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一、名词解释

1． Non-Watson-Crickbasepairing

【答案】非沃森-克里克式碱基配对。非沃森-克里克式碱基配对是指不完全依照Α-T/U，C-G 配对的一些碱基配对现象，如U-G 配对。

2． 分子伴侣（molecular chaperone）

【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质，它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解，如热休克蛋白。

3．

【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件，它位于特定的mRNA 区域，可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物，继而发生构象重排，影响mRNA 活性。

4． 反式剪切（Trans-splicing ）

【答案】反式剪切是指一种保守的mRNA 加工机制，已经在包括原生动物和多细胞动物等多种生物体中发现。SL 反式剪切是反式剪切的一种，是将一段相对保守的剪切引导序列（SL ）加到

前体mRNA 的5' 端作为一个外显子，从而提高成熟mRNA 的稳定性，并且可能参与翻译的起始。

5． DNA 的甲基化（DNAmethylation ）

【答案】DNA 的甲基化是指一种表观遗传修饰，它是由DNA 甲基转移酶催化s-腺苷甲硫氨酸作为甲基的供体，将胞嘧啶转变为

6． Attenuator 甲基胞嘧啶的一种过程。

【答案】弱化子。弱化子是指当操纵子被阻遏时，RNA 合成终止，起终止转录信号作用的核苷酸序列。弱化子 对于基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA 的结构而发挥作用的，其调节作用的是某种对应氨酰-tRNA 的浓度，典型例子是细菌中的色氨酸操纵子。

7． 移码突变（frameshi Kmutation）

【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变，从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。

8． 内含子（intron ）与外显子（exon ）

【答案】内含子（intron ）是指真核基因中的非编码序列，又称插入序列（IVS ），只转录，在前体mRNA 加工时被剪切掉;

外显子（exon ）是指真核基因中的编码序列，是一个基因表达为多肤链的部分。

二、简答题

9． 按照拷贝数（或重复频率）以及基因的结构和功能，基因组中的基因可分为哪些种类?

【答案】（1）按照拷贝数或重复频率，基因组中的基因可分为三种:

①单拷贝序列（稀有基因）

②中度重复序列（中等丰度基因）

③高度重复序列（高丰度基因）

（2）按照结构和功能，基因组中的基因可分为六种:

①编码RNA 的基因

②编码蛋白质的基因

③基因家族与基因簇

④异常结构基因

a. 重叠基因

b. 基因套基因

c. 反义基因

⑤假基因

⑥移动基因（转座子）

10．真核生物的原始转录产物必须经过哪些加工才能成为成熟mRNA ，以用做蛋白质合成的模板?

【答案】真核生物的原始转录产物RNA 转录后的加工有三种形式:

（1）5' 端加帽

转录产物的5' 端通常要装上甲基化的帽子; 有的转录产物5' 端有多余的顺序，则需切除后再装上帽子。

（2）3' 端加多聚A 尾巴

转录产物的3' 端通常由多聚A 聚合酶催化加上一段多聚A ; 有的转录产物的3' 端有多余顺序，则需切除后再加上尾巴。装5' 端帽子和3' 端尾巴均可能在剪接之前就已完成。

（3）修饰

对某些碱基进行甲基化等。

（4）剪接

将mRNA 前体上的居间顺序切除，再将被隔开的蛋白质编码区连接起来。剪接过程是由细胞核小分子RNA （如U1RNA ）参与完成的，被切除的居间顺序形成套索形。

11．简述染色质免疫共沉淀（CHIP ）技术原理与基本过程。

【答案】（1）基本原理

在活细胞状态下固定蛋白质-DNA 复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免 疫学方法沉淀复合体，特异性地富集目的蛋白结合的DNA 片段，通过对目的片断的纯化与检测，获得该蛋白质 与DNA 相互作用的信息。

（2）基本过程

①首先用甲醛处理细胞，使DNA 和蛋白质固定在交联状态；

②接着用超声波法或酶法等处理处理细胞，获得一定长度范围内的染色质小片段；

③ 之后加入目的蛋白的抗体，使其与靶蛋白

④ 随后加入ProteinA , 结合抗体-祀蛋白

⑤ 得到富集复合物，解除交联，对纯化富集的复合物结合； 复合物，并沉淀，清洗沉淀下来的复合物； 片断进行PCR 检测与分析，获得蛋白质与DNA 相互作用的信息。

12．生物体存在大量的mRNA 前体的选择性剪切过程。什么是选择性剪接，有几种方式?

【答案】（1）选择性剪接是指在mRNA 前体的剪接过程中，参加剪接的外显子可以不按其线性次序剪接，内含子也可以不被切除而保留，即一个外显子或内含子是否出现在成熟mRNA 中是可以选择的一种剪接方式。此外，不同的启动子或不同的poly A加尾位点的选择，也可看作选择性剪接。

（2）选择性剪接的方式主要有4种:

①拼接产物缺失一个或几个外显子;

②拼接产物保留一个或几个内含子作为外显子的编码序列;

③外显子中存在5' 拼接点或3' 拼接点，从而部分缺失该外显子;

④内含子中存在5' 拼接点或3' 拼接点，从而使部分内含子变为编码序列。

三、论述题

13．说出蛋白质质谱技术的主要原理。

【答案】现行质谱仪主要有三个连续的组成部分，即离子源，离子分离区和检测器，较常用的有基质辅助的激光解析电离-飞行时间质谱

的工作原理：

（1）将蛋白质酶解成小肽段后与基质（主要是有机酸）混合；

（2）将样品混合物点到金属靶表面上并在其干燥结晶后，用激光轰击，将呈离子化气体状态的待分析物从耙表面喷射出去；

（3）离子化气体肽段在电场中被加速后到达检测器，由于这段时间是由肽段的质量和其所带电荷数的比值（m/z）决定，所以可测定其m/z值。

MALDI-TOF 和电喷雾质谱（ESI-MS ）。