2018年兰州大学基础医学院622医学综合(生物化学、生理学、病理学)之生物化学考研仿真模拟五套题
● 摘要
一、名词解释
1. 内部控制区(internal control regions ICG)。
【答案】内部控制区是指tRNA 和5S rRNA基因的启动子位于转录起始点的下游区域(转录区)。
2. 基因载体(gene vector)。
【答案】基因载体是指外源DNA 片段(目的基因)进入受体细胞时,依靠的一个能将其带入细胞内,并载着外源DNA —起进行复制与表达的运载工具。
3. 多酶复合体。
【答案】多酶复合体是指多种酶靠非共价键相互嵌合、催化连续反应的体系。
4. 多聚核糖体(polysome )。
【答案】多聚核糖体是指合成蛋白质时,多个甚至几十个核糖体串联附着在一条mRNA 分子上,形成的似念珠状结构。在一个mRNA 分子上同时结合多个核糖体形成的结构,形成多聚核糖体可以提高翻译的效率。
5. 生物氧化(biological oxidation)。
【答案】生物氧化是指生物体内有机物质氧化而产生大量能量的过程。生物氧化在细胞内进行,氧化过程消耗氧放出二氧化碳和水,所以有时也称之为“细胞呼吸”或“细胞氧化”。生物氧化包括:有机碳氧化变成
在有机物被氧化成
和
6. 核酸的变性与复性。 底物氧化脱氢、氢及电子通过呼吸链传递、分子氧与传递的氢结成水;的同时,释放的能量使ADP 转变成ATP 。
【答案】核酸的变性是指核酸双螺旋的氢键断裂,变成单链,并不涉及共价键的断裂的过程。
核酸的复性是指变性DNA 在适当条件下,可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构的过程。
7. 配体(ligand )。
【答案】配体是能够与特定受体结合的各种物质的总称,如所有的激素,它们可能是小分子,也可能是大分子。
8. 酸中毒。
【答案】人体在某些特殊的情况下(如:饥饿或糖代谢障碍),三羧酸循环不能正常进行,机体所需的能量只能由脂肪酸分解来供给,这样就产生了大量的酮体,当酸性的酮体进入血液后,就引起了血液的pH 过分下降,从而造成酸中毒。
二、问答题
9. 食入缺乏必需氨基酸甲硫氨酸的食物,除了不能合成足够的蛋白质外,还会造成什么后果?
【答案】甲硫氨酸的缺乏将会抑制需要S-腺苷甲硫氨酸的所有反应。这里值得注意的是由于甲硫氨酸的缺乏因而不能从磷脂酰乙醇胺合成磷脂酰胆碱。
10.假定人的头发的延伸是由角蛋白决定的,每年长15cm 的头发,每秒需要合成多少个肽键?(一年按365天计算)
【答案】已知角蛋白的构象为右手螺旋,设头发的角蛋白为连续的螺旋。
(1)如果不考虑聚合,则计算一股螺旋。 已知螺旋的螺距为
键数为
每秒需要合成肽键数为:/氨基酸残基 所以15cm 的头发含有的肽(2)如果考虑聚合,
则原纤维(已知三股螺旋聚合成原纤维):每秒需要合成肽键数为32X3=96; 微纤维(已知原纤维按9+2聚合成微纤维):每秒需要合成肽键数为96X11=1056。
11.使用非变性凝胶电泳分离蛋白质时,蛋白质分子的大小、形状和电荷决定其在凝胶上的迁移率。而为何DNA 用限制性内切核酸酶切割得到线形的片段DNA 电泳时,决定其迁移率的主要是DNA 的大小,而与其形状、电荷无关?
【答案】电泳的DNA 通常用限制性内切核酸酶进行切割得到线性片段,因此DNA 的形状都是均一的。电荷对于DNA 也是恒定的,因为每一个核苷酸由于磷酸基团都有相同的电荷,因此DNA 具有均一的形状和荷质比,因此分离仅取决于DNA 分子大小,小片段电泳快,大片段电泳慢。
12 ,.比较蛋白质螺旋中的氢键和DNA 双螺旋中的氢键并指出氢键在稳定这两种结构中的作用。
【答案】
在螺旋中,一个残基上的羧基氧与旋转一圈后的(该残基后面)第四个残基上的旷氨基中的氢形成氢键。这些在肽链骨架内原子问形成的氢键大致平行于该螺旋的轴,氨基酸侧链伸向骨架外,不参与螺旋内的氢键形成。在双链DNA 中糖-磷酸骨架不形成氢键,而在相对的两条链中互补的碱基之间形成2个或3个氢键,氢键大致垂直于螺旋轴。
在螺旋中,单独的氢键作用力是很弱的,但是这些键的合力稳定了该螺旋结构。尤其是在一个蛋白质的疏水内部,这里水分子不与氢竞争成键。在DNA 中形成氢键的主要作用是使每一条链能作为另一条链的模板,尽管互补碱基之间的氢键帮助稳定螺旋结构,但在疏水内部碱基对之
间的堆积对螺旋结构稳定性的贡献更大。
13.别构酶有何特性?
【答案】(1)变构酶一般都含2个以上亚基,亚基在结构上及功能上可相同或不同。
(2)变构酶的分子中一般有两种与功能相关的部位,即调节部位和催化部位,二者在空间上分开,可在同一亚基或不同亚基上。
(3)每个酶分子可结合一个以上的配体(包括底物,效应剂,激活剂,抑制剂),理论上结合底物和效应剂的最大数目同分别与催化部位和调节部位数目一致。
(4)配体和酶蛋白的不同部位相结合时,可在底物-底物,效应剂-底物和效应剂-效应剂之间发生协同效应,此效应可是正协同也可是负协同,其中同促效应以正协同居多。
(5)协同效应可用动力学图来鉴别,可用协同系数大于1、小于1或等于1表示。
(6)别构酶因其协同效应,因而动力学曲线为S 形(正协同效应),而非双曲线或是表观双曲线(负协同效应)不符合米氏方程。
(7)别构酶出现协同效应的机制,可以是酶和配体结合引起酶分子空间构象的改变,从而增加或降低了酶和下一分子配体的亲和力。
14.葡萄糖可结合并竞争性地抑制糖原磷酸化酶,试分析该作用机制的生理学意义。
【答案】该机制可根据血糖浓度的变化而有效调控糖原磷酸化酶的活性,即血糖浓度升高时不再降解糖原。
15.假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶,你选择盐析作为纯化的第一步,随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中,进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L,你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中?
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步,同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白?
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ,在考马斯亮蓝染色以后,你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白,于是你决定再进行一次蛋白质染色,这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么?为什么
会多显示出新的条带,你如何分离这两种蛋白质?
【答案】(1)在纯化蛋白质过程中,首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ,可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物,将其与含有酶的部分保温,然后用TCA 沉淀,再使用特定的滤膜过滤,通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性,可测定出纯化物中酶活性的高低。
大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶,你决定将条带切下,然后测序。然而,你吃惊的发现,这
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