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2017年西安交通大学生物化学考研复试核心题库

  摘要

一、名词解释

1. 后随链(lagging strand)。

【答案】后随链是指DNA 半不连续复制过程中,延伸方向与复制叉前进方向相反、由合成的一系列短的DNA 片段(冈崎片段)连接而成的新生链。

2. 蛋白质的营养价值(nutrition value of protein)。

【答案】蛋白质的营养价值是指各种蛋白质由于所含的氨基酸种类和数量不同而具有不同的营养价值,若体内所需的氨基酸的种类和量越多,则蛋白质营养价值越高。

3. 氨基酸代谢池(amino acid metabolic pool)。

【答案】氨基酸代谢池是指食物蛋白质经消化而被吸收的氨基酸与体内组织蛋白质降解产生的氨基酸混在一起,分布于体内参与代谢。

4. 多聚核糖体(polysome )。

【答案】多聚核糖体是指合成蛋白质时,多个甚至几十个核糖体串联附着在一条mRNA 分子上,形成的似念珠状结构。在一个mRNA 分子上同时结合多个核糖体形成的结构,形成多聚核糖体可以提高翻译的效率。

5. 表达载体(expression vector)。

【答案】表达载体是指为使插入的外源DNA 序列可转录,进而翻译成多肽链而特意设计的克隆载体。

6. 两用代谢途径。

【答案】两用代谢途径是指既可用于代谢物分解,又可用于合成的代谢途径,往往是物质代谢间的枢纽。如三羧酸循环,既是糖脂蛋白质彻底氧化的最后途径,又可为糖、氨基酸的生物合成提供所需碳骨架和能量。

7. 稀有密码子(rare codon)。

【答案】稀有密码子是指不同生物体对编码同一种氨基酸的不同密码子(同义密码子)的使用频率比较低的密码 子。

8. 铁硫蛋白。

【答案】铁硫蛋白又称铁硫中心,是含铁原子和硫原子的一' 类金属蛋白质。Fe —S 在呼吸链中多与黄素酶或Cytb 结合成复合物存在,其中铁作为单电子传递体可逆地进行氧化还原反应。

二、问答题

9. 维生素分类的依据是什么?每类包含哪些维生素?

【答案】(1)根据它们的溶解性质将其分为脂溶性维生素和水溶性维生素两大类。

(2)脂溶性维生素溶于非极性溶剂,包括维生素A 、维生素D 、维生素E 、维生素K 。水溶性维生素溶于极性溶剂,包括B 族维生素和维生素C 。

10.为什么所有的tRNA 都有相似的空间大小?

【答案】所有的tRNA 都有相似的空间大小是因为:在翻译过程中,所有负荷的tRNA 与核糖体上的相同位点单 独地严格地相互作用。存在于tRNA —端的反密码子允许它与结合的mRNA 相互作用,并且参照结合的肽酰转 移酶的位置,氨基酸严格的定位在核糖体表面。

11.在体外进行DNA 复制实验时,如果将大肠杆菌DNA 聚合酶I 与T7 DNA保温20min 以后,加入大量T3 DNA。如果改用大肠杆菌DNA 聚合酶III 取代大肠杆菌DNA 聚合酶I 进行上述实验,则得到的主要是T7 DNA。请解释原因。

【答案】大肠杆菌DNA 聚合酶I 和DNA 聚合酶III 的进行性不同,前者只有后者高达500000 nt。进行性低意味着DNA 聚合酶I 在催化DNA 复制过程中很容易与模板解离,进行性高则意味着DNA 聚合酶III 可以 在模板上连续合成更长的DNA 。使用DNA 聚合酶I 进行实验时,因为它的进行性低,合成一小段DNA 以后, 就与原来的T7 DNA模板解离,在加入大量的T3 DNA以后,DNA 聚合酶I 很难与原来的模板结合,反而更容易与量多的T3 DNA结合,复制T3 DNA,于是被合成的DNA 主要是T3 DNA; 使用DNA 聚合酶III 进行实验时, 因为它的进行性极高,故在有限的时间内,DNA 聚合酶III 几乎不会离开原来的模板T7 DNA,即使加入的T3 DNA 量再多,对原来的T7DNA 复制也没有影响,因此最后合成的DNA 主要是T7DNA 。

12.试比较糖原磷酸化酶在肝脏及肌肉细胞中的别构调节差异,有何生物学意义?

