2018年海南大学农学院414植物生理学与生物化学之现代分子生物学考研核心题库
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一、名词解释
1．
【答案】即荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization ），是指一种利用非放射性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性，荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合
起来，通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交，在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断，为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
2． Edman 降解（Edman degradation）
【答案】Edman 降解是指由P. Edman于1950年首先提出来的，最初用于N 端氨基酸残基分析，现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术，
其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应，切下与之反应的那个氨基酸残基，这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基，而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基，又可参加第二轮反应，如此重复，就可以测出n 个残基的顺序。
3． 感受态细胞（competent cell）
【答案】感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法（如CaCL 等化学试剂）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。
4． YAC
【答案】酵母人工染色体。酵母人工染色体是指一种能够克隆长达400Kb 的DNA 片段的载体，含有酵母细胞中 必需的端粒、着丝点和复制起始序列，可用于基因组大片段库构建。
5． 蛋白质印迹法（Western blotting）
【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜（如硝酸纤维素膜、尼龙膜等）上，再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等，检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体，由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。
6． Intein
【答案】内含肽。内含肽是指存在于某些蛋白质前体肽链内部的一些肽段在转变为成熟蛋白
质时，通过非酶促的转肽反应被切除，与其对应的是保留于成熟蛋白质中的外显肽。这些肽段具有核酸酶活性。
7． 聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）
【答案】聚合酶链式反应，简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应有选择地大量扩增 （包括分离）一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补，经过模板DNA 变性，模板DN Α-引物的配对，在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应，三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链，经多次循环后得到大量目标DNA 片。
8． 内含子（intron ）与外显子（exon ）
【答案】内含子（intron ）是指真核基因中的非编码序列，又称插入序列（IVS ），只转录，在前体mRNA 加工时被剪切掉;
外显子（exon ）是指真核基因中的编码序列，是一个基因表达为多肤链的部分。
二、简答题
9． 真核生物的原始转录产物必须经过哪些加工才能成为成熟mRNA ，以用做蛋白质合成的模板?
【答案】真核生物的原始转录产物RNA 转录后的加工有三种形式:
（1）5' 端加帽
转录产物的5' 端通常要装上甲基化的帽子; 有的转录产物5' 端有多余的顺序，则需切除后再装上帽子。
（2）3' 端加多聚A 尾巴
转录产物的3' 端通常由多聚A 聚合酶催化加上一段多聚A ; 有的转录产物的3' 端有多余顺序，则需切除后再加上尾巴。装5' 端帽子和3' 端尾巴均可能在剪接之前就已完成。
（3）修饰
对某些碱基进行甲基化等。
（4）剪接
将mRNA 前体上的居间顺序切除，再将被隔开的蛋白质编码区连接起来。剪接过程是由细胞核小分子RNA （如U1RNA ）参与完成的，被切除的居间顺序形成套索形。
10．简述可诱导和可阻遏的基因调控方式的区别。
【答案】（1）可诱导调节是指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下，由原来关闭的状态转变为工作状态，即在某些物质的诱导下使基因活化的机制。
在可诱导的系统中，操纵子只有在诱导物存在时才开放。存在诱导物时，它与阻遏物结合，使之变构不再与操纵子结合，从而开启操纵子。没有诱导物时，阻遏物结合在操纵子上阻止结构基因的转录。酶的诱导是分解途 径所特有的，诱导物就是酶的底物或者底物类似物。
（2）可阻遏调节是指一些基因平时都是开启的，处在产生蛋白质或酶的工作过程中，由于一些特殊代谢物 或化合物的积累而将其关闭，阻遏了基因的表达的机制。
在可阻遏系统中，操纵子被终产物所关闭。存在终产物时，它结合到阻遏物上，改变后者的构象，使其能结合到操纵子上，关闭操纵子。不存在终产物时，阻遏物不能结合到操纵子上，因此操纵子开放。酶的阻遏是合成代谢的特点。
11．1952年Hershey 和Chase 通过噬菌体感染实验证实遗传物质是DNA 而不是蛋白质。简述此实验的内容。
3532【答案】首先用放射性同位素S 标记了一部分噬菌体的蛋白质，并用放射性同位素P 标记
了另一部分噬菌体的DNA , 因为硫只存在于T 2噬菌体的蛋白质，99%的磷存在于DNA 。然后，用被标记的T 2噬菌体分别去侵染细菌，当噬菌体在细菌体内大量增殖时，对被标记物质进行测试（检测放射性）。
测试的结果表明，噬菌体的蛋白质没有进入细菌内部，而是留在细菌的外部，噬菌体的DNA 进入了细菌体内，可见，噬菌体在细菌内的增殖是在噬菌体DNA 的作用下完成的。
12．原核生物和真核生物复制起始控制的主要特征。
【答案】（1）原核生物:
①复制起始位点可以连续开始新的复制;
②大肠杆菌染色体DNA 复制起点编码复制调节蛋白质、复制起点与调节蛋白质相互作用并启动复制
③复制叉的多少决定了复制起始频率的高低。
（2）真核生物:
①复制一旦启动，在完成本次复制前，不能在再启动新的复制;
②DNA 复制只发生在S 期，细胞周期水平的调控，决定细胞停留在G 1还是进入S 期;
③染色体水平调控，决定不同染色体或同一染色体不同部位的复制子按一定顺序在S 期进行复制;
④复制子水平的调控决定复制的起始与否，这种调控从单细胞生物到高等生物是高度保守的。
13．一单链DNA 样品按双脱氧链终止法测得如图结果，请按图读出被测DNA 样品的碱基顺序。
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