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2018年武汉科技大学医学院616分子生物学之现代分子生物学考研强化五套模拟题

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2018年武汉科技大学 医学院616分子生物学之现代分子生物学考研强化五套模拟题(一) .. 2

2018年武汉科技大学 医学院616分子生物学之现代分子生物学考研强化五套模拟题(二) .. 5 2018年武汉科技大学 医学院616分子生物学之现代分子生物学考研强化五套模拟题(三) 10 2018年武汉科技大学 医学院616分子生物学之现代分子生物学考研强化五套模拟题(四) 13 2018年武汉科技大学 医学院616分子生物学之现代分子生物学考研强化五套模拟题(五) 18

一、名词解释

1.

【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件,它位于特定的mRNA 区域,可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物,继而发生构象重排,影响mRNA 活性。

2. Nonsence mutation

【答案】无义突变。无义突变是指由于结构基因中某个碱基的替换,使得原来编码某一氨基酸的密码子突变为终 止密码子UAA 、UGA 、UAG 中的一种,致使肽链的合成提前终止,肽链缩短,产生无活性的多肽片段的突变。

3. RNA 编辑(RNA editing)

【答案】RNA 编辑是指某些RNA ,特别是mRNA 前体的一种加工方式,如插入、删除或取代一些核苷酸残基,导致DNA 所编码的遗传信息发生改变,因为经过编辑的mRNA 序列发生了不同于模板DNA 的变化。

4. Telomerase

【答案】端粒酶。端粒酶是指由蛋白质和RNA 两部分组成的一种反转录酶,其中RNA 作为模板序列,指导合成染色体末端的端粒DNA 的重复序列片段。

5. Attenuator

【答案】弱化子。弱化子是指当操纵子被阻遏时,RNA 合成终止,起终止转录信号作用的核苷酸序列。弱化子 对于基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA 的结构而发挥作用的,其调节作用的是某种对应氨酰-tRNA 的浓度,典型例子是细菌中的色氨酸操纵子。

二、简答题

6. 定义重组DNA 技术。

【答案】重组DNA 技术又称基因工程,是20世纪70年代初兴起的技术科学,是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种受体生物内,使之按照人们的意愿产生稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA 体外操作程序。

重组DNA 技术使受体细胞在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体

细胞的新的遗传性状。因此,供体、受体、载体是重组DNA 技术的三大基本元件。

严格地说,重组DNA 技术并不完全等于基因工程,因为后者还包括其他可能使生物细胞基因组结构得到改造的体系。

7. 如果一个基因与肿瘤的发生有关,如果设计实验以判断该基因是癌基因还是肿瘤抑制基因?

【答案】(1)检测该基因所表达蛋白在肿瘤组织中和正常细胞中的表达量。如果和正常组织相比,在癌细胞中该蛋白表达量很低甚至没有,该基因很可能是肿瘤抑制基因;如果先比之下癌组织中该蛋白高表达,则该基因是癌基因。

(2)进一步实验:敲除该基因在正常细胞系中的表达或抑制该基因表达,观察细胞转化的效果,与肿瘤组织进行比较分析。如果该基因被抑制以后,细胞分裂性增强,可初步确定该基因为肿瘤抑制基因;若减弱分裂则确定是癌基因。

8. 真核与原核生物基因转录有哪些差异?

【答案】真核与原核生物基因转录的差异有:

(1)RNA 聚合酶不同:原核生物只有一种RNA 聚合酶,而真核生物有3种以上RNA 聚合酶进行不同类型的转录,合成不同类型的的RNA ;

(2)初级转录产物不同:原核生物的初级转录产物大多是编码序列,而真核生物转录产物除了编码序列,还含有大量的内含子序列;

(3)转录后加工不同:原核生物的初级转录产物几乎无需加工就可直接作为翻译模板,而真核生物转录产物需经转录后加工,如剪接、修饰等,才能成为成熟的mRNA ;

