● 摘要
黄酮类化合物在自然界中分布广泛，主要存在于植物的叶片和果实中。黄酮类药物具有抗脑缺血、抗心肌缺血、抗心律失常、镇痛、保肝护肝、对消化性溃疡的保护、抗病毒、抗肿瘤作用等。此外，还有大量研究表明黄酮类天然产物有效成分有降压、降血脂和抑制血小板聚集等多种药理作用。为此，受到各国政府和医药、食品等行业的高度重视和关注。
苦杏仁皮作为苦杏仁加工的副产物，颜色近红色，含有多种具有抗氧化能力的活性物质，对人体营养和健康有着重要影响。本文以苦杏仁皮为原料，对其中黄酮类物质进行提取、分离纯化及抗氧化活性初步研究，为苦杏仁皮的综合开发利用进行了初步的探讨。其主要研究如下:
1.本试验采用紫外可见分光光度法对苦杏仁皮总黄酮作定性分析。建立了紫外可见分光光度法对苦杏仁皮总黄酮的测定方法。在以芦丁为标准品，检测波长λ=510nm时，在7.76一77.6μg/ml范围内，其浓度与吸光度呈良好的线性关系，回归方程为A=0.0048C+0.0177，相关系数R2=0.9929。
2.在提取工艺研究中，采用乙醇溶液为浸提剂，以苦杏仁皮总黄酮含量为考察指标，通过单因素实验、响应面优化实验以及方差分析，对提取条件进行了优化，确定了最佳提取工艺为乙醇浓度为68%、固液比为1:23（g/ml）、提取时间为5min，黄酮得率为15.198mg/g。
3.本试验采用大孔树脂对苦杏仁皮总黄酮进行分离纯化。根据大孔树脂的吸附原理，采用静态吸附与解吸实验对大孔树脂进行筛选。再通过单因素实验确定了苦杏仁皮总黄酮分离纯化的最佳条件。在静态吸附与解吸实验中，D-101大孔树脂展现出了对苦杏仁皮总黄酮良好的吸附性能与解吸效果，静态饱和吸附量达到6.72mg/g、解吸率达到92.4%。实验结果显示出待纯化液的浓度和上柱速度明显影响树脂对苦杏仁皮总黄酮的吸附效果，而洗脱效果与洗脱剂浓度、洗脱速度以及洗脱剂用量相关。根据实验结果确定的最佳吸附条件为:上柱速度为2.0BV/h，黄酮液浓度为1.71mg/ml，洗脱剂为浓度为80%的乙醇，洗脱流速为2BV/h，洗脱体积约为3BV，经处理后的总黄酮含量由26.8%变成60.5%。
4. 实验通过测定苦杏仁皮总黄酮对DPPH·自由基、·OH自由基、超氧阴离子自由基的清除能力以及还原能力，探讨其体外抗氧化活性。结果显示：苦杏仁皮总黄酮有较强的还原能力，当浓度达到0.5 mg/ml时，其还原能力几乎接近于阳性对照BHT；苦杏仁皮总黄酮的浓度在0.125 mg/ml时，对DPPH·的清除率达到82.5%；对超氧阴离子的清除活性与Vc相当，IC50=1.37mg/ml；当浓度为0.125 mg/ml时，对·OH清除活性与Vc相当。这些实验表明苦杏仁皮总黄酮具有较强的体外抗氧化活性。