当前位置:问答库>考研试题

2018年海南大学园艺园林学院414植物生理学与生物化学之现代分子生物学考研核心题库

  摘要

一、名词解释

1. 内含子(intron )与外显子(exon )

【答案】内含子(intron )是指真核基因中的非编码序列,又称插入序列(IVS ),只转录,在前体mRNA 加工时被剪切掉;

外显子(exon )是指真核基因中的编码序列,是一个基因表达为多肤链的部分。

2. YAC

【答案】酵母人工染色体。酵母人工染色体是指一种能够克隆长达400Kb 的DNA 片段的载体,含有酵母细胞中 必需的端粒、着丝点和复制起始序列,可用于基因组大片段库构建。

3. 基因扩増

【答案】基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象,结果使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要。

4. 核酸分子杂交(hybridization )

【答案】核酸分子杂交是指应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA (或RNA )片段,按碱基互 补关系形成杂交双链分子的一项实验技术,杂交双链可以在DNA 与DNA 链之间,也可在RNA 与DNA 链之间 形成。

5. CpG 岛

CpG 岛是指在人类基因组中分布很不均一的CpG 双核苷酸在基因上成串出现所形成【答案】

的区段。CpG 岛经 常出现在真核生物的管家基因(house-keeping gene)基因的调控区,在其它地方出现时会由于CpG 中胞嘧啶甲基化引发碱基转换,引发遗传信息紊乱。

6. polysome

【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体,能同时合成若干条蛋白质多肽链。

7. Intein

【答案】内含肽。内含肽是指存在于某些蛋白质前体肽链内部的一些肽段在转变为成熟蛋白质时,通过非酶促的转肽反应被切除,与其对应的是保留于成熟蛋白质中的外显肽。这些肽段具

有核酸酶活性。

8. 等电聚焦

【答案】

等电聚焦 是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。

二、简答题

9. RNA 的结构有哪些特点?

【答案】(1)RNA 含有核糖和嗜咤,与DNA 不同,一般为单链长分子;

(2)RNA 不是双螺旋结构,但可通过自身链的折叠,在局部形成双螺旋结构;

(3)RNA 中Α-U , G-C 配对,未配对的区域可形成突起,也可自由旋转,并由于RNA 碱基和核糖磷酸骨架之间的相互作用,可折叠成复杂的三级结构。

10.什么是逆转座子? 有什么特征?

【答案】(1)逆转座子是指转座过程中需要由RNA 为中介,通过DNA 先转录为RNA ,又反转录成DNA 而进行转座的一类转座元件。

(2)逆转座子的特征

①逆转座子的整体结构与整合的反转录病毒极为相似,其主要特征之一是在两端具有长的同向末端重复序列(LTR ),而两个末端的每一个末端又各具备一个倒转重复序列。LTR 主要携带有转录起始和终止信号以满足转录及转录后的RNA 作为中介通过反转录完成转座的需要。

②逆转座子含有内部编码区,编码反转录病毒的种群专一性抗原和多蛋白相类似的蛋白质,与反转录病毒的主要区别在于它小具备编码外壳蛋白的env 基因,囚而不具备感染能力。

③根据内部编码区中内切酶编码区和反转录酶编码区的位置不同,通常把植物逆转座子划分为两组:一组的内切酶编码区在反转录酶区的下游端,称为Ty3/gypsy型; 另一组内切酶编码区在反转录酶编码区的上游端,称为Ty/copia型。

11.什么是葡萄糖效应?

【答案】葡萄糖效应即降解物阻遏,是指在培养基中葡萄糖和乳糖(其他糖类类似)同时存在时,葡萄糖的代谢 产物阻遏了其他糖类操纵子激活复合物的形成,从而使得对应结构基因无法转录,最终影响乳糖的利用的现象。

12.写出DNA , RNA , mRNA 和siRNA 的英文全名。

【答案】(1)DNA :deoxyribonucleic acid;

(2)RNA :ribonucleic acid;

(3)mRNA :mMessenger RNA;

(4)siRNA :small interfering RNA。

13.什么是编码链? 什么是模板链?

【答案】(1)编码链即有义链,是指DNA 双链中与mRNA 的序列(在RNA 中是以U 取代了DNA 中的T )和方向相同,不能充当转录模板的那条DNA 链。

(2)模板链即反义链,是指DNA 双链中作为转录模板利用碱基互补配对原则指导mRNA 前体合成的那条DNA 链。

14.什么是CpG 岛? CpG 岛高度甲基化所表示的含义是什么?

【答案】在真核生物中,5-甲基胞嘧啶主要出现在CpG 序列、CpXpG 、CCA/TGG和GATC 中。因为高等生物CpG 二核苷酸序列中的C 通常是甲基化的,极易自发脱氨,生成胸腺嘧啶,所以,CpG 二核苷酸序列出现的频 率远远低于按核苷酸组成计算出的频率。由于这些CpG 二核苷酸通常成串出现在DNA 上,这段序列往往被称为 CpG 岛。

DNA 甲基化导致某些区域DNA 构象变化,从而影响了蛋白质与DNA 的相互作用,抑制了转录因子与启动 区DNA 的结合效率。甲基胞嘧啶在DNA 上并不是随机分布的,基因的5’端和3’端往往富含甲基化位点, 而启动区DNA 分子上的甲基化密度与基因转录受抑制程度密切相关。甲基化CpG 的密度和启动子强度之间的平 衡决定了启动子是否具有转录活性。此外,由于CpG 高度甲基化也增加了胞嘧啶残基突变的可能性,所以

调节基因表达。

15.简述2~3种检测蛋白质间相互作用的方法。

【答案】蛋白质相互作用分为3个方面:一是多亚基蛋白质的形成;二是多成分的蛋白复合体,如核孔复合体等; 三是瞬时蛋白质相互作用。

(1)蛋白质亲和层析

将所研究蛋白的配体蛋白预先连接在基质如琼脂糖珠上,连有配体蛋白的琼脂搪置于过滤柱上,当含有所研 究蛋白的混合悬液经过过滤柱时,目标蛋白就会粘在柱子上。然后用低盐缓冲液冲去杂质,再用高盐缓冲液或十二烷基硫酸钠(SDS )将粘在柱子上的目标蛋白洗脱下来进行检测。在亲和柱上,可利用纯化的融合蛋白以两种 方式检测相互作用:一种是将融合蛋白共价连接在树脂上,让抽提物过柱;二是把融合蛋白非共价结合于琼脂糖 珠上,使抽提物和珠子混在一起. 该方法具有较高的灵敏性,但可能存在假阳性,如2个蛋白通过中间蛋白相互 连接也会被抽提出来。

(2)亲和印迹

蛋白质用聚丙烯酞胺凝胶电泳(PAGE )胶分离后,转移至硝酸纤维素膜上,然后利用特异性蛋白质、肽段 或配体作为探针检测膜上的蛋白质。该技术与免疫印迹方法不同的是,免疫印迹使用抗体作为检测的探针。该方 法可以直接分析全细胞裂解液等蛋白质复合物,而不需要纯化蛋白。所以. 它特别适合于分析膜蛋白,如细胞受体等。但是,需要特别注意的是,通常混合物在有SDS 存在的情况下分离,而在印迹时需要去除变形剂,使变性的蛋白质全部或部分复性。如果蛋白质在变性后无法复性,则需要一个非变性的胶分离系统。

也作为内源性诱变剂或致癌因子