题目：苹果中多糖和黄酮类化合物肝损伤保护作用的药理活性研究

据大量文献报道，苹果中多糖类物质和黄酮类化合物具有多种生物活性，因其具有肿瘤防治、延缓机体衰老和抑制细菌滋生等药理功能，并且毒副作用较小，因此被广泛应用于医药、食品等领域。　　　鉴于此，本实验精选杂交晚熟品种粉红女士为研究对象，进而采用本实验室比较成熟的分离分析技术，首次将果肉和果皮中苹果多糖和类黄酮化合物进行对比，对其结构特征和药理活性做了进一步研究。　　　本实验的主要结论如下：　　　1 粉红女士果皮、果肉中多糖（APP和AFP）提取采用水提醇沉法，测得总糖含量分别为70.2%和61.7%；果皮、果肉类黄酮（APF和AFF）采用70%乙醇超声提取，总黄酮含量分别为4.82%和2.22%。　　　2 PMP 柱前衍生化 HPLC-UV 分析结果显示：粉红女士果皮、果肉多糖主要由甘露糖（Man）、核糖（Rib）、鼠李糖（Rha）、葡萄糖醛酸（GlcUA）、半乳糖醛酸（GalUA）、葡萄糖（Glc）、木糖（Xyl）、半乳糖（Gal）和阿拉伯糖（Ara）等单糖组成。上述单糖在苹果果皮多糖（APP）中对应的摩尔百分含量依次为8.0, 0.8, 7.3, 4.6, 13.1, 8.3, 4.8, 25.0和27.9%；而在苹果果肉多糖（AFP）中对应的摩尔百分含量分别为3.0, 1.7, 7.6, 4.2, 18.6, 9.0, 9.1, 17.0和 29.7%。研究结果表明，苹果中类黄酮化合物测定的标准品主要有绿原酸（Chorogenic acid）、咖啡酸（Caffeic acid）、表儿茶素（Epicatechin）、芦丁（Rutin）、金丝桃苷（Quercetin-3-0-galactoside）、槲皮苷（quercetin-3-rhamnoside）、槲皮素（Quercetin）、根皮素（Phloretin）和染料木素（Genistein）。其在苹果果皮类黄酮（APF）中的含量依次为4.3，0.5，1.3，8.1，38.6，71.9，0.5，0.1和0.4 mg/g；果肉（AFF）对应的含量分别为3.2，0.3，0.5，0.6，3.0，2.5 mg/g, 其中槲皮素、根皮素和染料木素在果肉中未被检测到。　　　3 结合DPPH自由基、超氧阴离子（O2•?）自由基、羟自由基（HO•）以及还原能力等四个评价体系对样品抗氧化活性进行评价，结果表明：APP、AFP、APF、AFF在抗氧化方面均呈现较好的活性，且呈良好的剂量-效应关系。通过对比发现, APP和AFP随着浓度增加,活性强弱的对比并不明显,而APF和AFF中的对比却呈现出明显差别，APF的清除活性较强。　　　4 成功建立肝损伤小鼠模型，通过测定肝指数，血清中ALT、AST、LDH，以及肝脏匀浆中MDA、SOD和GSH-PX等多种酶的活性，同时结合病理石蜡切片观察，系统评价APP、AFP、APF和AFF对小鼠肝损伤的影响。结果显示经过四种样品处理过的组别和模型组相比肝指数（HI）出现明显的下降，血清中ALT、AST、LDH和肝脏匀浆中MDA酶含量减少，肝匀浆中SOD、GSH-PX两种酶含量升高。由此可见，APP、AFP、APF和AFF均具有小鼠肝损伤的保护作用，并且随样品浓度的升高保护作用增强，其中相同浓度下AFP比APP起到了更好的肝保护作用，而黄酮类化合物的作用则相反，在相同的浓度下APF的肝保护功能强于AFF。石蜡切片清楚地观察到模型组肝细胞的紊乱、细胞核固缩、边缘模糊、双核现象严重等现象，样品组别这种现象得到明显的改善，进一步说明了实验数据与结论的真实性和可依赖性。