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2018年武汉科技大学医学院616分子生物学之现代分子生物学考研核心题库

  摘要

一、名词解释

1. Molecular Bescons

【答案】分子信标。分子信标是指一种具有自身配对区的DNA 寡核苷酸分子探针,利用荧光标记探针的碱基配对原理,通过观察探针荧光显示或淬灭的现象,确定目的基因的分子标记。

2. 基因超家族

【答案】基因超家族是指一组由于序列的同源性通过序列比对可以彼此匹配而相关的基因。判定同源的主要标准是核苷酸残基的保守性,并参考功能的相似性。

3. tmRNA

【答案】转移—信使RNA 。tmRNA 是指细菌体内一种修复翻译水平上受阻的遗传信息表达过程的反式翻译机制的核心分子,它兼具tRNA 和mRNA 的特点,在SmpB 蛋白的帮助下特异性识别携带mRNA 缺失体的核糖体,在核糖体蛋白S1的传递作用下结合在A 位点上,一方面延续被中断的mRNA 上的遗传信息,一方面终止蛋白质的合成,释放被束缚的核糖体和tRNA 进入新的翻译过程。

4. SDS 电泳(SDS-PAGE )

【答案】SDS 电泳(SDS-PAGE )是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小,在恒定pH (碱性) 缓冲系统中分离的方法,主要用于测定蛋白质亚基分子质量。

5. 分子伴侣(molecular chaperone)

【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质,它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解,如热休克蛋白。

二、简答题

6. 真核生物转录时mRNA 的Poly (A )尾巴是如何加上的?

【答案】多聚A 尾的生成是多聚A 聚合酶的催化下,由ATP 聚合而成。但多聚A 尾形成并不是简单地加入A , 而是先要在mRNA 前体的3' 末端11〜30核苷酸处有一段AAUAAA 保守序列,在U7-snRNP 的协助下识别, 由一种特异的核酸内切酶催化切除多余的核苷酸。随后,在多聚A 聚合酶催化下,发生聚合反应形成了:T 末端多聚A 尾。此过程中,RNA 为受体,ATP 为供体,需要Mg2+或Mna+及蛋白质参与作用。

7. 简述叶绿体蛋白质的跨膜运转机制。

【答案】叶绿体定位信号肽一般有两部分:第一部分决定该蛋白质能否进人叶绿体基质,第二部分决定该蛋白质能否进人类囊体。叶绿体蛋白质的跨膜运转机制:

(1)胞质中游离核糖体上合成的叶绿体多肽。

(2)叶绿体多肽在脱离核糖体后折叠成具有三级结构的蛋白质分子。

(3)多肽上某些特定位点结合于只有叶绿体膜上才有的特异受体位点,产生跨膜通道,进入叶绿体基质。

(4)在位于叶绿体基质内的可溶性活性蛋白水解酶的作用下,叶绿体多肽的第一部分跨膜信号肽切除,并 在第二部分信号肽的引导下,跨过类囊体膜,进入类囊体。

(5)切除第二部分信号肽,成为成熟的叶绿体蛋白质。

8. 已知真核生物的核糖体由4种rRNA 和80多种不同的核糖体蛋白组成,为什么真核生物细胞内rRNA 的基因拷贝数远多于核糖体蛋白的基因?

【答案】一方面,细胞内的RNA 的半衰期比蛋白质要短得多,要行使功能必须有大量基因不断表达。另一方面,细胞内要合成蛋白质需要合成mRNA , 通过mRNA 翻译成蛋白原,而mRNA 可以经过核糖体阅读多次,所以只要一次转录就能产生大量同样的蛋白质,但rRNA 直接转录过来行使功能,无法一次转录产生大量同样的行使功能的rRNA 。一个mRNA 可以翻译多个核糖体蛋白,一个rRNA 只能自己构成核糖体成分。

9. 有几种终止密码子?它们的序列和别名是什么?

【答案】(1)有三种终止密码子。

(2)它们的序列为UAA 、UGA 和UAG , 别名分别为赭石密码、琥珀密码和蛋白石密码。

10.简述双脱氧链终止法进行DNA 测序的原理和方法。

【答案】(1)原理:双脱氧的核苷酸是人造的分子,

这种分子糖环的

轻基基团,而在天然分子中糖环的

基互补配对原则是天然三磷酸核苷酸,用它的但是,若进入的核苷酸是双脱氧的,则由于

复制终止。

(2)方法:将待测序的单链DNA 的模板、引物、四种单脱氧碱基和DNA 聚合酶分成四管,在四管反应系 统中分别按比例引入四种双脱氧碱基,只要双脱氧碱基掺入链端,该链就停止延长,链端掺入单脱氧碱基的片段

可继续延长。如此每管反应体系中便合成以共同引物为

脱氧碱基为

不一的核酸片段(长度相邻者仅差一个碱基),根据片段

片段的碱基排列顺序。

和碳上都没有了g 基连接。碳上有一个羟基。在DNA 复制过程中,新掺入的碱基按碱磷酸基团同生长链的前一个核苷酸的没有羟基而影响下一个磷酸二酯键的形成,导致DNA 端,以双端的一系列长度不等的核酸片段。反应终止后,分四个泳道进行电泳,以分离长短端的双脱氧碱基,便可依次阅读合成

三、论述题

11.简述组蛋白乙酰化和去乙酰化影响基因转录的机制。

【答案】(1)组蛋白的乙酰化影响

核心组蛋白各部分通过组蛋白N 端“尾巴”上Lys 的乙酰化中和了组蛋白尾巴的正电荷,降低了其与DNA 的亲和性,使得核小体结构更加松散,转录调节蛋白更容易与染色质基因组的相互接触,有利于提高基因的转录 活性。

(2)组蛋白的去乙酰化影响

组蛋白的去乙酰化与基因活性的阻遏有关。组蛋白去乙酰化酶专一性结合于某个或某类基因启动子区附近的 组蛋白位点,使组蛋白相应位点去乙酰化,使得染色质结构变化,基因转录活性降低,核小体能相互靠近,在转录抑制因子的协助下,抑制基因的转录。