2018年新乡医学院南阳市精神病医院306临床医学综合能力(西医)[专业硕士]之生物化学考研仿真模拟五套题
● 摘要
一、名词解释
1． 蛋白质的别构作用。
【答案】蛋白质的别构作用是指含亚基的蛋白质由于一个亚基的构象改变而引起其余亚基和整个分子构象、性质和功能发生改变的作用。
2． 嘧啶核苷酸的从头合成途径（de novo pyridine nucleotide synthesis）。
【答案】
嘧啶核苷酸的从头合成途径是以谷氨酰胺、天冬氨酸、
成嘧啶核苷酸，是嘧啶核苷酸合成的主要方式。
3． 终止密码子。
【答案】终止密码子是指任何tRNA 分子都不能正常识别的，但可被特殊的蛋白结合并引起新合成的肽链从翻译 机器上释放的密码子。存在3个终止密码子：UAG ，UAA 和UGA 。
4． 增色效应（hyperchromiceffect ）。
【答案】增色效应（hyperchromice ffect）是指核酸变性时由于高级结构被破坏，碱基暴露程
度增加而使得的光吸收值升高的现象。
5． 嘌呤核苷酸的补救途径（salvage purine nucleotide synthesis）。
【答案】嘌呤核苷酸的补救途径是指当从头合成途径受阻时，可以利用体内已有的嘌呤碱或嘌呤核苷合成嘌呤核苷酸，是更经济的合成方式。
6． 转角。
【答案】转角是指在蛋白质的多肽链中经常出现180°的回折，在肽链回折处的结构，也称弯曲，
或称发夹结构。它一般由4个连续的氨基酸残基组成，由第一个氨基酸残基的C-0与第四个氨基酸残基的N-H 之间形成氢键，
使转角成为比较稳定的结构。
7． 异肽键。
【答案】异肽键（isopeptide bond）是指两个氨基酸通过侧链羧基或侧链氨基形成的肽键。
8． 激素敏感性三酰甘油脂肪酶（hormone-sensitive triacylglycerol lipase）。
【答案】激素敏感性三酰甘油脂肪酶是一种存在于脂肪细胞中受激素调节的三酰甘油脂肪酶。当血液中血糖浓度变低时，肾上腺素和胰高血糖素分泌増加，激活脂肪细胞质膜中的腺苷酸环化
第 2 页，共 30 页 小分子为原料，从头合
酶产生cAMP 。一种依赖cAMP 的蛋白激酶就会使激素敏感性三酰甘油脂肪酶发生磷酸化而激活，催化三酰甘油分子中的酯键水解，并释放脂酸。
二、问答题
9． 假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么？为什么
会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？
【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。
（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将
的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，
可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
10．为什么DEAE 离子交换柱在pH 高于9时会失效？
【答案】pH 大于9时，DEAE 基质中的氨基会因为失去质子而不再能结合阴离子底物。
11．—种纯酶按质量算含亮氨酸1.65%和异亮氨酸2.48%，试计算其最低相对分子质量（亮氨酸和异亮氨酸的相对分子质量均为131）。
【答案】由于亮氨酸;
异亮氨酸
131—18=113。以亮氨酸为例计算有
：因此该纯酶至少含有2个亮氨酸和蛋白质相对分子质量，则该纯酶的最低相
第 3 页，共 30 页 大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这3个异亮氨酸；又因为这两种氨基酸的相对分子质量均为131，故其相应残基的相对分子质量为
对分子质量为
：
12．有时知道一个基因的DNA 序列并不能得知其编码的蛋白质的氨基酸序列，请说明原因。
【答案】DNA 经常在基因内部有内含子，因此DNA 序列推测出的最终蛋白序列有可能是错误的。而且蛋白质在翻译后还会进行修饰，因此蛋白质序列上可能有被修饰的地方并没有体现在DNA 序列中。
13．核糖核苷酸如何转变为脱氧核糖核苷酸？
【答案】（1）腺嘌呤、鸟嘌呤和胞嘧啶核糖核苷酸经还原，将核糖第二位碳原子的氧脱去，即成为相应的脱氧核糖核苷酸。
（2）胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸：先由尿嘧啶核糖核苷酸还原形成尿嘧啶脱氧核糖核苷酸，然后尿嘧啶脱氧核糖核苷酸再经甲基化转变成胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸。
在大多数生物体，还原反应发生在核苷二磷酸水平上。ADP 、GDP 、CDP 和UDP 都可以在核苷酸还原酶系的作用下还原生成相应的脱氧核苷二磷酸dADP 、dGDP 、dCDP 和dUDP 。dTMP 是由dUMP 甲基化形成的。
14．磷酸葡糖变位酶在糖原降解及合成中均至关重要，为什么？
【答案】糖原降解时该酶可将糖原磷酸解产物葡萄糖-1-磷酸转化为葡萄糖-6-磷酸，后者可以游离的葡萄糖形式进入血液（肝脏）或经由糖酵解途径供能（肌肉和肝脏）。糖原合成时该酶可将葡萄糖-6-磷酸转化为葡萄糖-1-磷酸，后者再与UTP 反应生成UDP-葡萄糖，用作糖原合酶的底物。
15．参与IMP 合成的第一个酶利用Gin 作为氨基的供体而不是直接使用氨，这个现象在其他地方也能发现。为什么自然利用一个更耗能的过程（Gin 作为氨基供体需要消耗ATP ）?
【答案】参与IMP 合成的第一个酶实际上催化的是一种转氨基反应，该反应的机理是含有孤对电子的N 原子进行亲核进攻。然而在生理pH 下，氨被质子化，形成孤对电子不再存在，从而使转氨基反应无法进行。利用Gin 作为氨基的供体就可以避免上述现象发生。
16．从热力学上考虑，一个多肽的片段在什么情况下容易形成a 螺旋，是完全暴露在水的环境中还是完全埋藏在蛋白质的非极性内部？为什么？
【答案】当多肽片段完全埋藏在蛋白质的非极性内部时，容易形成氢键，因为在水的环境中，肽键的C=0和N-H 基团能和水形成氢键，亦能彼此之间形成氢键，这两种情况在自由能上没有差别。因此相对地说，
形成螺旋的可能性较小。而当多肽片段在蛋白质的非极性内部时，这些极性基团除了彼此之间形成氢键外，不再和其他基团形成氢键，
因此有利于螺旋的形成。
三、论述题
第 4 页，共 30 页