶段中主要的变化包括:双链的解开，RNA 引物的合成，DNA 链的延长，RNA 、引物的切除、填补缺口、DNA 片段的连接以及切除和修复错配碱基等;
（3）原核生物通常只有一个复制起点。
其复制起始点（OriC ）是含有3个13bp 的串联重复保守序列，以及4个由9bp 的保守序列组成的能结合DnaA 的起始结合位点;
（4）在起始点处解开形成复制叉，可以连续开始新的DNA 复制，一个复制单元多个复制叉，复制叉移动速度才良快;
（5）需要多种酶和蛋白质的协同参与，都涉及拓扑异构酶、解旋酶、单链结合蛋白、引物合成酶、DNA 聚合酶、连接酶等，DNA 聚合酶在组成和功能上与真核生物有很大的不同，原核的DNA 聚合酶III 复制时形成二聚体复合物，而真核的聚合酶保持分离状态;
（6）原核生物冈崎片段由DNA 聚合酶I 去除，以多联体的形式补齐末端，且原核生物的DNA 聚合酶I 具有5'-3' 外切酶活性。
15．假如你得到一个据说通过改造并适合作为基因治疗载体的病毒，你将如何分析这种可行性？主要在哪些 方面做改造？你将如何测试改造后的病毒载体的效率和安全性？
【答案】（1）作为基因治疗载体的病毒的基本要求：
①能够感染多种生物的多种类型不同的细胞；
②易于改造并易于插入外源基因，能装配成病毒颗粒；
③能使外源基因完全整合到宿主细胞中，并且外源基因要有较高的表达水平；
④对人体安全。
（2）改造包括：
末端的信号序列；
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