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一、名词解释

1． 脂肪酸的α-氧化。

【答案】脂肪酸的α-氧化是直接以游离的脂肪酸为底物，在α-C 上氧化，每进行一次氧化产

生少一个C

的脂肪酸和

2． 信号识别颗粒（signal recognition particle）。

【答案】信号识别颗粒是在真核细胞的胞质内存在的一种由小分子RNA （7S rRNA ）和6种不同蛋白质共同组 成的复合物，它能特异地识别和结合信号肽，并与核糖体结合，暂时阻断多肽链的合成，进而与内质网外膜上的 SRP 受体结合，信号肽就可插入内质网进入内腔，被内质网内膜壁上的信号肽酶水解。SRP 与受体解离并进入新 的循环，而信号肽后继肽段也进入内质网内腔，并开始继续合成多肽链。SRP 使分泌性蛋白及早进入细胞的膜性 结构，能够正确的折叠、进行必要的后期加工与修饰并顺利分泌出细胞。

3． 血脂。

【答案】血脂是血浆中所含的脂质的统称。组成血脂的脂质包括三酰甘油及少量二酰甘油和单酰甘油，磷脂主要是卵磷脂、胆固醇、胆固醇酯和游离脂肪酸。血脂并非以游离态存在，而常常以脂蛋白的形式存在，

可以分为乳糜微粒

脂蛋白

极高密度脂蛋白

4． 发卡结构。

结构类似于发卡。

5． 别嘌呤醇（allopurinol ）。

【答案】别嘌呤醇是指次黄嘌呤的结构类似物，可以抑制黄嘌呤氧化酶的活性，减少尿酸形成，用于治疗痛风。

6． 辅酶和辅基。

【答案】辅酶是指与蛋白结合比较松弛的小分子有机物质，用透析的方法很容易将辅酶与酶蛋白分开。辅基是指以共价键与酶蛋白相结合的辅助因子，用透析法不能去除。

第 2 页，共 31 页 极低密度脂蛋白

低密度脂蛋白高密度

【答案】发卡结构是指单链RNA 分子在分子内部形成部分双螺旋的结构，这种部分双螺旋的

7． 活化能（

的最小能量。

8． 稀有氨基酸。 ）。 【答案】（由动力学推导出来的）活化能是指化学反应中，由反应物分子到达活化分子所需

【答案】稀有氨基酸是组成蛋白质中的20种常见氨基酸以外的其他蛋白质氨基酸，它们是正常氨基酸的衍生物，如5-轻赖氨酸。

二、问答题

9． 假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？

如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？

你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的

种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条

小的条带。这一次染色方法是什么？为什么

会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？

【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。

（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。

（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。

为了将

的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，

可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。

10．用图描述在线粒体内膜上的电子传递复合体和电子载体的整个代谢途径。

【答案】见图。

第 3 页，共 31 页 大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这

图

11．如何通过实验证实在复制叉区域存在许多小片段（Okazaki 片段）？

【答案】用带标记的脱氧三磷酸核苷酸作为合成DNA 的原料，经过一段时间后，加入碱溶液使合成停止，检查 发现标记出现在小片段DNA 上，追踪标记发现带标记的DNA 分子质量相同而且在细胞DNA 中占较多的比例。

12．什么是生物膜的相变温度，其温度高低与幅度取决于哪些因素？

【答案】生物膜的相变温度是指生物膜从液晶态转变为似晶态的凝胶状态时的温度。相变温度本身取决于膜脂的组成，组成膜脂的酯酰链越短或者是不饱和程度高，其相变温度越低。此外，头部基团的极性对膜的相变温度也能产生明显的影响，例如：ethanolamine 头部基团比choline 头部基团具有更高的相变温度。

膜脂的基本组份是磷脂，因此，在一定的温度下，膜质的流动性主要取决于磷脂。只由一层磷脂组成的双层分子显示急剧地、特有地从液晶态转变为似晶态的凝胶状态地相变。凝胶态的磷脂膜较液晶态的厚，因为在低温下，磷脂分子的碳水化合物“尾巴”会变硬。这种凝胶态的膜流动性很小，仅有较少侧向扩散。相变温度决定于磷脂头部基团的性质和脂酰链的长度以及不饱和程度，链越短，不饱和程度越高，相变温度越低。各种膜脂由于组份不同而具有不同的相变温度。

另外，胆固醇含量、鞘磷脂的含量等影响膜的流动性的因素对膜的相变温度都会产生一定的影响。

13．半保留复制是如何用实验证明的？

【答案】

利用氮的同位素

标记大肠杆菌

分子标记上和先让大肠杆菌在以比普通为唯一碳源的培养密度大，用氯化

氮源）

杂合分子基中进行生长，连续培养12代，

使

中培养，经过一代后，

所有

两代以后

，

和 铯密度梯度离心时将形成不同的区带。若把

标记的大肠杆菌转移到普通培养基（含分子增多。当把

分子的半保留复制方式。 分子密度都介于之间，即形成了杂交分子。等量出现，若继续培养，

将看到

加热时，它们分开成为14N 和15N

链。这就充分证明了

14．目的DNA 片段的获得主要有哪几种方法？

【答案】获得DNA 片段的主要方法有：（1）化学法直接合成基因；（2）从基因组文库中获取目的基因；（3） 从cDNA 文库中获取目的基因；（4）通过PCR 直接扩增出目的基因。

15．翻译过程中需要哪四种组分？它们的功能是什么？

【答案】蛋白质的翻译至少需要以下四种组分。

（1

）在蛋白质生物合成中

，能够作为翻译的直接模板，

由线性单链分

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