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2017年青海大学生态环境工程学院616分子生物学与生物化学之现代分子生物学考研冲刺密押题

  摘要

一、名词解释

1. 蛋白质组(proteome )

【答案】蛋白质组是指一种生物或一个细胞、组织所表达的全套蛋ft 质(protein ), 即包括一种细胞乃至一种生 物所表达的全部蛋白质。

2. 移码突变(frameshi Kmutation)

【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变,从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。

3. 操纵子

【答案】操纵子是指原核生物基因中,多个功能上相关的结构基因串联排列在基因组序列中,构成信息区,连同上游启动区和操纵基因区及下游转录终止区一起构成的基因表达单位。

4. Nonsence mutation

【答案】无义突变。无义突变是指由于结构基因中某个碱基的替换,使得原来编码某一氨基酸的密码子突变为终 止密码子UAA 、UGA 、UAG 中的一种,致使肽链的合成提前终止,肽链缩短,产生无活性的多肽片段的突变。

5. 转录后加工(post-transcription processing)

【答案】转录后加工是指新合成的较大的前体RNA 分子,经过进一步的加工修饰,转变为具有生物学活性的、成熟的RNA 分子的过程,主要包括剪接、剪切和化学修饰。

6. 无义突变(nonsensemutation )

【答案】无义突变是指在DNA 序列中任何导致氨基酸的三联体密码子转变为终止密码子(UAG 、UGA 、U 从)的突变,它使蛋白质合成提前终止,合成无功能的或无意义的多肽。

7.

【答案】泛素(遍在蛋白)。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中,主要功能是标记需要分解掉的蛋白质,使其被水解的小蛋白。

8. DNA 的甲基化(DNAmethylation )

【答案】DNA 的甲基化是指一种表观遗传修饰,它是由DNA 甲基转移酶催化s-腺苷甲硫氨酸作为甲基的供体,将胞嘧啶转变为

甲基胞嘧啶的一种过程。

二、简答题

9. 简述全基因组鸟枪测序(whole genome shotgun sequencing)的基本步骤。

【答案】全基因组鸟枪测序法是在获得一定的遗传及物理图谱信息的基础上,将基因组DNA 分解成2kb 左右的数百万个DNA 小片段进行随机测序,辅以一定数量的10kb 的克隆和BAC 克隆的末端测序,利用超级计算机进行整合及序列组装。该方法是一种广泛使用的DNA 测序的方法,比传统的测序法快速,但精确度较差。其具体步骤为:

(4)建立高度随机、插入片段大小为2kb 左右的基因组文库。克隆数要达到一定数量,即经末端测序的克 隆片段的碱基总数应达到基因组5倍以上;

(5)高效、大规模的末端测序。对文库中每一个克隆,进行两端测序;

(6)序列集合。利用新的计算机软件,完善序列集合规则,最大限度地排除错误的连锁匹配;

(7)填补缺口。有两种待填补的缺口,一是没有相应模板DNA 的物理缺口,二是有模板DNA 但未测序的序列缺口。可以同时建立插入片段为15〜20kb 的文库以备缺口填补。

10.简述原核基因转录后调控的不同方式。

【答案】(1) mRNA 自身结构元件对翻译起始的调控

①起始密码子的突变会大大降低翻译效率;

②AUG 上游的一段非翻译区上SD 区域与起始密码子见的距离影响翻译效率;

③mRNA 的二级结构影响核糖体与mRNA 的结合,从而影响了翻译的效率。

(2)mRNA 稳定性对转录水平的影响

mRNA 分子被降解的可能性取决于它们的二级结构,mRNA 被降解翻译效率自然下降。 (3)调节蛋白质的调控作用

mRNA 特异性抑制蛋白则通过与核糖有些mRNA 编码的蛋白质可激活靶基因的翻译,相反,

体竞争结合 mRNA 分子来抑制翻译的起始。

(4)反义RNA 的调节作用

反义RNA 与特定的mRNA 互补配对来抑制mRNA 的翻译。

(5)稀有密码子对翻译的影响

由于细胞内稀有密码子的tRNA 较少,不易获得,因而延长了核糖体在mRNA 上行经的时间,从而降低了翻译的效率;

(6)重叠基因对翻译的影响

偶联翻译可能是保证两个基因产物在数量上相等的重要手段。

(7)翻译的阻遏

复制酶可以作为翻译阻遏物来调控蛋白质的合成。

(8)魔斑核苷酸水平对翻译的影响 魔斑核苷酸即分子,当细胞缺乏氨基酸时产生魔斑核苷酸,可在很大范围内做出如抑制核糖体和其他大分子合成的应急反应,活化某些氨基酸操纵子的转录表达,抑制与氨基酸转运无关的系统,活化蛋白水解酶等,以节省或开发能源,以渡过难关。

11.简述激活蛋白(CAP )对转录的正调控作用。

【答案】CAMP 与CRP 结合后形成复合物激活蛋白CAP 。在缺乏葡萄糖时,CAP 合成量增加,提高酶与启动子 结合常数,CAP 起到取代区功能的作用;CAP 还能抑制RNA 聚合酶与DNA 中其他位点的结合,提高与其特定启动子结合的概率。

12.简述真核生物RNA 聚合酶II 梭基端结构域的功能。

【答案】(1)转录起始时,CTD 的Ser , Thr 的轻基非磷酸化,易与DNA 结合;

(2)转录延伸时,CTD 的Ser , Thr 的轻基磷酸化,松弛与DNA 的结合;

(3)CTD 的磷酸化有利于5' 的带帽反应的发生,CTD 的长度以及表达量也会对带帽和加尾产生影响;

(4)CTD 的变化不仅影响剪接因子在核内的分布,而且还对mRNA 选择性剪接产生一定的影响。

13.核糖体有哪些活性中心?

【答案】核糖体至少有5个活性中心:

(1)mRNA 结合位点

位于核糖体小亚基上,在肽基转移位点附近,其功能是结合mRNA 和IF 因子。

(2)A Α-tRNA 结合位点(A 位点):

即氨酰基位点,即受位,主要位于大亚基,是接受氨酰-tRNA 的部位。

(3)肽基转移部位(P 位点)

即供位,或肽酰基位点,主要位于大亚基,是与延伸中的肽酰tRNA 结合位点。

(4)去氨酰-tRNA 释放位点(E 位点)

位于大亚基,是延伸过程中去氨酰-tRNA 的释放位点。

(5)转肽酶活性中心

位于P 位和A 位的连接处,是形成肽键的部位。

14.增强子的作用有哪些?

【答案】(1)增强效应十分明显。

(2)增强效应与位置和取向无关。

(3)大多为重复序列。

(4)增强效应一般具有组织或细胞特异性。