题目：以含C－F键有机化合物作底物的酶联免疫分析方法研究

近年来，许多非放射性同位素标记的免疫分析方法得到了很大发展，其中荧光免疫分析方法具有专一性强、灵敏度高、线性范围宽、实用性强等特点，已成为一种很有竞争力的非同位素标记免疫分析方法。但来自血清的荧光干扰一直影响着荧光免疫分析的灵敏度，本文首次建立了以对氟苯酚为底物，荧光免疫的新方法，该方法的荧光发射波长位于红光区，避免了来自血清的干扰，将此方法与不同的免疫分析技术相结合，成功的应用已性肝炎病人血清中四种不同类型的抗原、抗体的临床分析，测定结果与经典的ELISA显色光度法进行对照不但二者相关性很好，而且新建立的荧光法比ELISA显色光度法灵敏度高500多倍，因此可以实现对一些重要的痕量生化物质的测定以及一些疾病的早期诊断。 一、本文首次发现对氟苯酚具有较强的荧光，其λex=570nm,λem=610nm。由于反应对氟苯酚+过氧化氢→ 苯酚+氟离子+水的发生，使得对氟苯酚的量减小了，进而引起对氟苯酚荧光的熄灭，荧光熄灭的程度与HRP的活性有一定线性关系，借此可以测定痕量的HRP和HRP标记物，该方法具有简便、快速、稳定、灵敏等特点，测定HRP检出限为，线性范围位。 　二、新建立了两个测定痕量氟离子的荧光体系，其荧光发射波长韵味于红光区，将这两个荧光体系用于测定反应：对氟苯酚＋过氧化氢→　苯酚＋氟离子＋水释放出的，由于反应所释放出的量与HRP的活性有一定的线性关系，据此，我们建立了两个测定超痕量ＨRP和HRP标记物的方法，该方法稳定、灵敏、操作简单。 　ＡL-钙指示剂荧光体系测定HRP 的检测限为3×10-11g/ml，线性范围位1×10-10 ~10×10-3； 　AL-酸性铬兰Ｋ荧光体系测定ＨRP的检测限为1.3×10-10g/ml,线性范围位6×10-10 ~10×10-3g/ml 　三、将Ｚr-8-羟怪林－５－璜酸荧光体系测定的方法与反应：对氟苯酚＋过氧化氢　苯酚＋氟离子＋水　相结合，建立了一个灵敏的测定HRP及HRP标记物的荧光方法。检出限为，线性范围为。 　四、将建立的荧光体系与四种不同类型的免疫分析技术（双抗原夹心、双抗体夹心、双夹心法，竞争性抑制法）相结合，用以乙型肝炎病人血清中的四种抗原和抗体分析（HBsAg，HBsAb，HBeAg，HBeAb）并于经典的显色光度法进行对照，结果令人满意。