(4)转录翻译的时序性不同:原核生物细胞中转录与翻译几乎是同步在细胞中进行,真核生物mRNA 的合成与蛋白质的合成则发生在不同的时空范畴内。

9. 简述DNA 结合结构域分类及碱性亮氨酸拉链结构的特点。

【答案】(1)蛋白质与DNA 结合区域存在一些特殊的基序(motif )结构,主要有:

①螺旋一转角一螺旋(HTH )基序。两段螺旋被一短的转角结构分开,其中一段螺旋为DNA 识别螺旋。 ②锌指基序。由肽链的保守序列中的一对组氨酸加一对半胱氨酸

或2

对半胱氨酸

与一个锌离子形成配位键,这些氨基酸对之间的多肽链成环状突出并折迭成指形结构,多个指结构常串联重复。 锌指族转录因子以二聚体形式同DNA 上的顺式调控元件结合。含锌指基序的转录因子,与GC 盒结合的SP1、 类固醇激素受体家族,抑癌蛋内

1^11都位于螺

等。 ③亮氨酸拉链基序。由一段每隔6个aa 就有一个Leu 的伸展肽链组成,这些周期性出现的 旋的同一侧面,因此两条均含Leu 拉链基序的蛋白质通过亮氨酸侧链的相互作

用形成二聚体。具有亮氨酸拉链基 序的转录因子,如原癌基因

④螺旋一环一螺旋(HLHt )基序。由2个a 螺旋间隔一个非螺旋的环(loop )组成,如原癌

基因产物 及其结合蛋白Max 。

⑤同源域(ho-meodomain )蛋白。来自控制躯体发育的基因,长约60个氨基酸,其中的DNA 结合区与螺旋 一转角一螺旋相似,主要与DNA 大沟相结合。

(2)碱性亮氨酸拉链结构的特点:

①两个蛋白质分子近处C 端肽段各自形成两性a 螺旋, ot 螺旋的肽段每7个氨基酸残基出现一个亮氨酸残基, 两个a 螺旋的疏水面互相靠拢,两排亮氨酸残基疏水侧链排列成拉链状,形成疏水键使蛋白质结合成二聚体;

②亮氨酸拉链区并不能直接结合DNA , 只有肽链氨基端20~30个富含碱性氨基酸结构域与DNA 结合。

10.真核mRNA 有哪些转录后修饰事件?详细叙述大部分真核mRNA 3'端的修饰过程。

【答案】(1)真核mRNA 转录后修饰事件有:

①5' 端形成特殊的帽子结构;

②在链的Y 端切断并加上多聚腺苷酸poly (A )尾巴;

③通过拼接去除内含子转录而来的序列;

④链内部核苷被甲基化;

⑤发生RNA 编辑和再编码。

(2)大部分真核mRNA 31端的修饰过程:首先由核酸内切酶切开mRNA 3'端的特定部位,然后由poly (A ) 合成酶催化多聚腺哲酸反应,加入poly (A )尾巴。加poly (A )位点上游10~35个核苷酸处有AAUAAA 序列,下 游约50核苷酸处有富含GU 序列,这两处序列是剪切和加poly (A )所需的信号。首先由剪切和聚腺苷化特异因 子(CPSF )结合到上游富含AAUAAA 序列,剪除刺激因子(CSF )与下游富含GU 序列作用,剪除因子(CF ) I 、II 相继与之结合,使其更趋稳定。在剪除之前,poly (A )聚合酶结合到复合物上,使剪切后游离的能迅速 腺苷酸化。

三、论述题

11.cDNA 合成时的方向性是如何实现的?

【答案】(1)在cDNA 合成过程中,选用活性较高的反转录酶及甲基化dCTP 保证新合成的cDNA 链被甲基化修饰,以防止构建克隆时被限制性内切核酸酶切割。

(2)在cDNA 两端加上不同内切酶所识别的接头序列,可以保证所获得双链cDNA 的方向性。