2017年南京大学医学院841分子生物学B考研导师圈点必考题汇编
● 摘要
一、名词解释
1． 基因扩増
【答案】基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象，结果使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要。
2． Molecular Bescons
【答案】分子信标。分子信标是指一种具有自身配对区的DNA 寡核苷酸分子探针，利用荧光标记探针的碱基配对原理，通过观察探针荧光显示或淬灭的现象，确定目的基因的分子标记。
3． DNA Fingerprint
DNA 指纹。DNA 指纹是指由于限制性酶切位点的改变或DNA 序列中重复序列等原【答案】
因，以及一些DNA 遗传标记的差异性，生物个体DNA 表现的个体间的差异，这些个体差异反映了个体的身份。利用DNA 指纹鉴定个体差异的技术为DNA fingerprinting，用于亲子鉴定。
4． 聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）
【答案】聚合酶链式反应，简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应有选择地大量扩增 （包括分离）一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补，经过模板DNA 变性，模板DN Α-引物的配对，在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应，三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链，经多次循环后得到大量目标DNA 片。 5．
【答案】泛素（遍在蛋白）。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中，主要功能是标记需要分解掉的蛋白质，使其被水解的小蛋白。
6． polysome
【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体，能同时合成若干条蛋白质多肽链。
7． 感受态细胞（competent cell）
【答案】感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法（如CaCL 等化学试剂）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。
8． Attenuator
【答案】弱化子。弱化子是指当操纵子被阻遏时，RNA 合成终止，起终止转录信号作用的核苷酸序列。弱化子 对于基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA 的结构而发挥作用的，其调节作用的是某种对应氨酰-tRNA 的浓度，典型例子是细菌中的色氨酸操纵子。
二、简答题
9． 简述真核细胞内核小体的结构特点。
【答案】核小体是染色体的基本结构单位，由DNA 和组蛋白构成。核小体的结构特点: （1）每个核小体单位包括200bp 左右的DNA 和一个组蛋白八聚体以及一个分子的组蛋白H 1
（2）组蛋白八聚体构成核小体的核心颗粒，由H 2A. ，H 2B ，H 3和H 4各两个分子所形成。 （3）有146bp 的DNA 分子直接以左手方向盘绕在八聚体颗粒的表面，其余的DNA 片段连接相邻的核小体。
（4）一个分子的组蛋白H 1与DNA 结合，锁住核小体DNA 的进出口，从而稳定了核小体的结构。
10．简述染色质免疫共沉淀（CHIP ）技术原理与基本过程。
【答案】（1）基本原理
在活细胞状态下固定蛋白质-DNA 复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免 疫学方法沉淀复合体，特异性地富集目的蛋白结合的DNA 片段，通过对目的片断的纯化与检测，获得该蛋白质 与DNA 相互作用的信息。
（2）基本过程
①首先用甲醛处理细胞，使DNA 和蛋白质固定在交联状态；
②接着用超声波法或酶法等处理处理细胞，获得一定长度范围内的染色质小片段； ③ 之后加入目的蛋白的抗体，使其与靶蛋白④ 随后加入ProteinA , 结合抗体-祀蛋白⑤ 得到富集复合物，解除交联，对纯化富集的
复合物结合；
复合物，并沉淀，清洗沉淀下来的复合物；
片断进行PCR 检测与分析，获得蛋白质
与DNA 相互作用的信息。
11．简述双脱氧链终止法进行DNA 测序的原理和方法。
【答案】（1）原理：双脱氧的核苷酸是人造的分子，这种分子糖环的基基团，而在天然分子中糖环的
互补配对原则是天然三磷酸核苷酸，用它的但是，若进入的核苷酸是双脱氧的，则由于复制终止。
（2）方法：将待测序的单链DNA 的模板、引物、四种单脱氧碱基和DNA 聚合酶分成四管，
和碳上都没有了轻
g 基连接。
碳上有一个羟基。在DNA 复制过程中，新掺入的碱基按碱基
磷酸基团同生长链的前一个核苷酸的
没有羟基而影响下一个磷酸二酯键的形成，导致DNA
在四管反应系 统中分别按比例引入四种双脱氧碱基，只要双脱氧碱基掺入链端，该链就停止延长，链端掺入单脱氧碱基的片段
可继续延长。如此每管反应体系中便合成以共同引物为脱氧碱基为
，根据片段
不一的核酸片段（长度相邻者仅差一个碱基）
端，以双
端的一系列长度不等的核酸片段。反应终止后，分四个泳道进行电泳，以分离长短
端的双脱氧碱基，便可依次阅读合成
片段的碱基排列顺序。
12．遗传密码有哪些特性？简述密码的简并性生物体的生物学意义。
【答案】（1）遗传密码具有以下特性： ①遗传密码是三联子密码
1个密码子由3个连续的核苷酸组成，特异性地编码1个氨基酸。 ②连续性
a. 密码子之间无任何核苷酸隔开；
b. 阅读mRNA 时是以密码子为单位，连续阅读，一次阅读3个核苷酸，不跳过任何mRNA 中的核苷酸。
③简并性
遗传密码的简并性是指由一种以上的密码子编码同一个氨基酸的现象，除AUG （Met ）和UGGCTry ）以外，每个氨基酸都有一个以上的密码子。
④通用性与特殊性
a. 所有的生物都有相同的遗传语言。 b. 但也有少数例外的不通用密码子。 ⑤摆动性
摆动学说认为，在密码子与反密码子的配对辨认中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三对碱基有一定的自由度，时常出现不严格配对，即可以“摆动”，因而会产生某些tRNA 可以识别1个以上的密码子的现象。
⑥方向性
密码子的阅读方向是与mRNA 的合成方向或mRNA 编码方向一致的，即从5' 端至3' 端，蛋白质合成的起始 和终止信号含在密码子中。
a. 无论在真核生物还是在原核生物中AUG （Met ）都是用作起始密码子，但在少数情况下也用GUG 。
b. 遗传密码表中有3个终止密码子，终止密码子没有相应的tRNA 存在，只供释放因子识别来实现翻译的 终止，对一个序列来说是很重要的位点。
（2）遗传密码简并性的生物学意义
编码同一氨基酸的几个三联体遗传密码中，一、二位碱基大多是相同的，只是第三位不同。如果密码子第三 位碱基出现了点突变，并不影响所翻译出的氨基酸种类。这样就减少了变异对生物的影响，对生物物种的稳定有一定意义。