【答案】高活性的糖原磷酸化酶a 在肝细胞中可被葡萄糖抑制,而低活性的糖原磷酸化酶b 在肌细胞中可被AMP 激活。这类别构调节差异与各组织中糖原的代谢功能直接相关:肝脏利用糖原以稳定血糖浓度,而肌糖原降解则主要是为肌细胞收缩提供能量。

13.在经由柠檬酸循环途径被氧化之前,柠檬酸必须先异构化成异柠檬酸,为什么?

【答案】与异柠檬酸的二级醇羟基相比,柠檬酸的三级醇发生氧化反应要难得多,因而该异构化反应为其氧化脱羧提供了一条更容易的途径。

14.指出在时,四种核苷酸所带的电荷数(或所带电荷数多少的比较),并回答下列问题:

(1)电泳分离四种核苷酸时,缓冲液应取哪个pH 比较合适? 此时它们是向哪一极移动? 移动的快慢顺序如何?

(2)当要把上述四种核苷酸吸附于阴离子树脂柱上时,应调到什么pH?

(3)如果用洗脱液对限离子交换树脂上的四种核苷酸进行洗脱分离时,洗脱液应调到什么pH? 这四种核苷酸上的洗脱顺序如何? 为什么?

【答案】各种核苷酸带电荷情况如表所示:

(1)电泳分离四种核苷酸时应取的缓冲液,在该pH 时,这四种单核苷酸之间所带负电荷差异较大,它们都向正极移动,但移动的速度不同,依次为:UMP>GMP>AMP>CMP

(2)应取PH8.0, 这样可使各核苷酸带较多负电荷,利于核苷酸吸附于阴离子交换树脂柱。虽然时核苷酸带有更多的负电荷,但pH 过高对树脂不利。

(3)洗脱液应调到当不考虑树脂的非极性吸附时洗脱顺序为MPT>AMP>GMP>UMP

,(根据pH2.5时核苷酸负电荷的多少来决定洗脱速度)但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树

脂之间存在着非极性吸附,嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3倍。静电吸附与非极性吸附共同作用的结果使洗脱顺序为:CMP>AMP>UMP>GMP。

三、论述题

15.重组(基因克隆)有哪些步骤,每步可以采取哪些策略和方法。 【答案】

因工程的核心。

(1)进行重组操作,首先要获得需要的目的基因。

构建基因文库

片段。 从中调用目的基因。 最常用的方法包括: ①直接从生物体中提取总②以

(2)外源③利用聚合酶链式反应与载体为模板,反转录合成互补的. 重组技术是指将不同的片段(如基因等)按人们的设计方案定向地连接起来,并在特定的受体细胞中,与载体一起得到复制与表达,使受体细胞获得新的遗传特性。是基特异性地扩增所需要的目的基因片段等等。 之间可以通过多种方式相连接。

形成粘性末端,并将拟插入的那个片

这样,外源

:与载体

末端的之间上①粘性干末端连接:用一种限制性内切酶切割外源段用凝胶电泳将其分离出来;

再用同一种酶去切割载体就可以在②在

一片段的连接酶催化下通过粘性末端彼此相连接起来。

片段末端加上寡聚核苷酸后连接:用末端核苷酸转移酶催化片段的末端上一定要添加与T 相互补的寡聚A ,这样,这两个

添加单核苷酸,形成寡聚核苷酸链。如果在一个末端上添加寡聚T ,那么在另

片段便可彼此