● 摘要
山茱萸（Fructus Corni）为山茱萸科（Cornaceae）植物山茱萸（Cornus officinalis Sieb.et Zucc.）的成熟干燥果肉，别名蜀枣、鼠矢、山萸肉、实枣儿、枣皮和萸肉等，是世界上三大名贵木本药材之一，具有补益肝肾，收涩固脱的作用，我国的河南、陕西和浙江等省是山茱萸的三大主产地，四川、安徽、山东等地亦有栽培。现代研究表明山茱萸主要具有免疫调节、降血糖、抗氧化及抗癌等功效。从山茱萸果肉中分离得到的具有药用价值的主要成分可分为有机酸及其酯类、五环三萜及其酯类、环烯醚萜苷、鞣质、多糖、维生素、氨基酸和矿物质等。研究表明马钱苷、没食子酸、5-羟甲基糠醛（5-HMF）、原儿茶酸、莫诺苷、獐牙菜苷、山茱萸新苷是山茱萸的主要活性成分。如马钱苷具有免疫调节作用，对半乳糖胺所致的肝损伤、淋巴细胞、艾氏腹水瘤细胞、人骨髓瘤细胞SP均有一定的保护作用；没食子酸具有抑菌、抗氧化、抗肿瘤作用；5-HMF可以改善血液循环，对小鼠急性肝损伤及离体培养的肝细胞也有明显的保护作用；獐牙菜苷有抗肝细胞损伤作用；莫诺苷能够促进神经元及神经干细胞的增殖和分化，可以起到保护神经细胞、防止糖尿病并发的肝肾损伤作用；山茱萸新苷可抑制细胞因子诱导血管相关的炎症，抑制黑色素生成。近几年来，原儿茶酸因其具有的抗菌及抗肿瘤作用被认为是山茱萸的有效成分。在山茱萸有效成分中，目前主要集中在测定马钱苷、没食子酸和獐牙菜苷等成分，用来评价山茱萸的有效成分的差异和药材的优劣,单以这3个成分远不具说服力。若能遵循药典（2010年版）测定马钱苷含量的标准，同时又测定其它具有显著药理作用的化合物（没食子酸、5-HMF、原儿茶酸、莫诺苷、獐牙菜苷和山茱萸新苷），则可全面、合理的评价山茱萸药材质量。因此，我们需要建立一种新的测定分析方法，即在同一色谱条件下实现更多成分的同时测定，从而建立一个比较系统和完备的中药材评价体系，为山茱萸优种的选育提供一定的理论依据。本文以陕西、河南、浙江和安徽等地山茱萸为研究对象，以高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)为主要手段，建立同时测定山茱萸有效成分最适宜的色谱分离条件，对测得的7种有效成分进行分析，建立山茱萸HPLC指纹图谱。
本实验的主要结果如下：
（1）建立了RP-HPLC-DAD法同时测定山茱萸7种有效成分含量的方法：流动相：0.1%甲酸水溶液和乙腈，梯度洗脱程序：0~15 min，2%~4% B；15~50 min，4% ~16% B，50~57 min，16% ~18% B；57~67 min，18% ~25% B；67~87 min，25% ~90%B；87~95min，90%B。柱温：30℃；流速：1.0 ml/min；检测波长为220，240，260，265和280nm；进样量为10μL。结果表明该方法精密度高、重现性好，可作为山茱萸多种有效成分的检测手段。
（2）优化了采自河南、陕西、浙江和安徽等地11批次山茱萸的指纹图谱，以莫诺苷为主要参照峰，确定了19个共有指纹峰，其相对保留时间稳定而相对峰面积有较大差异，说明不同产地山茱萸有效成分存在一定的差异性。山茱萸的指纹图谱相似度计算结果，发现各地山茱萸的指纹图谱具有一定差异，方法学考察得出相对保留时间和共有峰的相对峰面积的RSD值均小于3%，优化的山茱萸指纹图谱的测定方法可靠、稳定，即满足中药指纹图谱的技术要求，具有独自的特征性，因此可作为山茱萸质量评价的依据。
（3）建立了HPLC法同时测定山茱萸中4种环烯醚萜苷（莫诺苷、马钱苷、獐牙菜苷和山茱萸新苷）的测定方法，并以其确定丹凤地区5种不同果型山茱萸的最佳采收时间。
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